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猪PRRSV HH08株单克隆抗体制备及抗原捕捉ELISA方法建立

摘要第1-18页
Abstract第18-21页
1 前言第21-50页
   ·PRRSV 病原学第21-32页
     ·PRRSV 基因组结构第23-24页
     ·PRRSV 非结构蛋白第24-26页
     ·PRRSV 结构蛋白第26-32页
   ·PRRS 流行病学第32-33页
   ·PRRS 致病机理第33-34页
   ·PRRS 临床症状和病理变化第34-37页
     ·临床症状第34-35页
     ·病理变化第35-37页
   ·PRRS 诊断技术第37-43页
     ·临床诊断第37-38页
     ·组织病理学检查第38页
     ·病毒分离第38-39页
     ·分子生物学诊断方法第39-41页
     ·血清学诊断方法第41-43页
   ·PRRSV 单克隆抗体研究进展第43-48页
     ·单克隆抗体概述第43-44页
     ·抗 PRRSV 单克隆抗体研究进展第44-48页
   ·研究目的和意义第48-50页
2 材料与方法第50-81页
   ·实验材料第50-57页
     ·实验动物及细胞第50页
     ·病毒第50-51页
     ·培养基和主要试剂第51页
     ·主要试剂配制第51-57页
     ·仪器设备第57页
   ·实验方法第57-81页
     ·抗原制备第57-58页
     ·BALB/c 小鼠免疫程序第58-59页
     ·间接 ELISA 方法建立第59-60页
     ·杂交瘤细胞株建立与筛选第60-64页
     ·单克隆抗体制备第64-67页
     ·单克隆抗体生物学特性鉴定第67-72页
     ·兔抗 PRRSV 多克隆抗体制备与纯化第72-73页
     ·抗原捕捉 ELISA(AC-ELISA)优化第73-77页
     ·抗原捕捉 ELISA 方法灵敏性试验第77-78页
     ·抗原捕捉 ELISA 方法特异性试验第78页
     ·抗原捕捉 ELISA 方法重复性试验第78-79页
     ·抗原捕捉 ELISA 方法与 RT-PCR 方法检测临床样品第79页
     ·数据统计第79-81页
3 结果第81-99页
   ·抗原制备第81页
     ·病毒增殖及 TCID50测定第81页
     ·病毒浓缩纯化第81页
   ·单克隆抗体制备第81-83页
     ·间接 ELISA 方法建立第81页
     ·杂交瘤细胞株建立与筛选第81-82页
     ·腹水制备与纯化第82-83页
   ·单克隆抗体生物学特性鉴定第83-90页
     ·单克隆抗体效价与浓度测定第83-84页
     ·单克隆抗体 Western blot 鉴定第84页
     ·单克隆抗体杂交瘤细胞稳定性第84-86页
     ·杂交瘤细胞染色体计数第86页
     ·单克隆抗体 Ig 亚类鉴定第86-88页
     ·单克隆抗体特异性分析第88页
     ·免疫荧光试验第88-90页
   ·PRRSV 抗原捕捉 ELISA(AC-ELISA)方法建立与应用第90-99页
     ·兔抗 PRRSV 多克隆抗体制备与纯化第90页
     ·抗原捕捉 ELISA 优化第90-95页
     ·抗原捕捉 ELISA 方法灵敏性试验第95-96页
     ·抗原捕捉 ELISA 方法特异性试验第96-97页
     ·抗原捕捉 ELISA 方法重复性试验第97-98页
     ·抗原捕捉 ELISA 方法与 RT-PCR 方法检测临床样品第98-99页
4 讨论第99-109页
   ·病毒浓缩纯化第99-100页
   ·杂交瘤细胞株建立及筛选第100-102页
   ·腹水制备及纯化第102-104页
   ·单克隆抗体生物学特性鉴定第104-105页
   ·抗原捕捉 ELISA 检测方法建立第105-109页
5 结论第109-110页
致谢第110-112页
参考文献第112-128页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第128页

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