| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| 1 希金斯刺盘孢的研究进展 | 第11-13页 |
| ·希金斯刺盘孢及十字花科炭疽病 | 第11页 |
| ·希金斯刺盘孢的营养方式及繁殖过程 | 第11-12页 |
| ·希金斯刺盘孢遗传转化的研究进展 | 第12-13页 |
| 2 拟南芥的应用 | 第13-14页 |
| ·模式植物拟南芥的特点 | 第13页 |
| ·拟南芥在植物抗病研究中的进展 | 第13-14页 |
| 3 希金斯刺盘孢与拟南芥互作的研究进展 | 第14-18页 |
| ·半活养型寄生真菌与植物的互作 | 第14页 |
| ·炭疽菌的致病机理 | 第14-16页 |
| ·炭疽菌的侵染过程 | 第14-15页 |
| ·炭疽菌致病的分子机理 | 第15-16页 |
| ·INVERSE-PCR扩增侧翼序列技术 | 第16-18页 |
| ·INVERSE-PCR技术的诞生 | 第16页 |
| ·INVERSE-PCR技术的原理 | 第16页 |
| ·INVERSE-PCR技术的影响因素 | 第16-17页 |
| ·INVERSE-PCR技术的发展 | 第17-18页 |
| 选题的目的与意义 | 第18-19页 |
| 第二章 希金斯刺盘孢T-DNA插入突变体库的筛选 | 第19-31页 |
| 1 材料与方法 | 第19-21页 |
| ·材料 | 第19页 |
| ·试验菌株 | 第19页 |
| ·拟南芥植株及栽培材料 | 第19页 |
| ·其它试剂材料 | 第19页 |
| ·方法 | 第19-21页 |
| ·分生孢子悬浮液的制备 | 第20页 |
| ·拟南芥室内种植 | 第20页 |
| ·野生型菌株接种拟南芥侵染结构观察 | 第20页 |
| ·突变体菌丝生长速度比较 | 第20-21页 |
| ·突变体的初步筛选 | 第21页 |
| ·突变体的重复筛选 | 第21页 |
| ·突变体菌株侵染结构的观察 | 第21页 |
| ·突变体的PCR鉴定 | 第21页 |
| 2 结果与分析 | 第21-29页 |
| ·野生型菌株接种拟南芥侵染结构观察 | 第21-22页 |
| ·突变体的初步筛选 | 第22-23页 |
| ·突变体的重复筛选 | 第23-28页 |
| ·菌丝形态异常突变体 | 第23-24页 |
| ·生长缓慢型突变体 | 第24-25页 |
| ·致病性减弱突变体 | 第25-28页 |
| ·突变体的PCR鉴定 | 第28-29页 |
| 3 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 希金斯刺盘孢相关突变体菌株的基因克隆 | 第31-58页 |
| 1 材料与方法 | 第31-42页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·菌株、载体 | 第31页 |
| ·培养基、试剂和抗生素 | 第31-32页 |
| ·酶类及试剂盒 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-42页 |
| ·Southern杂交验证突变体中T-DNA的插入拷贝数 | 第32-36页 |
| ·Inverse-PCR扩增T-DNA插入位点侧端DNA序列 | 第36-38页 |
| ·目的片段的回收及连接 | 第38页 |
| ·连接产物的转化 | 第38页 |
| ·单克隆检测 | 第38-39页 |
| ·重组质粒的测序及克隆序列分析 | 第39页 |
| ·总RNA提取 | 第39页 |
| ·总RNA的DNASE Ⅰ处理 | 第39页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第39-40页 |
| ·引物设计 | 第40-41页 |
| ·目的基因表达分析 | 第41-42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-54页 |
| ·SOUTHERN杂交验证突变体中T-DNA的插入拷贝数 | 第42-43页 |
| ·反向PCR克隆T-DNA插入位点侧端DNA | 第43-44页 |
| ·PCH-1B30侧翼序列全长及相关生物学信息分析 | 第44-49页 |
| ·PCH-1E240侧翼序列全长及相关生物学信息分析 | 第49-52页 |
| ·PCH-1E409侧翼序列全长及相关生物学信息分析 | 第52-54页 |
| ·菌丝培养不同时间的DUF221及EXOSC1基因表达分析 | 第54页 |
| ·菌丝培养不同时间的SEPTIN基因表达分析 | 第54页 |
| 3 讨论 | 第54-58页 |
| 结论与展望 | 第58-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
