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茄子花青素生物合成关键基因的克隆与表达分析

摘要第1-5页
Abstract第5-8页
缩略词第8-12页
第一章 绪论第12-30页
     ·引言第12页
     ·类黄酮类物质研究进展第12-20页
       ·植物次生代谢概述第12-13页
       ·类黄酮类物质分类第13-14页
       ·类黄酮物质的保健作用第14-15页
       ·类黄酮类物质在植物生理过程中的作用第15-16页
       ·类黄酮类物质的生物合成路径研究第16-20页
     ·花青素的研究进展第20-26页
       ·二氢黄酮醇4-还原酶(DFR)的研究第20-21页
       ·花色素的形成与LDOX 酶的作用第21-22页
       ·花色素的分类第22-23页
       ·花色素的修饰第23-24页
       ·花青素的修饰酶第24-25页
       ·花青素及类黄酮类物质的转运及液泡pH 的影响第25-26页
       ·花青素合成的调控研究第26页
     ·茄子花青素研究综述第26-30页
       ·茄子花青素类型第27-28页
       ·番茄和马铃薯花青素生物合成研究综述第28-29页
       ·茄子花青素生物合成路径研究综述第29-30页
第二章 材料与方法第30-40页
     ·实验材料第30-31页
     ·花青素含量测定第31-32页
     ·基因组DNA 提取第32页
     ·总RNA 的提取与反转录第32-33页
     ·半定量PCR 检测茄子花青素合成路径关键基因的表达情况第33-36页
     ·SmDFR 与Sm5GT 基因的全长序列克隆第36页
     ·全长序列分析及进化树构建第36-37页
     ·DFR 基因的荧光定量PCR 分析第37页
     ·SmDFR 基因的Southern 杂交试验第37-38页
     ·原核表达载体的构建第38页
     ·DFR 融合蛋白的诱导表达及纯化第38-39页
     ·DFR 融合蛋白体外活性检测第39-40页
第三章 结果分析第40-63页
     ·花青素含量测定第40-41页
     ·14 个基因的半定量PCR 结果分析第41页
     ·SmDFR 基因克隆及表达分析第41-55页
       ·SmDFR cDNA 全长克隆第41-48页
       ·SmDFR 的进化分析第48-51页
       ·SmDFR 基因表达分析第51-52页
       ·SmDFR 基因拷贝数分析第52-54页
       ·SmDFR 融合蛋白活性分析第54-55页
     ·Sm5GT 基因克隆及表达分析第55-63页
       ·Sm5GT 基因的全长序列分析第55-59页
       ·Sm5GT 的表达分析第59-60页
       ·Sm5GT 的进化分析第60-63页
第四章 讨论第63-70页
     ·SmDFR 酶与颜色表型的关系第63-64页
     ·DFR 酶调控机理的讨论第64-65页
       ·DFR 酶的双重竞争第64页
       ·转录因子对于DFR 基因的调节作用第64-65页
     ·SmDFR 酶的236 位突变与底物选择性第65-67页
       ·DFR 酶的晶体结构第65-66页
       ·DFR 酶的底物选择性第66页
       ·DFR 酶133 位点与227 位点的作用第66-67页
       ·SmDFR 突变位点与底物选择性的关系第67页
     ·DFR 基因的进化讨论第67-68页
     ·5GT 的功能讨论第68-70页
第五章 结论第70-71页
参考文献第71-83页
附录第83-84页
致谢第84-85页
攻读学位期间发表的学术论文目录第85-87页

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