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鸭H5亚型禽流感灭活疫苗的研究及其免疫应答的监测

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 引言第14-25页
   ·禽流感概述第14-15页
   ·禽流感疫苗概述第15-18页
     ·禽流感全病毒灭活疫苗第15-16页
     ·减毒活疫苗第16-17页
     ·禽流感亚单位疫苗第17页
     ·禽流感 DNA 疫苗第17-18页
     ·基因重组活载体疫苗第18页
   ·疫苗佐剂的研究现状和未来发展趋势第18-22页
     ·疫苗佐剂的作用、选择及安全性第18-19页
     ·佐剂的分类第19-22页
   ·机体抗流感病毒免疫应答反应第22-24页
     ·禽类对高致病性禽流感的免疫机制第22-23页
     ·疫苗免疫与病毒进化第23-24页
   ·本研究的目的和意义第24-25页
第二章 肉鸭最佳首免日龄研究第25-29页
   ·材料第25页
     ·疫苗生产种毒及攻毒用毒株第25页
     ·禽流感 Re-6 株标准抗原、阳性和阴性血清第25页
     ·实验动物和鸡胚第25页
   ·方法第25-26页
     ·攻毒毒株鸡胚半数感染量(EID50)测定第25页
     ·禽流感油乳剂灭活疫苗制备第25-26页
     ·樱桃谷肉鸭禽流感病毒携带情况和母源抗体消长规律监测第26页
     ·母源抗体攻毒保护试验第26页
     ·不同日龄鸭免疫禽流感灭活疫苗 HI 抗体检测第26页
   ·结果第26-28页
     ·攻毒病毒株鸡胚半数感染量(EID50)测定结果第26页
     ·白油佐剂禽流感灭活疫苗制备检测结果第26页
     ·疫苗安全性检验第26-27页
     ·樱桃谷肉鸭禽流感病毒携带情况和母源抗体消长规律监测结果第27页
     ·樱桃谷肉鸭母源抗体攻毒保护结果第27-28页
     ·不同日龄鸭免疫禽流感灭活疫苗 HI 抗体检测第28页
   ·讨论第28-29页
第三章 最佳含量的重组 SEA 和左旋咪唑禽流感灭活疫苗研究第29-36页
   ·材料第29页
     ·疫苗生产种毒、攻毒用毒株、菌种第29页
     ·实验动物和鸡胚第29页
     ·仪器和主要试剂第29页
   ·方法第29-31页
     ·rSEA 的制备第29-30页
     ·不同佐剂禽流感灭活疫苗的制备第30-31页
     ·不同 rSEA 含量白油佐剂禽流感灭活疫苗免疫效果比较第31页
     ·白油、白油+rSEA、白油+rrSEA 佐剂禽流感灭活疫苗免疫抗体比较第31页
     ·左旋咪唑作为禽流感疫苗佐剂剂量优化研究第31页
   ·结果第31-35页
     ·重组 SEA SDS-PAGE 电泳及 western-blot 鉴定结果第31页
     ·重组 SEA 对体外淋巴细胞的增殖活性试验结果第31-32页
     ·不同 rSEA 含量白油佐剂禽流感灭活疫苗免疫效果比较第32-33页
     ·白油、白油+rSEA、白油+rrSEA 佐剂禽流感灭活疫苗免疫抗体比较第33-34页
     ·左旋咪唑作为禽流感疫苗佐剂剂量优化结果第34-35页
   ·讨论第35-36页
第四章 不同佐剂禽流感灭活疫苗对 SPF 鸭免疫效果研究第36-42页
   ·材料第36页
     ·疫苗种毒、攻毒用毒株第36页
     ·禽流感 HI 试验抗原、阳性和阴性血清第36页
     ·主要仪器第36页
     ·疫苗佐剂第36页
     ·实验动物和鸡胚第36页
   ·方法第36-38页
     ·白油佐剂和白油+rSEA 佐剂禽流感灭活疫苗的制备第36-37页
     ·蜂胶佐剂禽流感灭活疫苗的制备第37页
     ·Montanide ISA 71VG 佐剂禽流感灭活疫苗的制备第37页
     ·Montanide ISA 206VG 佐剂禽流感灭活疫苗的制备第37页
     ·左旋咪唑佐剂、rSEA 佐剂及无佐剂禽流感灭活疫苗的制备第37页
     ·不同佐剂禽流感疫苗安全性检验第37页
     ·试验分组、疫苗免疫及攻毒保护效果研究第37-38页
   ·结果第38-40页
     ·不同佐剂禽流感灭活疫苗安全性检验第38页
     ·油乳剂禽流感灭活疫苗免疫 SPF 鸭抗体研究第38页
     ·蜂胶和水剂禽流感灭活疫苗免疫 SPF 鸭后抗体检测第38页
     ·不同佐剂禽流感灭活疫苗免疫后攻毒保护情况第38-40页
   ·讨论第40-42页
第五章 鸭 IFN-γ和 IL-2 mRNA 荧光定量 RT-PCR 方法的建立第42-47页
   ·材料第42页
   ·方法第42-43页
     ·实时荧光定量 RT-PCR 用引物设计与合成第42页
     ·肉鸭组织 Total RNA 样品的制备和质量鉴定第42-43页
     ·常规 PCR 反应体系和条件优化第43页
     ·荧光定量 RT-PCR 反应体系和条件优化及相对标准曲线的建立第43页
     ·特异性、稳定性和重复性检测第43页
   ·结果第43-45页
     ·组织提取 Total RNA 质量鉴定第43页
     ·常规 PCR 反应体系和条件优化第43-44页
     ·实时荧光定量 RT-PCR 反应体系和条件优化及相对标准曲线建立第44-45页
     ·特异性、稳定性和重复性第45页
   ·讨论第45-47页
第六章 不同佐剂禽流感灭活疫苗对肉鸭的免疫效果研究第47-56页
   ·材料第47页
     ·禽流感灭活疫苗以及攻毒用毒株第47页
     ·主要仪器、材料和试剂第47页
     ·实验动物和鸡胚第47页
   ·方法第47-48页
     ·不同佐剂禽流感灭活疫苗免疫肉鸭后的免疫反应及疫苗吸收检测第47-48页
     ·不同佐剂禽流感灭活苗对樱桃谷鸭免疫攻毒保护试验第48页
     ·统计分析方法第48页
   ·结果第48-54页
     ·不同佐剂禽流感灭活疫苗免疫樱桃谷肉鸭 HI 抗体检测第48-49页
     ·不同佐剂禽流感灭活疫苗对樱桃谷肉鸭外周血淋巴细胞增殖活性的影响第49-50页
     ·不同佐剂禽流感灭活疫苗免疫樱桃谷肉鸭脾脏中IFN-γ和IL-2 mRNA表达量的检测第50-51页
     ·不同佐剂疫苗免疫肉鸭后疫苗代谢吸收情况第51-53页
     ·不同佐剂禽流感灭活疫苗对樱桃谷肉鸭免疫攻毒保护试验第53-54页
   ·讨论第54-56页
第七章 全文结论第56-57页
参考文献第57-63页
致谢第63-64页
作者简介第64页

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