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农杆菌介导的香菇遗传转化体系构建

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
缩略语表第9-10页
1 前言第10-27页
   ·香菇的生物学特性第10-11页
   ·食用菌遗传转化的研究第11-19页
     ·食用菌遗传转化的研究方法第11-17页
     ·食用菌遗传转化的常用启动子第17-18页
     ·食用菌遗传转化的常用筛选标记第18-19页
   ·农杆菌介导的食用菌遗传转化研究第19-21页
   ·影响农杆菌介导食用菌遗传转化的因素第21-23页
     ·农杆菌菌株第21页
     ·受体材料第21页
     ·启动子和选择标记第21-22页
     ·Vir区基因活化的诱导物第22-23页
     ·共培养条件第23页
   ·农杆菌介导转化法在食用菌中的应用第23-26页
     ·RNA干扰第24-25页
     ·插入突变第25页
     ·生长发育过程中基因的表达第25-26页
   ·本研究的目的和意义第26-27页
2 材料与方法第27-36页
   ·材料第27-28页
     ·香菇菌株第27页
     ·细菌菌株第27页
     ·质粒第27页
     ·试剂第27-28页
   ·方法第28-36页
     ·重组质粒pCAMBIA1301-gpd的构建第28-33页
     ·香菇菌丝对潮霉素的敏感性试验第33页
     ·抗生素对农杆菌的抗性试验第33页
     ·抗生素对香菇菌丝的抗性试验第33页
     ·农杆菌介导的香菇菌丝的转化第33-34页
     ·香菇转化子的PCR鉴定第34-35页
     ·转化子在无性繁殖阶段的遗传稳定性分析第35页
     ·转化子菌丝的生长速度分析第35页
     ·潮霉素筛选效率的统计第35-36页
3 结果与分析第36-47页
   ·香菇gpd启动子片段的序列分析第36-37页
   ·重组质粒pCAMBIA1301-gpd的检测第37-39页
   ·香菇菌丝对潮霉素的敏感性试验第39-41页
   ·抗生素对农杆菌的抗性试验第41页
   ·抗生素对香菇菌丝的抗性试验第41-42页
   ·农杆菌介导的香菇菌丝的转化第42-43页
   ·转化子的PCR鉴定第43页
   ·转化子在无性繁殖阶段的遗传稳定性分析第43页
   ·转化子菌丝的生长速度分析第43-44页
   ·潮霉素筛选效率的评价第44-47页
     ·不同农杆菌侵染时间对筛选效率的影响第45-46页
     ·最适共培养温度的筛选第46页
     ·共培养时间对筛选效率的影响第46页
     ·乙酰丁香酮对香菇菌丝转化的影响第46-47页
4 讨论第47-50页
   ·启动子对潮霉素筛选效率的影响第47页
   ·转化方法和材料的选择第47页
   ·共培养条件的优化第47-48页
   ·筛选过程中抑制农杆菌的生长对香菇菌丝转化效率的影响第48页
   ·潮霉素对香菇菌丝筛选的影响第48-50页
参考文献第50-60页
致谢第60-62页
附录第62-66页
 附录一 常用试剂的配制第62-64页
 附录二 培养基的配制第64-65页
 附录三 试验方法第65-66页

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