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利用特定转录因子诱导猪体细胞重编程为多能干细胞的研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
目录第10-13页
文献综述第13-36页
 第一章 细胞重编程的研究进展第13-20页
   ·体细胞核移植技术的研究第14-17页
   ·细胞融合技术第17-18页
   ·诱导多能干细胞技术第18-20页
 第二章 多能干细胞的研究进展第20-36页
   ·畸胎瘤细胞第21-22页
   ·胚胎干细胞第22-25页
     ·小鼠 ES 细胞第22-23页
     ·人 ES 细胞第23-25页
     ·ES 细胞的应用前景第25页
   ·生殖干细胞第25-26页
   ·诱导多能干细胞第26-34页
     ·诱导多能干细胞的产生和发展第26-27页
     ·iPS 细胞的诱导培养体系第27-33页
     ·诱导多能干细胞技术的应用前景与存在的问题第33-34页
   ·猪诱导多能干细胞的研究第34-36页
     ·猪诱导多能干细胞的研究现状第34-35页
     ·猪诱导多能干细胞的研究意义和面临问题第35-36页
试验研究第36-86页
 前言第36-38页
 第三章 受体细胞的准备和报告载体的构建第38-48页
   ·材料和方法第38-43页
     ·试验材料第38-40页
     ·试验方法第40-43页
   ·结果第43-45页
     ·猪成纤维细胞的分离、培养与冻存第43-44页
     ·猪成纤维细胞生长曲线的测定第44页
     ·GFP 报告载体的构建第44-45页
     ·GFP 病毒的制备和滴度测定第45页
   ·讨论第45-47页
     ·PFF 及 PESF 细胞的分离培养第45-47页
     ·GFP 报告载体的构建与病毒滴度的测定第47页
   ·小结第47-48页
 第四章 猪 IPS 细胞的建系第48-65页
   ·材料和方法第48-53页
     ·试验材料与耗材第48-49页
     ·试验方法第49-53页
   ·结果第53-61页
     ·猪成纤维细胞诱导重编程的条件摸索第53-55页
     ·猪成纤维细胞诱导重编程的分子动力学研究第55-58页
     ·OSK 三因子诱导猪 iPS 细胞的分子动力学测定第58-61页
     ·猪诱导多能干细胞的建系与冻存第61页
   ·讨论第61-64页
     ·猪 iPS 诱导培养条件的论述第61-64页
     ·猪成纤维细胞重编程过程中的分子动力学变化第64页
   ·小结第64-65页
 第五章 猪 IPS 细胞的鉴定第65-78页
   ·材料和方法第65-67页
     ·试验材料与耗材第65页
     ·试验方法第65-67页
   ·结果第67-75页
     ·基因组水平的检测第67-68页
     ·RNA 表达水平的检测第68-70页
     ·蛋白质水平的检测第70-71页
     ·多向分化潜能的检测第71-73页
     ·猪 iPS 细胞在猪早期胚胎中的嵌合第73-75页
     ·猪 iPS 细胞对 LIF 因子的依赖性第75页
   ·讨论第75-77页
     ·猪 iPS 细胞的表面标志基因第75-76页
     ·猪 iPS 细胞的多能性基因第76页
     ·Na ve 和 Prime 状态的多能干细胞第76-77页
   ·小结第77-78页
 第六章 ROCK 抑制剂 Y-27632 对猪 IPS 细胞冻存和传代的影响第78-86页
   ·材料和方法第78-79页
     ·试验材料与耗材第78页
     ·试验方法第78-79页
   ·结果第79-85页
     ·Y-27632 对猪 iPS 细胞冻存活率的影响第79-80页
     ·Y-27632 对猪 iPS 细胞传代效率的影响第80页
     ·Y-27632 对猪 iPS 细胞形态和多能性的影响第80-83页
     ·Y-27632 对猪 iPS 细胞在胚胎中发育效率的影响第83-85页
   ·讨论第85页
   ·小结第85-86页
结论第86-87页
论文创新点及下一步研究方向第87-88页
参考文献第88-103页
附录第103-104页
缩略词第104-105页
致谢第105-106页
作者简介第106页

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