| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 一 文献综述 | 第8-21页 |
| 1． 巴西橡胶树的相关研究 | 第8-15页 |
| 1．1 天然橡胶的生物合成 | 第8-11页 |
| 1．1．1 橡胶树产胶生物学 | 第8-9页 |
| 1．1．2 天然橡胶的生物合成途径 | 第9页 |
| 1．1．3 橡胶粒子的形成 | 第9页 |
| 1．1．4 乙烯与橡胶的生物合成 | 第9-11页 |
| 1．2 橡胶树分子生物学研究概况 | 第11-15页 |
| 1．2．1 从橡胶树中克隆的基因或cDNA | 第11-13页 |
| 1．2．2 橡胶树胶乳中的基因表达 | 第13-14页 |
| 1．2．3 橡胶树基因工程的研究进展 | 第14页 |
| 1．2．4 分子标记在橡胶种质资源中的研究 | 第14-15页 |
| 2 植物的遍在蛋白系统 | 第15-21页 |
| 2．1 Ubiquitin的基本结构与功能 | 第15页 |
| 2．2 Ubiquitin与靶蛋白的缀合机制 | 第15-17页 |
| 2．3 遍在蛋白化（Ubiquitination）的天然底物 | 第17页 |
| 2．4 26 S蛋白酶体 | 第17-18页 |
| 2．5 265蛋白酶体在环境胁迫下的功能 | 第18-19页 |
| 2．6 植物中的遍在蛋白化与胁迫应答 | 第19-21页 |
| 2．6．1 生物胁迫与遍在蛋白化（Ubiquitination） | 第19-20页 |
| 2．6．2 非生物胁迫与遍在蛋白化（Ubiquitination） | 第20-21页 |
| 二 前言 | 第21-22页 |
| 三 材料和方法 | 第22-40页 |
| 1 材料 | 第22页 |
| 1．1 试验材料 | 第22页 |
| 1．2 菌种 | 第22页 |
| 1．3 试剂 | 第22页 |
| 2 方法 | 第22-40页 |
| 2．1 橡胶粒子的分离和橡胶粒子膜混合蛋白的提取 | 第22-23页 |
| 2．2 小橡胶粒子膜混合蛋白的提取 | 第23页 |
| 2．3 大橡胶粒子膜蛋白的提取 | 第23页 |
| 2．4 橡胶粒子膜混合蛋白的SDS-PAGE电泳 | 第23-24页 |
| 2．5 从SDS-PAGE凝胶中分离和纯化43KD的橡胶粒子蛋白 | 第24页 |
| 2．6 43KD橡胶粒子蛋白N端氨基酸测序 | 第24页 |
| 2．7 43KD橡胶粒子蛋白cDNA的克隆及序列分析 | 第24-32页 |
| 2．7．1 橡胶胶乳总RNA的提取 | 第24-25页 |
| 2．7．2 mRNA的纯化 | 第25页 |
| 2．7．3 用于3'RACE的cDNA第一链合成 | 第25-26页 |
| 2．7．4 43KD橡胶粒子膜蛋白cDNA的3'RACE PCR扩增 | 第26页 |
| 2．7．5 PCR扩增产物的克隆及重组子筛选 | 第26-30页 |
| 2．7．6 DNA序列分析 | 第30-31页 |
| 2．7．7 克隆片段的分析 | 第31-32页 |
| 2．8 橡胶树基因组DNA的Southern杂交 | 第32-34页 |
| 2．8．1 橡胶树叶片基因组DNA的提取 | 第32-33页 |
| 2．8．2 基因组DNA的EcoRⅠ，HindⅢ，XbaⅠ消化 | 第33页 |
| 2．8．3 DNA的印迹转移 | 第33-34页 |
| 2．8．4 探针的标记 | 第34页 |
| 2．8．5 Southern杂交 | 第34页 |
| 2．9 Northern杂交 | 第34-35页 |
| 2．9．1 RNA的提取 | 第34-35页 |
| 2．9．2 探针的标记 | 第35页 |
| 2．9．3 RNA的印迹转移 | 第35页 |
| 2．9．4 Northern杂交 | 第35页 |
| 2．10 启动子的分离 | 第35-38页 |
| 2．10．1 构建Genome Walker文库 | 第35-36页 |
| 2．10．2 Genome Walker DNA Walking | 第36-38页 |
| 2．11 橡胶粒子膜蛋白的Western Blot | 第38-40页 |
| 2．11．1 橡胶粒子膜蛋白的分离和纯化 | 第38页 |
| 2．11．2 橡胶粒子膜蛋白的SDS-PAGE电泳 | 第38页 |
| 2．11．3 橡胶粒子膜蛋白从SDS聚丙烯酰胺凝胶转移至硝酸纤维素膜 | 第38页 |
| 2．11．4 Western Blot | 第38-40页 |
| 四 结果与分析 | 第40-49页 |
| 1 43KD橡胶粒子蛋白的N端氨基酸测定 | 第40-41页 |
| 2 43kD橡胶粒子蛋白的cDNA克隆及结构分析 | 第41-44页 |
| 2．1 43kD橡胶粒子蛋白的cDNA 3'-RACE PCR | 第41页 |
| 2．2 43kD橡胶粒子蛋白的cDNA的结构分析 | 第41-44页 |
| 3 橡胶树基因组DNA的Southern杂交 | 第44页 |
| 4 43kD橡胶粒子蛋白RNA的表达分析 | 第44-46页 |
| 4．1 在橡胶树叶片、树皮和胶乳中的表达分析 | 第44页 |
| 4．2 乙烯和茉莉酸处理后的表达分析 | 第44-46页 |
| 5 橡胶粒子蛋白的Western blot分析 | 第46页 |
| 6 橡胶树Polyubiquitin基因启动子的克隆及结构分析 | 第46-49页 |
| 五 讨论 | 第49-53页 |
| 1 橡胶粒子与橡胶的生物合成 | 第49页 |
| 2 43KD的橡胶粒子膜蛋白cDNA的克隆及结构分析 | 第49-50页 |
| 3 43KD的橡胶粒子膜蛋白与Polyubiquitin | 第50-51页 |
| 4 橡胶树Polyubiquitin基因启动子结构分析 | 第51页 |
| 5 橡胶树Polyubiquitin基因的表达分析 | 第51-53页 |
| 六 结论 | 第53-54页 |
| 七 参考文献 | 第54-63页 |
| 八 英文摘要 | 第63-64页 |
| 九 致谢 | 第64页 |
