| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-19页 |
| ·干细胞概述 | 第11-13页 |
| ·胚胎干细胞概述 | 第11-12页 |
| ·胚胎干细胞建系进展 | 第12-13页 |
| ·猪胚胎干细胞研究进展 | 第13-14页 |
| ·影响猪ESC建系的因素 | 第14-16页 |
| ·滋养层干细胞研究进展 | 第16-17页 |
| ·Oct4-eGFP 报告系统 | 第17-18页 |
| ·本研究的目的意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-31页 |
| ·实验材料 | 第19-23页 |
| ·材料 | 第19页 |
| ·实验仪器 | 第19-20页 |
| ·实验试剂及配制 | 第20-22页 |
| ·实验耗材 | 第22-23页 |
| ·猪胚胎干细胞分离培养 | 第23-27页 |
| ·饲养层的准备 | 第23-24页 |
| ·猪核移植囊胚的获得 | 第24页 |
| ·猪孤雌囊胚的获得 | 第24页 |
| ·猪胚胎干细胞的分离 | 第24页 |
| ·猪滋养层干细胞样细胞分离培养 | 第24-25页 |
| ·猪滋养层干细胞样细胞的分子鉴定 | 第25-27页 |
| ·OCT4-eGFP 示踪模型细胞筛选 | 第27-30页 |
| ·猪耳成纤维细胞系的建立及培养 | 第27页 |
| ·猪成纤维细胞筛选压力曲线 | 第27页 |
| ·TALEN 工作效率检测 | 第27-28页 |
| ·细胞转染及筛选 | 第28页 |
| ·24 孔板细胞的 DNA 提取 | 第28-29页 |
| ·克隆点的分子鉴定 | 第29-30页 |
| ·阳性细胞的保存与复苏 | 第30页 |
| ·数据统计分析方法 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-39页 |
| ·猪胚胎干细胞分离培养 | 第31-36页 |
| ·饲养层细胞 | 第31页 |
| ·猪早期体外胚胎发育情况的研究结果 | 第31-32页 |
| ·体外囊胚贴壁率的提高 | 第32-33页 |
| ·不同培养液分离猪胚胎干细胞的结果 | 第33-34页 |
| ·猪滋养层干细胞样细胞分离培养 | 第34-36页 |
| ·OCT4-eGFP 示踪体系细胞筛选 | 第36-39页 |
| ·猪耳成纤维细胞系建立 | 第36页 |
| ·猪耳成纤维细胞系对新霉素的压力曲线 | 第36-37页 |
| ·TALEN 工作效率检测 | 第37页 |
| ·OCT4-eGFP 示踪模型细胞的转染、筛选和鉴定 | 第37-39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| ·囊胚质量对 ESC 建系的影响 | 第39页 |
| ·全胚培养法对 ESC 建系的影响 | 第39页 |
| ·建立真正的猪 ESC 细胞系 | 第39-40页 |
| ·OCT4-eGFP 示踪体系 | 第40-41页 |
| 5 结论 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-49页 |
| 附录 | 第49-52页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第52页 |