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山羊ΔFosB基因对几个钙、脂代谢相关基因的mRNA表达调控研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-13页
第一章 文献综述第13-27页
   ·ΔFosB 基因的研究进展第13-17页
     ·AP-1 家族简介第13-15页
     ·ΔFosB 基因的结构第15-16页
     ·ΔFosB 基因在药物成瘾中的研究现状第16页
     ·ΔFosB 基因在细胞增殖中的作用第16-17页
     ·ΔFosB 基因在钙转运、脂代谢中的研究现状第17页
   ·钙转运和脂滴形成的分子机制研究进展第17-22页
     ·乳腺上皮细胞中参与钙转运的分子第18-20页
     ·脂滴形成的分子过程第20-22页
   ·病毒载体表达系统的研究进展第22-26页
     ·病毒载体分类第22-24页
     ·AdEasy 重组腺病毒超表达载体系统简介第24-25页
     ·Block-iT shRNA 重组腺病毒干扰系统简介第25-26页
   ·本研究的目的和意义第26-27页
第二章 山羊ΔFosB 基因重组腺病毒的制备与效率检测第27-47页
   ·材料和方法第27-38页
     ·主要仪器设备第27页
     ·实验材料第27-28页
     ·溶液的配制第28页
     ·HEK-293 细胞的培养第28-29页
     ·腺病毒的包装与扩增第29-31页
     ·腺病毒的PCR 鉴定第31-32页
     ·乳腺上皮细胞的原代培养第32页
     ·最佳MOI 的测定第32页
     ·ΔFosB 超表达效率检测第32-38页
   ·结果与分析第38-43页
     ·腺病毒的包装与扩增第38-39页
     ·病毒液的PCR 检测第39页
     ·山羊原代乳腺上皮细胞的培养第39-40页
     ·腺病毒滴度及最佳MOI 的测定第40-41页
     ·Ad-HA-ΔFosB 超表达效率的实时荧光定量PCR 检测第41-43页
     ·Ad-HA-ΔFosB 超表达效率的Western Blot 检测第43页
   ·讨论第43-46页
     ·腺病毒的滴度测定第43-44页
     ·实时定量PCR 引物设计第44-45页
     ·鉴定病毒的方法第45页
     ·病毒的包装与扩增第45-46页
   ·小结第46-47页
第三章 ΔFosB 基因对钙代谢相关基因的mRNA 表达调控研究第47-54页
   ·材料与方法第47-48页
     ·实验材料第47页
     ·实验仪器第47页
     ·腺病毒感染山羊原代乳腺上皮细胞第47-48页
     ·ΔFosB 基因表达效率的检测第48页
     ·实时定量引物设计第48页
     ·ΔFosB 对钙代谢相关基因的影响第48页
   ·结果与分析第48-53页
     ·ΔFosB 表达的Western Blot 检测第48-49页
     ·细胞中总RNA 的提取以及实时荧光定量PCR 引物检测第49-50页
     ·实时荧光定量PCR 检测钙代谢相关基因的mRNA 表达量第50-53页
   ·讨论第53页
   ·小结第53-54页
第四章 ΔFosB 基因对脂代谢相关基因的mRNA 表达调控研究第54-58页
   ·材料与方法第54-55页
     ·实验材料第54页
     ·主要仪器第54页
     ·实验方法第54-55页
   ·结果与分析第55-57页
     ·实时定量引物检测第55-56页
     ·PPARγ、FAS 与SCD 基因的实时定量PCR 检测第56-57页
   ·讨论第57页
     ·ΔFosB 对PPARγ基因的影响第57页
     ·ΔFosB 对SCD 和FAS 基因的影响第57页
   ·小结第57-58页
结论第58-59页
参考文献第59-64页
缩略词第64-65页
致谢第65-66页
作者简介第66页

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