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MaMATE1基因功能的初步研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-11页
1 前言第11-26页
   ·香蕉概述第11页
     ·香蕉的生理学特性和分类第11页
     ·香蕉的经济价值第11页
   ·香蕉果实采后成熟基因分离及研究进展第11-13页
     ·香蕉果实采后乙烯生物合成相关基因ACO、ACS的克隆及相关研究进展第11-12页
     ·香蕉其他重要的成熟相关基因第12-13页
   ·香蕉生长发育特点和对环境要求及其抗逆机制的研究现状第13-18页
     ·影响香蕉生长因素第13-17页
     ·植物抗逆机制第17-18页
   ·MATE基因家族研究进展第18-25页
     ·多药物转出蛋白研究进展第18-19页
     ·MATE基因家族的由来第19页
     ·MATE基因家族分类第19-20页
     ·MATE基因的生物功能第20-25页
   ·本研究目的意义第25-26页
   ·技术路线图第26页
2 材料、试剂、仪器第26-28页
   ·植物材料第26-27页
   ·菌种与载体第27页
   ·分子生物学试剂盒第27页
   ·生化制剂化学药品第27页
   ·培养基第27页
   ·主要仪器第27-28页
3 方法第28-47页
   ·香蕉果实采后处理第28页
   ·香蕉果实采后乙烯释放量的测定第28-29页
   ·香蕉苗实验前处理第29-30页
     ·土栽苗第29页
     ·水培苗第29-30页
   ·香蕉苗逆境胁迫处理第30-32页
     ·香蕉苗干旱胁迫第30页
     ·香蕉苗冷害胁迫第30页
     ·香蕉苗淹水胁迫第30-31页
     ·香蕉苗紫外辐射胁迫第31页
     ·香蕉苗伤害胁迫第31页
     ·香蕉苗盐渍胁迫第31页
     ·香蕉苗乙烯利处理第31-32页
   ·香蕉苗相关离子处理第32-33页
     ·香蕉苗铝(Al~(3+))胁迫第32页
     ·香蕉苗锰(Mn~(2+))胁迫第32页
     ·香蕉苗缺钾(K~+)胁迫第32页
     ·香蕉苗缺磷(P~(3+))胁迫第32-33页
   ·香蕉苗药物处理第33页
     ·香蕉苗高浓度丙环唑处理第33页
     ·香蕉苗高浓度苯醚甲环唑处理第33页
   ·香蕉不同器官、果实不同时期及香蕉苗不同处理的总RNA提取第33-34页
   ·半定量RT-PCR和荧光定量RT-PCR分析第34-36页
     ·cDNA第一链的合成第34页
     ·荧光定量RT-PCR引物设计第34-35页
     ·半定量RT-PCR第35-36页
     ·荧光定量RT-PCR分析第36页
   ·香蕉MAMATE1基因的亚细胞定位第36-41页
     ·香蕉MaMATE1基因瞬时表达载体的构建及鉴定第36-39页
     ·基因枪轰击洋葱表皮观察GFP瞬时表达第39-41页
   ·PYES2-MAMATE1酵母重组质粒的构建及转化第41-44页
     ·pYES2-MaMATE1酵母重组质粒的构建第41-42页
     ·pYES2-MaMATE1重组质粒酵母转化第42-44页
   ·香蕉MAMATE1基因在酿酒酵母中的表达及其外界胁迫的特征第44-46页
     ·酿酒酵母INVSc1的抗逆性条件筛选第44-45页
     ·酿酒酵母INVSc1重金属胁迫条件筛选第45-46页
   ·香蕉MATE1基因在酿酒酵母中的表达及其外界胁迫相应第46-47页
     ·NaCl胁迫、NaHCO_3胁迫反应、干旱胁迫反应、高温胁迫反应和冷胁迫反应第46页
     ·紫外线辐射胁迫第46页
     ·重金属胁迫第46页
     ·转基因酵母细胞在药物作用下的菌落生长情况观察第46-47页
4. 结果第47-78页
   ·MAMATE1测序结果的生物信息学分析第47-53页
     ·NCBI的比对结果第47-48页
     ·ORF预测结果第48-49页
     ·功能结构域预测第49-50页
     ·蛋白功能预测第50页
     ·跨膜结构预测第50-51页
     ·亚细胞定位第51页
     ·系统进化树的构建第51-53页
   ·香蕉MAMATE1基因的亚细胞定位第53-54页
     ·瞬时表达载体的构建第53页
