| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-17页 |
| 前言 | 第17-19页 |
| 第一章 文献综述 | 第19-43页 |
| 1 近岸海域多环芳烃污染状况 | 第20-26页 |
| ·多环芳烃的来源及分布 | 第20-23页 |
| ·环境中 PAHs 的来源 | 第20-21页 |
| ·环境中 PAHs 的分布 | 第21-23页 |
| ·多环芳烃的毒理学特征 | 第23页 |
| ·PAHs 的致癌性 | 第23页 |
| ·PAHs 的光致毒效应 | 第23页 |
| ·PAHs 衍生物的毒理效应 | 第23页 |
| ·海洋环境中 PAHs 污染现状 | 第23-26页 |
| ·海水中 PAHs 污染状况 | 第24-25页 |
| ·海洋沉积物 PAHs 污染状况 | 第25-26页 |
| 2 PAHs 监测技术研究进展 | 第26-34页 |
| ·PAHs 化学监测法 | 第26页 |
| ·PAHs 生物监测法 | 第26-27页 |
| ·生物标志物技术 | 第27-30页 |
| ·生物标志物分类 | 第27-29页 |
| ·生物标志物筛选原则 | 第29-30页 |
| ·分子生物标志物研究进展 | 第30-34页 |
| ·大分子氧化损伤类生物标志物的研究 | 第30-31页 |
| ·其他酶蛋白作为分子标志物的研究 | 第31-32页 |
| ·基因差异表达作为分子生物标志物的研究 | 第32页 |
| ·贝类分子生物标志物研究进展 | 第32-34页 |
| 3 差异表达基因筛选技术及研究进展 | 第34-40页 |
| ·几种差异表达基因筛选方法及特点 | 第34-37页 |
| ·mRNA 差异显示技术(DDRT-PCR) | 第34-35页 |
| ·代表性差异分析技术(RDA) | 第35页 |
| ·基因表达系列分析技术(SAGE) | 第35-36页 |
| ·DNA 微阵列技术(DNA microarray) | 第36页 |
| ·抑制消减杂交技术(SSH) | 第36-37页 |
| ·抑制性消减杂交原理及主要技术流程 | 第37-38页 |
| ·抑制性消减杂交原理 | 第37-38页 |
| ·抑制性消减杂交主要技术流程 | 第38页 |
| ·抑制性消减杂交技术在水产动物研究中的应用 | 第38-40页 |
| ·生殖、发育相关基因的研究 | 第39页 |
| ·免疫相关基因的研究 | 第39-40页 |
| ·逆境胁迫相关基因 | 第40页 |
| 4 论文立题依据、研究内容和意义 | 第40-43页 |
| 第二章 菲律宾蛤仔芳烃受体(AhR)介导的关键基因克隆与表达分析 | 第43-77页 |
| 第一节 菲律宾蛤仔 AhR 介导的关键基因的克隆与序列分析 | 第45-71页 |
| 1 材料方法 | 第45-56页 |
| ·实验材料 | 第45-48页 |
| ·实验动物 | 第45页 |
| ·引物 | 第45页 |
| ·主要试剂 | 第45-48页 |
| ·主要实验仪器 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-55页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第48页 |
| ·去除 RNA 中的基因组 DNA | 第48-49页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第49-50页 |
| ·AhR、ARNT 和 HSP 90 基因的克隆 | 第50-52页 |
| ·AhR 基因全序列扩增 | 第52-54页 |
| ·AhR、ARNT 和 HSP 90 基因序列的生物信息学分析 | 第54页 |
| ·AhR、ARNT 和 HSP 90 实时定量表达分析 | 第54-55页 |
| ·数据处理与分析 | 第55-56页 |
| 2 结果 | 第56-67页 |
| ·菲律宾蛤仔 AhR 克隆与序列分析 | 第56-61页 |
| ·菲律宾蛤仔 ARNT 克隆与序列分析 | 第61-63页 |
| ·菲律宾蛤仔 HSP 90 克隆与序列分析 | 第63-66页 |
| ·菲律宾蛤仔中 AhR、ARNT 和 HSP 90 基因组织特异性分析 | 第66-67页 |
| 3 讨论 | 第67-71页 |
| 第二节 菲律宾蛤仔在苯并(a)芘胁迫下解毒代谢相关基因的表达分析 | 第71-77页 |
| 1 材料方法 | 第71-72页 |
| ·实验材料 | 第71页 |
| ·实验动物 | 第71页 |
| ·引物 | 第71页 |
| ·主要试剂和实验仪器 | 第71页 |
