中文摘要 | 第1-13页 |
英文摘要 | 第13-17页 |
符号说明 | 第17-19页 |
第一章 鼠尾草酸逆转P-gp介导的人白血病细胞K562/AO2细胞多药耐药的实验研究 | 第19-57页 |
前言 | 第19-23页 |
材料和方法 | 第23-31页 |
1 材料 | 第23页 |
·细胞株 | 第23页 |
·药品和试剂 | 第23页 |
·仪器 | 第23页 |
2 方法 | 第23-31页 |
·细胞培养 | 第23-24页 |
·台盼蓝染色 | 第24页 |
·甲基四唑蓝(MTT)法增殖抑制实验 | 第24-25页 |
·光镜下细胞形态的改变 | 第25页 |
·流式细胞术检测细胞内ADM浓度 | 第25页 |
·LSCM检测ADM在亚细胞水平的分布变化及其细胞内浓度的变化 | 第25页 |
·流式细胞术检测细胞膜P-gp | 第25-26页 |
·RT-PCR检测基因的改变 | 第26-28页 |
·Western blot检测P-gp在细胞膜上的表达 | 第28-29页 |
·统计学处理 | 第29-31页 |
结果 | 第31-33页 |
1 台盼蓝染色 | 第31页 |
2 MTT检测结果 | 第31页 |
3 光镜下细胞形态的变化 | 第31页 |
4 FCM检测细胞内ADM浓度 | 第31页 |
5 LSCM观测活细胞内ADM亚细胞分布及浓度变化 | 第31-32页 |
6 流式细胞仪检测细胞膜P-gp的表达 | 第32页 |
7 RT-PCR结果 | 第32页 |
8 Western blot检测K562/AO2细胞膜上P-gp表达的变化 | 第32-33页 |
讨论 | 第33-41页 |
1 P-gp与MDR | 第33-36页 |
2 细胞凋亡与MDR | 第36-38页 |
3 激光共聚焦术在分子生物学中的应用 | 第38-41页 |
结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-57页 |
第二章 应用功能分类芯片检测鼠尾草酸对白血病细胞株K562/AO2细胞作用前后多药耐药相关基因表达的差异的研究 | 第57-116页 |
前言 | 第57-66页 |
1 鼠尾草酸 | 第57-58页 |
2 基因芯片技术 | 第58-66页 |
材料和方法 | 第66-78页 |
1 材料 | 第66页 |
·细胞株 | 第66页 |
·药品和试剂 | 第66页 |
·仪器 | 第66页 |
2 细胞培养 | 第66-67页 |
3 实时定量RT-PCR药物代谢基因芯片 | 第67-72页 |
·样品的RNA抽提 | 第67-68页 |
·DNaseⅠ消化RNA样品 | 第68页 |
·RNA纯化 | 第68页 |
·RNA质量检测 | 第68-70页 |
·cDNA合成 | 第70-71页 |
·实时定量PCR | 第71-72页 |
4 Oligo信号转导基因芯片 | 第72-77页 |
·RNA抽提和质量检测同药物代谢基因芯片 | 第72页 |
·cRNA标记与合成 | 第72-75页 |
·芯片杂交 | 第75-76页 |
·化学发光检测 | 第76页 |
·图象采集 | 第76-77页 |
5 数据分析 | 第77-78页 |
结果 | 第78-81页 |
1 实时定量PCR药物代谢基因芯片(APHS-002A) | 第78-79页 |
2 信号转导基因芯片(OHS-044) | 第79-81页 |
讨论 | 第81-98页 |
1 糖酵解途径限速酶 | 第81-86页 |
·己糖激酶(hexokinase Ⅱ,HK-Ⅱ) | 第84-85页 |
·丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK) | 第85-86页 |
2 信号转导途径 | 第86-98页 |
·p300/CBP(CREB binding protein,CBP)和人类腺病毒早期区域1A基因(early region 1A,E1A) | 第86-89页 |
·白介素4受体(IL-4R) | 第89-90页 |
·干扰素调节因子(IRF-1) | 第90-92页 |
·肿瘤蛋白P53可诱导蛋白3(TP53I3) | 第92-93页 |
·NF-κB和NF-κB抑制因子α(NFKBIA) | 第93-96页 |
·v-fos FBJ鼠骨肉瘤病毒致瘤基因同系物(FOS) | 第96-98页 |
结论 | 第98-99页 |
参考文献 | 第99-116页 |
致谢 | 第116-117页 |
博士期间发表论文 | 第117-118页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第118-119页 |
英文论文 | 第119-174页 |