| 目录 | 第1-8页 |
| 缩略词表 | 第8-10页 |
| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-27页 |
| 1 新城疫(ND) | 第13页 |
| 2 NDV的生物学特性 | 第13-16页 |
| ·NDV的分类、形态和结构特征 | 第13-15页 |
| ·NDV的理化特性 | 第15页 |
| ·NDV的培养特性 | 第15页 |
| ·NDV的致病性 | 第15-16页 |
| 3 NDV的基因组 | 第16-17页 |
| 4 NDV基因组编码的蛋白及其结构及功能 | 第17-24页 |
| ·NP、P和L蛋白 | 第17-18页 |
| ·基质蛋白(M) | 第18-19页 |
| ·V蛋白和W蛋白 | 第19页 |
| ·NDV囊膜糖蛋白结构及其功能 | 第19-24页 |
| 5 ND的流行病学 | 第24-25页 |
| 6 研究目的与意义 | 第25-27页 |
| 引言 | 第27-29页 |
| 第二章 鸡NDV xx08株HN基因主要抗原区(tHN)基因片段的克隆 | 第29-41页 |
| 1 试验材料与方法 | 第29-36页 |
| ·菌株、载体及工具酶 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29页 |
| ·主要仪器设备 | 第29-30页 |
| ·主要试剂配制 | 第30-31页 |
| ·引物设计 | 第31页 |
| ·NDV xx08株tHN基因片段的扩增 | 第31-32页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第32页 |
| ·NDV xx08株tHN基因片段PCR产物的回收 | 第32-33页 |
| ·NDV xx08株tHN基因片段与pMD18-T-simple克隆载体连接 | 第33页 |
| ·NDV xx08株tHN基因片段连接产物的转化 | 第33-34页 |
| ·pMD-tHN重组克隆质粒的小量提取 | 第34-35页 |
| ·pMD-tHN重组克隆质粒鉴定 | 第35-36页 |
| ·NDVxx08株tHN基因片段的回收与纯化 | 第36页 |
| ·NDVxx08株tHN基因片段的序列分析 | 第36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-38页 |
| ·NDV xx08株tHN基因片段的克隆结果 | 第36页 |
| ·NDV xx08株tHN基因片段PCR扩增产物的回收结果 | 第36-37页 |
| ·NDV xx08株tHN基因片段克隆质粒的构建及鉴定结果 | 第37页 |
| ·NDV xx08株tHN基因片段回收鉴定 | 第37-38页 |
| ·NDV xx08株tHN基因片段的序列分析结果 | 第38页 |
| 3 讨论 | 第38-41页 |
| 第三章 鸡NDV xx08株tHN基因片段的表达及鉴定 | 第41-63页 |
| 1 试验材料与方法 | 第41-49页 |
| ·菌株、载体及工具酶 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41-42页 |
| ·主要仪器设备 | 第42页 |
| ·主要试剂配制 | 第42-44页 |
| ·NDV xx08株tHN基因片段重组表达质粒的构建 | 第44-45页 |
| ·NDV xx08株tHN基因片段的序列分析 | 第45页 |
| ·pET32-tHN重组表达质粒在E.coli BL21(DE3)中诱导表达 | 第45-46页 |
| ·pET32-tHN重组表达质粒表达产物的SDS-PAGE分析 | 第46-47页 |
| ·tHN重组蛋白诱导表达条件的优化 | 第47页 |
| ·tHN重组蛋白诱导表达产物的可溶性分析 | 第47-48页 |
| ·tHN重组蛋白的切胶回收纯化 | 第48页 |
| ·tHN重组蛋白的Western-blot鉴定 | 第48-49页 |
| ·纯化tHN重组蛋白浓度测量 | 第49页 |
| 2 NDV xx08株tHN重组蛋白鼠源多克隆抗体的制备及鉴定 | 第49-51页 |
| ·tHN重组蛋白鼠源多抗的制备 | 第49页 |
| ·tHN重组蛋白鼠源多抗的鉴定 | 第49-51页 |
| 3 结果与分析 | 第51-57页 |
| ·pET32-tHN重组表达质粒的构建 | 第51-52页 |
| ·pET32-tHN重组表达质粒的序列测定与分析 | 第52页 |
| ·pET32-tHN重组表达质粒表达产物SDS-PAGE分析结果 | 第52页 |
| ·tHN重组蛋白最佳诱导表达条件优化结果 | 第52-54页 |
| ·tHN重组蛋白可溶性分析结果 | 第54-55页 |
| ·tHN重组蛋白的切胶回收纯化结果 | 第55-56页 |
| ·tHN重组蛋白的Western-blot鉴定结果 | 第56-57页 |
| ·纯化tHN重组蛋白浓度测量结果 | 第57页 |
| 4 NDV xx08株tHN重组蛋白鼠源多克隆抗体的制备及鉴定 | 第57-59页 |
| ·tHN重组蛋白鼠源多抗制备 | 第57页 |
| ·tHN重组蛋白鼠源多抗鉴定 | 第57-59页 |
| 5 讨论 | 第59-63页 |
| ·tHN重组蛋白表达及鉴定 | 第59-60页 |
| ·HN蛋白的B细胞抗原表位 | 第60-61页 |
| ·影响HN蛋白抗原表位的因素 | 第61页 |
| ·表位多肽与多肽疫苗 | 第61-63页 |
| 全文结论 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-75页 |
| 附录 | 第75-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
