摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
缩略语表 | 第9-10页 |
1 前言 | 第10-27页 |
·香菇的生物学特性 | 第10-11页 |
·食用菌遗传转化的研究 | 第11-19页 |
·食用菌遗传转化的研究方法 | 第11-17页 |
·食用菌遗传转化的常用启动子 | 第17-18页 |
·食用菌遗传转化的常用筛选标记 | 第18-19页 |
·农杆菌介导的食用菌遗传转化研究 | 第19-21页 |
·影响农杆菌介导食用菌遗传转化的因素 | 第21-23页 |
·农杆菌菌株 | 第21页 |
·受体材料 | 第21页 |
·启动子和选择标记 | 第21-22页 |
·Vir区基因活化的诱导物 | 第22-23页 |
·共培养条件 | 第23页 |
·农杆菌介导转化法在食用菌中的应用 | 第23-26页 |
·RNA干扰 | 第24-25页 |
·插入突变 | 第25页 |
·生长发育过程中基因的表达 | 第25-26页 |
·本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
2 材料与方法 | 第27-36页 |
·材料 | 第27-28页 |
·香菇菌株 | 第27页 |
·细菌菌株 | 第27页 |
·质粒 | 第27页 |
·试剂 | 第27-28页 |
·方法 | 第28-36页 |
·重组质粒pCAMBIA1301-gpd的构建 | 第28-33页 |
·香菇菌丝对潮霉素的敏感性试验 | 第33页 |
·抗生素对农杆菌的抗性试验 | 第33页 |
·抗生素对香菇菌丝的抗性试验 | 第33页 |
·农杆菌介导的香菇菌丝的转化 | 第33-34页 |
·香菇转化子的PCR鉴定 | 第34-35页 |
·转化子在无性繁殖阶段的遗传稳定性分析 | 第35页 |
·转化子菌丝的生长速度分析 | 第35页 |
·潮霉素筛选效率的统计 | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-47页 |
·香菇gpd启动子片段的序列分析 | 第36-37页 |
·重组质粒pCAMBIA1301-gpd的检测 | 第37-39页 |
·香菇菌丝对潮霉素的敏感性试验 | 第39-41页 |
·抗生素对农杆菌的抗性试验 | 第41页 |
·抗生素对香菇菌丝的抗性试验 | 第41-42页 |
·农杆菌介导的香菇菌丝的转化 | 第42-43页 |
·转化子的PCR鉴定 | 第43页 |
·转化子在无性繁殖阶段的遗传稳定性分析 | 第43页 |
·转化子菌丝的生长速度分析 | 第43-44页 |
·潮霉素筛选效率的评价 | 第44-47页 |
·不同农杆菌侵染时间对筛选效率的影响 | 第45-46页 |
·最适共培养温度的筛选 | 第46页 |
·共培养时间对筛选效率的影响 | 第46页 |
·乙酰丁香酮对香菇菌丝转化的影响 | 第46-47页 |
4 讨论 | 第47-50页 |
·启动子对潮霉素筛选效率的影响 | 第47页 |
·转化方法和材料的选择 | 第47页 |
·共培养条件的优化 | 第47-48页 |
·筛选过程中抑制农杆菌的生长对香菇菌丝转化效率的影响 | 第48页 |
·潮霉素对香菇菌丝筛选的影响 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-60页 |
致谢 | 第60-62页 |
附录 | 第62-66页 |
附录一 常用试剂的配制 | 第62-64页 |
附录二 培养基的配制 | 第64-65页 |
附录三 试验方法 | 第65-66页 |