| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-18页 |
| ·PED的概述 | 第11-13页 |
| ·基因组结构 | 第11页 |
| ·结构蛋白及其功能 | 第11-12页 |
| ·分子流行病学 | 第12-13页 |
| ·诊断与防制 | 第13页 |
| ·PEDV抗原表位研究进展 | 第13页 |
| ·抗原表位研究方法 | 第13-15页 |
| ·B细胞抗原表位研究方法 | 第14页 |
| ·T细胞抗原表位研究方法 | 第14-15页 |
| ·噬菌体表面展示技术的应用 | 第15-17页 |
| ·蛋白相互之间作用的研究 | 第15页 |
| ·特异性酶类和抑制剂的筛选 | 第15-16页 |
| ·诊断与疫苗的开发 | 第16页 |
| ·抗原决定簇与模拟表位的筛选 | 第16-17页 |
| ·受体的筛选 | 第17页 |
| ·研究目的和意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-30页 |
| ·材料 | 第18-22页 |
| ·菌株 | 第18页 |
| ·实验动物和细胞 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18-19页 |
| ·主要溶液的配制 | 第19-21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-30页 |
| ·重组蛋白的表达与纯化 | 第22-23页 |
| ·动物的免疫 | 第23页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第23-25页 |
| ·单克隆抗体及杂交瘤细胞的特性鉴定 | 第25-27页 |
| ·单抗(3F8、1D8)的提纯 | 第27页 |
| ·利用噬菌体展示技术筛选单克隆抗体3F8识别的模拟表位 | 第27-30页 |
| 3 结果 | 第30-44页 |
| ·重组蛋白制备与纯化 | 第30-31页 |
| ·重组菌的诱导表达与SDS-PAGE分析 | 第30页 |
| ·重组蛋白的SDS-PAGE分析 | 第30-31页 |
| ·纯化的重组蛋白浓度的测定 | 第31页 |
| ·细胞融合与筛选 | 第31-33页 |
| ·间接ELISA法测定3免后小鼠血清抗体效价 | 第31-32页 |
| ·最佳抗原及抗体工作浓度的确定 | 第32页 |
| ·细胞融合率的计算 | 第32页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的筛选和建立 | 第32-33页 |
| ·杂交瘤细胞分泌抗体稳定性的鉴定 | 第33页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第33-37页 |
| ·杂交瘤细胞培养上清液效价的测定 | 第33-35页 |
| ·腹水单抗效价测定 | 第35-36页 |
| ·抗体亚类鉴定结果 | 第36页 |
| ·IFA鉴定 | 第36-37页 |
| ·Western blot鉴定 | 第37页 |
| ·单抗的纯化 | 第37-39页 |
| ·辛酸-硫酸铵法提纯腹水 | 第37页 |
| ·纯化前后腹水抗体效价的测定 | 第37-39页 |
| ·利用噬菌体展示技术筛选单克隆抗体3F8识别模拟表位 | 第39-44页 |
| ·噬菌体随机12肽库的筛选及富集 | 第39-40页 |
| ·噬菌体结合克隆的ELISA初步鉴定结果 | 第40页 |
| ·噬菌体结合克隆的核苷酸序列测定结果 | 第40-42页 |
| ·PEDV N蛋白抗原竞争抑制试验 | 第42-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第52页 |