摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩写词 | 第10-12页 |
第1章 文献综述 | 第12-21页 |
·2型猪链球菌病 | 第13-19页 |
·历史概况 | 第13页 |
·病原学 | 第13页 |
·流行病学 | 第13-14页 |
·致病机理 | 第14-15页 |
·临床症状和病理变化 | 第15-16页 |
·诊断 | 第16页 |
·防制 | 第16-17页 |
·主要毒力因子 | 第17-19页 |
·疫苗的研究进展 | 第19-21页 |
·灭活疫苗 | 第19页 |
·活菌疫苗 | 第19页 |
·基因工程疫苗 | 第19-21页 |
第2章 研究的目的和意义 | 第21-22页 |
第3章 2型猪链球菌GlnA/ECE1双基因缺失株的构建 | 第22-40页 |
·实验材料 | 第22-24页 |
·所用的菌株、质粒和细胞 | 第22页 |
·所用培养基与抗生素及其配方 | 第22页 |
·所用缓冲液及其配方 | 第22-23页 |
·试剂盒和主要试剂 | 第23页 |
·引物 | 第23页 |
·实验动物 | 第23-24页 |
·实验方法 | 第24-28页 |
·菌种的复苏 | 第24页 |
·质粒的中量提取(试剂盒) | 第24页 |
·目的质粒电转入S.suis SC19△GlnA | 第24-25页 |
·基本生物学特性研究 | 第25-26页 |
·细胞感染实验 | 第26-27页 |
·CD1小鼠的感染实验 | 第27-28页 |
·实验结果与分析 | 第28-37页 |
·双基因缺失株的鉴定 | 第28-29页 |
·双基因缺失株基本生物学特性的研究 | 第29-32页 |
·细胞感染实验 | 第32-34页 |
·CD1小鼠感染实验 | 第34-37页 |
·讨论 | 第37-40页 |
·GlnA/ECE1双基因的选择 | 第37-38页 |
·GlnA/ECE1双基因缺失株的筛选 | 第38页 |
·GlnA/ECE1双基因缺失株的致病力变化 | 第38-40页 |
第4章 2型猪链球菌ECE1单克隆抗体的制备 | 第40-56页 |
·实验材料 | 第40-42页 |
·所用质粒和细胞 | 第40-41页 |
·主要试剂 | 第41页 |
·缓冲液和试剂配方 | 第41-42页 |
·引物序列 | 第42页 |
·实验动物 | 第42页 |
·实验方法 | 第42-51页 |
·2型猪链球菌SC19基因组的提取 | 第42-43页 |
·ECE1重组表达质粒的构建 | 第43-46页 |
·内皮素转化酶1的表达和纯化 | 第46-47页 |
·细胞融合与阳性克隆株的筛选 | 第47-50页 |
·小鼠腹水抗体的制备 | 第50-51页 |
·Western blot验证试验 | 第51页 |
·实验结果与分析 | 第51-55页 |
·ECE1全长序列的扩增 | 第51-52页 |
·克隆载体和表达载体的构建 | 第52页 |
·ECE1表达条件的确定 | 第52-53页 |
·间接ELISA中ECE1最佳包被浓度的确定 | 第53-54页 |
·杂交瘤细胞的制备和筛选 | 第54页 |
·western blot验证实验 | 第54-55页 |
·讨论 | 第55-56页 |
第5章 结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-61页 |
致谢 | 第61页 |