| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-23页 |
| ·中国牛种遗传资源概况 | 第14-15页 |
| ·动物转基因技术 | 第15-16页 |
| ·AdEasyTM 系统 | 第16-17页 |
| ·siRNA 研究进展 | 第17-19页 |
| ·siRNA 作用机制 | 第17页 |
| ·siRNA 在研究基因功能上的应用 | 第17-18页 |
| ·siRNA 序列的设计原则 | 第18-19页 |
| ·shRNA 序列的设计原则 | 第19页 |
| ·NRIP1 基因的研究进展 | 第19-22页 |
| ·NRIP1 基因概况 | 第19-21页 |
| ·NRIP1 基因遗传变异研究进展 | 第21页 |
| ·NRIP1 基因的功能 | 第21-22页 |
| ·研究的目的及意义 | 第22-23页 |
| 第二章 牛 NRIP1 基因多态性检测及其遗传效应研究 | 第23-33页 |
| ·试验材料与方法 | 第23-27页 |
| ·试验材料 | 第23-24页 |
| ·试验方法 | 第24-27页 |
| ·结果与分析 | 第27-31页 |
| ·牛基因组 DNA 的检测 | 第27页 |
| ·c.605A>G 位点的 Forced-PCR-RFLP 分析及测序验证 | 第27-28页 |
| ·c.1301T>C 位点的 Forced-PCR-RFLP 分析及测序验证 | 第28-29页 |
| ·牛 NRIP1 基因多态位点的群体遗传结构分析 | 第29-30页 |
| ·牛 NRIP1 基因多态位点与生长性状的关联分析 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| ·关于牛 NRIP1 基因 SNPs 位点的分析 | 第31页 |
| ·关于 NRIP1 基因多态位点的群体遗传学分析 | 第31-32页 |
| ·关于牛 NRIP1 基因的遗传效应分析 | 第32页 |
| ·小结 | 第32-33页 |
| 第三章 牛 NRIP1 基因腺病毒超表达载体的构建 | 第33-43页 |
| ·试验材料 | 第33页 |
| ·主要生化试剂和试剂盒 | 第33页 |
| ·仪器 | 第33页 |
| ·pAd-NRIP1 重组腺病毒质粒的构建 | 第33-37页 |
| ·牛 NRIP1 基因 PCR 引物的设计 | 第33-34页 |
| ·牛 NRIP1 基因的 PCR 扩增 | 第34页 |
| ·pGM-T-NRIP1 重组质粒的构建 | 第34-35页 |
| ·pAd-TrackCMV-NRIP1 重组质粒的构建 | 第35页 |
| ·pAd-NRIP1 重组腺病毒质粒的构建 | 第35-36页 |
| ·腺病毒的包装 | 第36-37页 |
| ·腺病毒的扩增 | 第37页 |
| ·重组腺病毒的鉴定 | 第37页 |
| ·重组腺病毒的滴度测定 | 第37页 |
| ·结果与分析 | 第37-41页 |
| ·NRIP1 基因 PCR 扩增结果 | 第37-38页 |
| ·pGM-T-NRIP1 重组质粒的酶切鉴定结果 | 第38-39页 |
| ·pAdTrack-CMV-NRIP1 重组质粒酶切鉴定结果和 PmeⅠ线性化结果 | 第39-40页 |
| ·pAd-NRIP1 质粒的构建结果 | 第40页 |
| ·pAd-NRIP1 重组质粒包装效果 | 第40-41页 |
| ·重组腺病毒的滴度测定 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第四章 牛 NRIP1 基因 siRNA 序列的筛选 | 第43-53页 |
| ·材料与方法 | 第43页 |
| ·试验材料 | 第43页 |
| ·主要仪器设备 | 第43页 |
| ·牛 NRIP1 基因的 siRNA 干扰序列的筛选 | 第43-48页 |
| ·牛 NRIP1 基因 siRNA 序列的设计 | 第43-44页 |
| ·pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA 载体的构建 | 第44-46页 |
| ·pDsRed-Express-N1-NRIP1 表达载体的构建 | 第46-48页 |
| ·有效 shRNA 序列的筛选 | 第48页 |
| ·结果与分析 | 第48-51页 |
| ·pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA 载体的构建结果 | 第48-49页 |
| ·pDsRed-Express-N1-RED-NRIP1 载体的构建结果 | 第49-50页 |
| ·有效 shRNA 序列的筛选结果 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| ·关于 siRNA 的设计 | 第51页 |
| ·pDsRed-Express-N1-NRIP1 表达载体的构建 | 第51-52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 结论与创新点 | 第53-54页 |
| 结论 | 第53页 |
| 创新点 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 附录 | 第60-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 作者简介 | 第70页 |
