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犬细小病毒LAMP检测方法建立及其串联表位卵黄抗体中和效力评价

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 引言第11-25页
   ·犬细小病毒感染第11-17页
     ·犬细小病毒感染概述第11-13页
     ·犬细小病毒的研究进展第13-14页
     ·犬细小病毒的检测方法第14-16页
     ·犬细小病毒感染的防治第16-17页
   ·环介导等温扩增(LAMP)第17-19页
     ·LAMP原理第17-18页
     ·LAMP特点第18页
     ·LAMP的应用第18-19页
   ·抗原表位第19-20页
     ·犬细小病毒抗原表位第19页
     ·抗原表位疫苗研究进展第19-20页
   ·卵黄抗体第20-24页
     ·卵黄抗体的形成第20页
     ·卵黄抗体的结构第20-21页
     ·卵黄抗体的特点第21-22页
     ·IgY的提取第22-23页
     ·卵黄抗体的应用第23-24页
   ·研究的目的和意义第24-25页
2 材料和方法第25-36页
   ·实验材料第25-26页
     ·细菌菌株、质粒载体、病毒株第25页
     ·病毒分离样品、实验动物及细胞系第25页
     ·主要试剂第25-26页
     ·主要仪器第26页
   ·实验方法第26-36页
     ·CPV分离鉴定第26-28页
     ·CPV VP2基因克隆及序列分析第28-29页
     ·CPV VP2基因LAMP检测方法的建立第29-30页
     ·串联表位卵黄抗体中和效力评价第30-36页
3 结果第36-59页
   ·CPV分离鉴定第36-38页
     ·细胞病变第36-37页
     ·血凝试验(HA)第37页
     ·PCR鉴定第37页
     ·间接免疫荧光鉴定第37-38页
     ·胶体金试纸条检测第38页
   ·CPV VP2基因克隆及序列分析第38-44页
     ·CPV VP2基因扩增第38-39页
     ·CPV VP2重组质粒的鉴定第39-40页
     ·VP2基因核苷酸、氨基酸序列分析及抗原表位差异性分析第40-44页
   ·CPV VP2基因LAMP检测方法的建立第44-48页
     ·LAMP扩增产物的检测第44页
     ·LAMP最佳反应温度第44-45页
     ·LAMP最佳反应时间第45-46页
     ·LAMP特异性试验第46页
     ·LAMP敏感性试验第46-47页
     ·临床样本检测第47-48页
   ·串联表位及卵黄抗体中和效力评价第48-59页
     ·合成质粒的鉴定第48-49页
     ·串联表位的鉴定第49页
     ·4VP2-3L-6His-TAA重组表达质粒的鉴定第49-51页
     ·串联表位蛋白的诱导表达第51-53页
     ·串联表位蛋白的纯化及鉴定第53-54页
     ·卵黄抗体效价检测第54-56页
     ·卵黄抗体中和效力评价第56-59页
4 讨论第59-63页
   ·犬细小病毒的分离鉴定第59页
   ·LAMP技术第59-60页
   ·犬细小病毒VP2抗原表位串联第60-61页
   ·卵黄抗体中和试验第61-63页
5 结论第63-64页
致谢第64-65页
参考文献第65-69页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第69页

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