| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-23页 |
| ·香蕉的概述 | 第10-13页 |
| ·香蕉产业地位 | 第10页 |
| ·香蕉的生物学特性 | 第10-11页 |
| ·香蕉生长对环境的要求 | 第11-12页 |
| ·香蕉生产中遇到的逆境 | 第12-13页 |
| ·植物对逆境的应答反应 | 第13-19页 |
| ·植物干旱胁迫研究 | 第13-16页 |
| ·植物盐胁迫研究 | 第16-17页 |
| ·植物涝害胁迫研究 | 第17-19页 |
| ·植物冷害胁迫研究 | 第19页 |
| ·乙二醛酶的研究进展 | 第19-21页 |
| ·乙二醛酶途径 | 第19-20页 |
| ·乙二醛酶与环境胁迫 | 第20-21页 |
| ·酿酒酵母在基因功能研究中的应用 | 第21-22页 |
| ·酿酒酵母的特点 | 第21页 |
| ·酿酒酵母在基因功能鉴定中应用 | 第21-22页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| ·技术路线 | 第23页 |
| 2 材料、试剂和仪器 | 第23-25页 |
| ·材料 | 第23-24页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·菌株和载体 | 第24页 |
| ·试剂 | 第24-25页 |
| ·培养基 | 第24页 |
| ·酶与试剂盒 | 第24-25页 |
| ·仪器 | 第25页 |
| 3 方法 | 第25-51页 |
| ·E.coli DH5α感受态细胞的制备、转化及质粒的提取 | 第25-27页 |
| ·E.coli DH5α感受态细胞的制备 | 第25页 |
| ·连接产物转化E.coli DH5α | 第25-26页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第26-27页 |
| ·香蕉幼苗非生物胁迫处理基因表达分析 | 第27-30页 |
| ·干旱胁迫处理 | 第27页 |
| ·NaCl胁迫处理 | 第27-28页 |
| ·快速降温胁迫处理 | 第28页 |
| ·涝害胁迫处理 | 第28-29页 |
| ·伤害胁迫处理 | 第29页 |
| ·乙烯胁迫处理 | 第29页 |
| ·香蕉幼苗总RNA提取 | 第29-30页 |
| ·半定量RT-PCR | 第30-32页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第30-31页 |
| ·RT-PCR引物设计 | 第31页 |
| ·RT-PCR的反应程序 | 第31页 |
| ·RT-PCR的反应体系 | 第31-32页 |
| ·植物和酵母表达载体的构建 | 第32-37页 |
| ·植物表达载体构建 | 第32-33页 |
| ·酵母表达载体的构建 | 第33-34页 |
| ·引物设计 | 第34页 |
| ·目的片段的扩增 | 第34-35页 |
| ·目的片段的回收 | 第35-36页 |
| ·目的片段酶切 | 第36页 |
| ·目的片段的再次回收 | 第36页 |
| ·pCAMBIA1304和PYES2载体的获得 | 第36-37页 |
| ·目的片段和pCAMBIA1304和PYES2载体的连接 | 第37页 |
| ·感受态的制备、转化,重组质粒的筛选鉴定及测序 | 第37页 |
| ·根癌农杆菌感受态的制备和转化 | 第37-38页 |
| ·根癌农杆菌感受态制备 | 第37-38页 |
| ·植物表达载体质粒pCAMBIA1304-Maglo14转化农杆菌感受态和鉴定 | 第38页 |
| ·农杆菌介导烟草的遗传转化 | 第38-39页 |
| ·烟草组培培养基 | 第38页 |
| ·无菌苗的准备 | 第38页 |
| ·侵染农杆菌液的准备 | 第38-39页 |
| ·烟草叶盘法转化 | 第39页 |
| ·转基因烟草的分子检测 | 第39-44页 |
| ·烟草基因组DNA的提取 | 第39-40页 |
| ·PCR鉴定阳性植株 | 第40-41页 |
| ·转基因烟草的Southern Blot检测 | 第41-44页 |
| ·转基因烟草盐胁迫处理 | 第44-45页 |
| ·植物材料 | 第44页 |
| ·实验方法 | 第44-45页 |
| ·酵母转基因 | 第45-51页 |
| ·酵母感受态的制备和转化 | 第45-46页 |
| ·酵母转化子的鉴定 | 第46-49页 |
| ·转基因酵母的胁迫处理 | 第49-50页 |
| ·转基因酵母对重金属Al的胁迫分析 | 第50-51页 |
| 4 结果 | 第51-68页 |
| ·半定量RT-PCR分析香蕉幼苗非生物胁迫处理的Maglo14表达 | 第51-53页 |
| ·成功构建了植物表达载体和酵母表达载体 | 第53-54页 |
| ·烟草遗传转化 | 第54-56页 |
| ·烟草抗性芽筛选和生根潮霉素浓度的确定 | 第54-55页 |
| ·烟草遗传转化流程 | 第55-56页 |
| ·转基因烟草的分子鉴定 | 第56-58页 |
| ·烟草DNA提取 | 第56页 |
| ·转基因烟草PCR鉴定 | 第56页 |
| ·转基因烟草的southern blot鉴定 | 第56-58页 |
| ·转基因烟草的盐胁迫处理分析 | 第58-59页 |
| ·pYES2和pYES2-MaGLO14质粒转化酿酒酵母菌株INVSC1及转化子鉴定 | 第59-62页 |
| ·pYES2和pYES2-MaGLO14质粒转化酿酒酵母菌株INVSC1 | 第59-60页 |
| ·酿酒酵母转化子的鉴定 | 第60-62页 |
| ·转基因酵母的抗非生物胁迫分析 | 第62-66页 |
| ·转基因酵母耐盐性分析 | 第62-64页 |
| ·转基因酵母对干旱胁迫的分析 | 第64页 |
| ·转基因酵母对高温胁迫的抗性分析 | 第64-65页 |
| ·转基因酵母对冷冻胁迫的忍耐 | 第65-66页 |
| ·转基因酵母对紫外辐射的反应 | 第66页 |
| ·转基因酵母Al胁迫下分析 | 第66-68页 |
| ·转基因酵母Al胁迫下的菌落生长观察 | 第66-67页 |
| ·转基因酵母在Al胁迫下的FDA-PI染色观察 | 第67-68页 |
| 5. 讨论 | 第68-71页 |
| ·MaGLO14在非生物胁迫下的表达分析 | 第68-69页 |
| ·MaGLO14在NaCl胁迫下的基因表达及转基因烟草耐盐性分析 | 第68-69页 |
| ·MaGLO14在干旱、低温、机械伤、乙烯利等胁迫下表达分析 | 第69页 |
| ·转基因酵母抗非生物胁迫分析 | 第69-70页 |
| ·转基因酵母盐胁迫分析 | 第69-70页 |
| ·转基因酵母在干旱、低温胁迫分析 | 第70页 |
| ·转基因酵母抗重金属Al的研究 | 第70-71页 |
| 6. 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-78页 |
| 缩写词(Abbreviation) | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
