| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-23页 |
| ·纤维素酶的研究进展 | 第10-14页 |
| ·纤维素酶的结构与功能 | 第10-11页 |
| ·纤维素酶的应用 | 第11-13页 |
| ·纤维素酶基因工程研究进展 | 第13-14页 |
| ·乳酸杆菌研究进展 | 第14-19页 |
| ·乳酸杆菌简介 | 第14-15页 |
| ·乳酸杆菌基因工程菌的研究进展 | 第15-18页 |
| ·乳酸杆菌的应用 | 第18-19页 |
| ·DNA 同源重组与Cre-loxp 系统 | 第19-22页 |
| ·同源重组简介 | 第20页 |
| ·Cre/Loxp 系统 | 第20-22页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第22-23页 |
| 第二章 乳酸杆菌整合载体的构建 | 第23-35页 |
| ·材料与方法 | 第23-27页 |
| ·材料 | 第23-24页 |
| ·方法 | 第24-27页 |
| ·结果与分析 | 第27-33页 |
| ·载体pG-HAF 的构建 | 第27-29页 |
| ·质粒pG-HAF-HAR 的构建 | 第29-30页 |
| ·纤维素酶基因表达盒C15 cassette 的构建 | 第30-32页 |
| ·质粒pG-HAF-HAR-C15cassette 的构建 | 第32页 |
| ·质粒pG-HAF-HAR-C15cassette-loxp Cm 的构建 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-34页 |
| ·整合载体构建 | 第33-34页 |
| ·同源序列的克隆 | 第34页 |
| ·启动子的筛选 | 第34页 |
| ·小结 | 第34-35页 |
| 第三章 乳酸杆菌电转化效率的优化 | 第35-40页 |
| ·材料与方法 | 第35-37页 |
| ·菌种和质粒 | 第35页 |
| ·引物设计 | 第35页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第35-36页 |
| ·主要试剂配制 | 第36页 |
| ·质粒DNA 的准备 | 第36页 |
| ·转化效率的计算 | 第36页 |
| ·乳酸杆菌电转化 | 第36页 |
| ·转化效率的质量鉴定 | 第36-37页 |
| ·数据分析 | 第37页 |
| ·结果与分析 | 第37-38页 |
| ·LiAc 和DTT 不同处理时间对罗伊乳杆菌转化效率的影响 | 第37页 |
| ·不同菌体浓度的转化效率 | 第37-38页 |
| ·质粒稳定性鉴定 | 第38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| ·小结 | 第39-40页 |
| 第四章 载体整合以及纤维素酶基因的表达 | 第40-48页 |
| ·材料与方法 | 第40-42页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·方法 | 第41-42页 |
| ·结果与分析 | 第42-46页 |
| ·纤维素酶基因表达盒在乳酸杆菌基因组的整合 | 第42-43页 |
| ·抗性基因Cm~r 的删除 | 第43-44页 |
| ·整合乳酸杆菌菌株L-S2 纤维素酶活性分析 | 第44-46页 |
| ·讨论 | 第46页 |
| ·无抗性整合乳酸杆菌的检测 | 第46页 |
| ·表达产物的检测 | 第46页 |
| ·小结 | 第46-48页 |
| 第五章 结论 | 第48-49页 |
| ·研究结论 | 第48页 |
| ·本研究创新点 | 第48页 |
| ·还需深入研究的内容 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 附录 | 第55-59页 |
| 缩略词 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