     ·MaMATE1-GFP融合蛋白的亚细胞定位第53-54页
   ·MAMATE1基因与香蕉采后成熟之间关系第54-56页
   ·MAMATE1基因在香蕉不同器官的差异表达第56-57页
   ·MAMATE1基因在香蕉苗胁迫下的差异表达第57-67页
     ·MaMATE1基因在香蕉苗干旱胁迫下的差异表达第57-58页
     ·MaMATE1基因在香蕉苗NaCl胁迫下的差异表达第58-59页
     ·MaMATE1基因在香蕉苗冷害胁迫下的差异表达第59页
     ·MaMATE1基因在香蕉苗淹水胁迫下的差异表达第59-60页
     ·MaMATE1基因在香蕉苗伤害胁迫下的差异表达第60-61页
     ·MaMATE1基因在香蕉苗缺钾(K~+)胁迫下的差异表达第61页
     ·MaMATE1基因在香蕉苗缺磷(P~(3+))胁迫下的差异表达第61-62页
     ·MaMATE1基因在香蕉苗铝(Al~(3+))胁迫下的差异表达第62-63页
     ·MaMATE1基因在香蕉苗锰(Mn~(2+))胁迫下的差异表达第63-64页
     ·MaMATE1基因在香蕉叶片在不同发育时期和香蕉苗乙烯利处理衰老的差异表达第64-65页
     ·MaMATE1基因在香蕉苗UV-B处理下的差异表达第65-66页
     ·MaMATE1基因在香蕉苗高浓度丙环唑处理下的差异表达第66页
     ·MaMATE1基因在香蕉苗高浓度辛硫酸处理下的差异表达第66-67页
   ·酿酒酵母INVSc1胁迫条件筛选第67-72页
     ·酿酒酵母INVSc1在UV-B胁迫的时间梯度筛选第67-68页
     ·酿酒酵母INVSc1在高温胁迫梯度筛选第68页
     ·酿酒酵母INVSc1在干旱胁迫梯度筛选第68-69页
     ·酿酒酵母INVSc1在低温胁迫梯度筛选第69页
     ·酿酒酵母INVSc1在NaCL胁迫梯度筛选第69-70页
     ·酿酒酵母INVSc1在NaHCO_3胁迫梯度筛选第70页
     ·酿酒酵母INVSc1在Al~(3+)胁迫梯度筛选第70-71页
     ·酿酒酵母INVSc1在Al~(3+)作用后的FDA-PI染色观察第71页
     ·酿酒酵母INVSc1在Mn~(2+)胁迫梯度筛选第71-72页
     ·酿酒酵母INVSc1在Mn~(2+)作用后的FDA-PI染色观察第72页
   ·MAMATE1基因在酿酒酵母中的表达及其外界胁迫相应第72-78页
     ·转MaMATE1基因酵母的耐UV-B辐射性分析第72-73页
     ·转MaMATE1基因酵母的耐高温性分析第73页
     ·转MaMATE1基因酵母的耐干旱性分析第73-74页
     ·转MaMATE1基因酵母的耐低温性分析第74-75页
     ·转MaMATE1基因酵母的耐盐性分析第75页
     ·转MaMATE1基因酵母的耐盐碱性分析第75-76页
     ·转MaMATE1基因酵母的耐Al~(3+)性分析第76页
     ·转基因酵母细胞在Al~(3+)作用后的FDA-PI染色观察第76-77页
     ·转MaMATE1基因酵母的耐Mn~(2+)性分析第77页
     ·转基因酵母细胞在Mn~(2+)作用后的FDA-PI染色观察第77-78页
     ·转基因酵母细胞在药物作用下的菌落生长情况观察第78页
5 讨论第78-84页
   ·MAMATE1序列分析第78-79页
   ·MAMATE1基因在香蕉不同器官的差异表达分析第79页
   ·MAMATE1基因与香蕉采后成熟关系第79-80页
     ·MAMATE1的亚细胞定位第80页
   ·MAMATE1基因和植物衰老关系第80-81页
     ·MAMATE1基因与香蕉逆境胁迫的关系第81-82页
     ·MaMATE1基因与NaCl逆境胁迫关系第81页
     ·MaMATE1基因与UV-B辐射逆境胁迫关系第81页
     ·MaMATE1基因与冷害胁迫关系第81-82页
     ·MaMATE1基因与干旱和伤害胁迫关系第82页
     ·MAMATE1基因与香蕉营养缺乏胁迫(缺钾、缺磷)的关系第82-83页
   ·MAMATE1基因与重金属胁迫的关系第83页
     ·MAMATE1基因与药物侵染胁迫的关系第83-84页
6. 结论第84-85页
参考文献第85-91页
致谢第91页

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