摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
1 前言 | 第13-28页 |
·核酸酶 | 第13-16页 |
·非特异性核酸酶 | 第13-16页 |
·噬菌体溶原性建立的遗传控制 | 第16-26页 |
·λ噬菌体的溶原与裂解循环 | 第16-17页 |
·λ噬菌体的基因组组成 | 第17-18页 |
·λ噬菌体基因的转录与调控 | 第18-19页 |
·λ噬菌体溶原性建立的遗传控制 | 第19-22页 |
·CⅠ蛋白的性质 | 第22-23页 |
·CⅡ蛋白的功能 | 第23-24页 |
·特异位点重组 | 第24-26页 |
·嗜热细菌噬菌体GBSV1 和GVE2 的基本特征 | 第26-27页 |
·本论文研究目的及意义 | 第27-28页 |
2 材料与方法 | 第28-56页 |
·材料 | 第28-38页 |
·样品 | 第28页 |
·菌株和质粒 | 第28-29页 |
·试剂盒 | 第29页 |
·酶类及其他试剂 | 第29-30页 |
·主要仪器 | 第30-31页 |
·培养基及主要溶液 | 第31-37页 |
·引物合成 | 第37-38页 |
·主要分析软件 | 第38页 |
·基本方法 | 第38-56页 |
·细菌染色体总DNA 的提取 | 第38-39页 |
·PCR 反应系统包括 | 第39页 |
·菌落PCR | 第39页 |
·从琼脂糖凝胶上回收DNA 片段 | 第39-40页 |
·连接反应 | 第40页 |
·化学感受态细胞的制备 | 第40页 |
·化学转化 | 第40-41页 |
·质粒少量制备 | 第41页 |
·核酸内切酶酶切反应 | 第41页 |
·SDS-PAGE 蛋白凝胶电泳、染色、脱色 | 第41-42页 |
·重组质粒的小量表达检测 | 第42页 |
·Glutathione Sepharose 4B 纯化重组蛋白 | 第42-43页 |
·Ni 柱亲和层析纯化可溶蛋白 | 第43页 |
·重组蛋白多克隆抗体的制备 | 第43-44页 |
·抗血清的纯化 | 第44页 |
·酶联免疫分析(ELISA) | 第44-45页 |
·Western 杂交 | 第45-46页 |
·细菌总RNA 的提取 | 第46页 |
·Northern blot | 第46-48页 |
·非特异性核酸酶GBSV1-NSN 酶学性质的测定 | 第48-50页 |
·嗜热细菌噬菌体的分子生物学研究 | 第50-51页 |
·ChIP(染色质免疫沉淀分析) | 第51-54页 |
·EMSA(electrophoretic mobility shift assay,凝胶迁移滞留试验) | 第54页 |
·Column Format Affinity Purification Using Immobilized Streptavidin | 第54-56页 |
3 结果与分析 | 第56-86页 |
·非特异性核酸酶GBSV1-NSN 基因的克隆及其性质的研究 | 第56-65页 |
·非特异性核酸酶GBSV1-NSN 基因的克隆与序列分析 | 第56-58页 |
·非特异性核酸酶GBSV1-NSN 的重组表达和纯化 | 第58-59页 |
·非特异性核酸酶GBSV1-NSN 的功能验证 | 第59-60页 |
·非特异性核酸酶GBSV1-NSN 的酶学性质 | 第60-65页 |
·深海嗜热细菌噬菌体GVE2 溶原相关蛋白的性质研究 | 第65-86页 |
·噬菌体溶原维持蛋白CⅠ的结构分析 | 第65-67页 |
·cⅠ基因的性质研究 | 第67-76页 |
·cⅠ基因在嗜热细菌噬菌体GVE2 宿主体内的转录分析 | 第76-77页 |
·CⅠ蛋白二聚体结构的体外及体内分析 | 第77-79页 |
·CⅠ蛋白的肽酶性质 | 第79-81页 |
·深海嗜热细菌噬菌体GVE2 的特异位点重组酶VP462 的性质研究 | 第81-86页 |
4 讨论 | 第86-89页 |
·GBSV1-NSN 核酸酶的性质研究 | 第86-87页 |
·深海嗜热细菌噬菌体GVE2 溶原性质研究 | 第87-89页 |
5 小结与展望 | 第89-90页 |
·小结 | 第89页 |
·展望 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-105页 |
附录 | 第105-106页 |
致谢 | 第106页 |