| ·实验方法 | 第71-72页 |
| ·染毒实验 | 第71-72页 |
| ·菲律宾蛤仔解毒代谢基因 mRNA 表达分析 | 第72页 |
| ·数据处理与分析 | 第72页 |
| 2 结果 | 第72-74页 |
| 3 讨论 | 第74-77页 |
| 第三章 菲律宾蛤仔在苯并(a)芘胁迫下 cDNA 消减文库的构建与分析 | 第77-108页 |
| 第一节 菲律宾蛤仔在苯并(a)芘胁迫下 cDNA 消减文库的构建 | 第78-93页 |
| 1 材料方法 | 第78-87页 |
| ·实验材料 | 第78-79页 |
| ·实验动物 | 第78页 |
| ·主要试剂 | 第78页 |
| ·主要实验仪器 | 第78页 |
| ·接头和引物 | 第78-79页 |
| ·实验方法 | 第79-87页 |
| ·染毒实验 | 第79页 |
| ·总 RNA 的提取及去除 RNA 中的基因组 DNA | 第79页 |
| ·Poly A+RNA 的分离纯化与浓缩 | 第79-80页 |
| ·抑制性消减杂交 | 第80-87页 |
| ·cDNA 消减文库构建 | 第87页 |
| 2 结果 | 第87-90页 |
| ·总 RNA 质量鉴定 | 第87-88页 |
| ·双链 cDNA 合成和 Rsa I 酶切效率验证 | 第88页 |
| ·接头连接效率检测 | 第88-89页 |
| ·抑制性 PCR 扩增消减杂交产物的鉴定 | 第89页 |
| ·消减杂交效率验证 | 第89-90页 |
| ·消减 cDNA 文库的构建 | 第90页 |
| 3 讨论 | 第90-93页 |
| 第二节 菲律宾蛤仔在苯并(a)芘胁迫下差异基因表达分析 | 第93-108页 |
| 1 材料方法 | 第93-95页 |
| ·实验材料 | 第93页 |
| ·研究对象 | 第93页 |
| ·主要试剂 | 第93页 |
| ·载体通用引物 | 第93页 |
| ·主要实验仪器 | 第93页 |
| ·实验方法 | 第93-95页 |
| ·文库质量分析 | 第93-94页 |
| ·重组质粒测序 | 第94页 |
| ·序列分析 | 第94-95页 |
| 2 结果 | 第95-105页 |
| ·文库重组率及重组克隆中插入片段大小分析 | 第95页 |
| ·消减 cDNA ESTs 序列统计与分析 | 第95-105页 |
| 3 讨论 | 第105-108页 |
| 第四章 菲律宾蛤仔在苯并(a)芘胁迫下分子生物标志物的筛选与验证 | 第108-128页 |
| 1 材料方法 | 第109-114页 |
| ·实验材料 | 第109-111页 |
| ·实验动物 | 第109页 |
| ·实验试剂 | 第109页 |
| ·引物 | 第109-111页 |
| ·主要实验仪器 | 第111页 |
| ·实验方法 | 第111-114页 |
| ·染毒实验 | 第111-112页 |
| ·总 RNA 的提取及 cDNA 模板的合成 | 第112页 |
| ·实时定量 PCR 及 mRNA 表达分析 | 第112页 |
| ·分子生物标志物技术的现场验证 | 第112-114页 |
| ·数据处理与分析 | 第114页 |
| 2 结果 | 第114-124页 |
| ·BaP 胁迫对菲律宾蛤仔不同功能基因表达的影响 | 第114-121页 |
| ·不同站点表层海水和菲律宾蛤仔组织中 PAHs 含量的测定 | 第121-122页 |
| ·不同站点菲律宾蛤仔的功能基因 mRNA 表达分析 | 第122-124页 |
| 3 讨论 | 第124-128页 |
| 论文结论 | 第128-129页 |
| 参考文献 | 第129-148页 |
| 附件 | 第148-158页 |
| 炔雌醇对淡水贝 Ellipsaria lineolata 生殖发育的影响 | 第148-158页 |
| 1 引言 | 第148-149页 |
| 2 材料方法 | 第149-151页 |
| ·实验动物 | 第149-150页 |
| ·实验方法 | 第150-151页 |
| ·贻贝的性别鉴定 | 第150页 |
| ·染毒实验 | 第150页 |
| ·生殖发育指标的检测 | 第150-151页 |
| ·数据处理与分析 | 第151页 |
| 3 结果与讨论 | 第151-156页 |
| ·蝴蝶贻贝的性别鉴定 | 第151-152页 |
| ·EE2对蝴蝶贻贝排卵、排精的影响 | 第152-156页 |
| 4 结论 | 第156页 |
| 参考文献 | 第156-158页 |
| 致谢 | 第158-160页 |
| 个人简历 | 第160-161页 |
| 论文发表情况 | 第161页 |