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2型猪链球菌GlnA/ECE1双基因缺失株的构建和ECE1单克隆抗体的制备

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
缩写词第10-12页
第1章 文献综述第12-21页
   ·2型猪链球菌病第13-19页
     ·历史概况第13页
     ·病原学第13页
     ·流行病学第13-14页
     ·致病机理第14-15页
     ·临床症状和病理变化第15-16页
     ·诊断第16页
     ·防制第16-17页
     ·主要毒力因子第17-19页
   ·疫苗的研究进展第19-21页
     ·灭活疫苗第19页
     ·活菌疫苗第19页
     ·基因工程疫苗第19-21页
第2章 研究的目的和意义第21-22页
第3章 2型猪链球菌GlnA/ECE1双基因缺失株的构建第22-40页
   ·实验材料第22-24页
     ·所用的菌株、质粒和细胞第22页
     ·所用培养基与抗生素及其配方第22页
     ·所用缓冲液及其配方第22-23页
     ·试剂盒和主要试剂第23页
     ·引物第23页
     ·实验动物第23-24页
   ·实验方法第24-28页
     ·菌种的复苏第24页
     ·质粒的中量提取(试剂盒)第24页
     ·目的质粒电转入S.suis SC19△GlnA第24-25页
     ·基本生物学特性研究第25-26页
     ·细胞感染实验第26-27页
     ·CD1小鼠的感染实验第27-28页
   ·实验结果与分析第28-37页
     ·双基因缺失株的鉴定第28-29页
     ·双基因缺失株基本生物学特性的研究第29-32页
     ·细胞感染实验第32-34页
     ·CD1小鼠感染实验第34-37页
   ·讨论第37-40页
     ·GlnA/ECE1双基因的选择第37-38页
     ·GlnA/ECE1双基因缺失株的筛选第38页
     ·GlnA/ECE1双基因缺失株的致病力变化第38-40页
第4章 2型猪链球菌ECE1单克隆抗体的制备第40-56页
   ·实验材料第40-42页
     ·所用质粒和细胞第40-41页
     ·主要试剂第41页
     ·缓冲液和试剂配方第41-42页
     ·引物序列第42页
     ·实验动物第42页
   ·实验方法第42-51页
     ·2型猪链球菌SC19基因组的提取第42-43页
     ·ECE1重组表达质粒的构建第43-46页
     ·内皮素转化酶1的表达和纯化第46-47页
     ·细胞融合与阳性克隆株的筛选第47-50页
     ·小鼠腹水抗体的制备第50-51页
     ·Western blot验证试验第51页
   ·实验结果与分析第51-55页
     ·ECE1全长序列的扩增第51-52页
     ·克隆载体和表达载体的构建第52页
     ·ECE1表达条件的确定第52-53页
     ·间接ELISA中ECE1最佳包被浓度的确定第53-54页
     ·杂交瘤细胞的制备和筛选第54页
     ·western blot验证实验第54-55页
   ·讨论第55-56页
第5章 结论第56-57页
参考文献第57-61页
致谢第61页

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