致谢 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-16页 |
第一部分 新型低氧选择性化合物Q6抗肿瘤作用及其靶点研究 | 第16-61页 |
·引言 | 第16-18页 |
·实验材料和仪器 | 第18-21页 |
·实验仪器 | 第18-19页 |
·药物 | 第19页 |
·试剂 | 第19-20页 |
·细胞株 | 第20页 |
·动物 | 第20-21页 |
·实验方法 | 第21-27页 |
·实验结果 | 第27-55页 |
·讨论 | 第55-61页 |
第二部分 新型低氧选择性化合物Q6对HIF-1α的调控机制研究 | 第61-115页 |
·引言 | 第61-63页 |
·实验材料和仪器 | 第63-65页 |
·实验仪器 | 第63页 |
·药物 | 第63-64页 |
·试剂 | 第64-65页 |
·细胞株 | 第65页 |
·动物 | 第65页 |
·实验方法 | 第65-77页 |
·人肝癌细胞及正常肝细胞常规培养 | 第65页 |
·Western blotting法检测蛋白表达 | 第65-68页 |
·实时荧光定量PCR法测定HIF-1α及VEGF基因转录水平 | 第68-69页 |
·双荧光素酶报告基因检测HIF-1α的转录活性 | 第69页 |
·电子显微镜检测自噬 | 第69-70页 |
·siRNA技术沉默HepG2和Bel-7402细胞的Atg5,Atg8,P62 | 第70-71页 |
·免疫电镜观察HIF-1α被自噬体吞噬的情况 | 第71页 |
·免疫荧光 | 第71-72页 |
·免疫沉淀法 | 第72页 |
·瘤组织苏木素&伊红染色法(H&E染色) | 第72-73页 |
·免疫组化 | 第73-75页 |
·AKT/PKB的激酶活性检测 | 第75页 |
·EGFR的激酶活性检测 | 第75-76页 |
·PI3Kα的激酶活性检测 | 第76-77页 |
·SRB染色法测定肿瘤细胞的增殖 | 第77页 |
·数据分析 | 第77页 |
·实验结果 | 第77-110页 |
·Q6抑制HIF-1α蛋白表达 | 第77-80页 |
·Q6抑制HIF-1α的转录活性 | 第80-83页 |
·Q6不影响HIF-1α mRNA水平 | 第83-85页 |
·Q6对HIF-1α蛋白合成通路的影响 | 第85-88页 |
·Q6可加速HIF-1α通过溶酶体通路的降解 | 第88-91页 |
·Q6可激活自噬 | 第91-95页 |
·Q6加速HIF-1α降解是自噬所依赖的 | 第95-102页 |
·P62参与了HIF-1α的自噬溶酶体通路的降解 | 第102-107页 |
·体内检测Q6对HIF-1α蛋白表达的影响 | 第107-110页 |
·讨论 | 第110-115页 |
总结与展望 | 第115-116页 |
参考文献 | 第116-122页 |
综述 | 第122-132页 |
参考文献 | 第132-142页 |
作者简历及在校期间所取得的科研成果 | 第142-144页 |