| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 绪论 | 第8-17页 |
| ·细胞色素P450酶系与细胞色素P450 | 第8-11页 |
| ·细胞色素P450酶系 | 第8页 |
| ·细胞色素P450 | 第8-9页 |
| ·P450基因的命名法则 | 第9-10页 |
| ·P450的多样性 | 第10-11页 |
| ·P450的可诱导性 | 第11页 |
| ·昆虫P450酶系的重要功能 | 第11-14页 |
| ·保幼激素及其类似物的代谢 | 第12页 |
| ·脂肪酸的代谢 | 第12页 |
| ·信息素的代谢 | 第12页 |
| ·蜕皮甾醇的代谢 | 第12-13页 |
| ·P450与昆虫抗药性 | 第13-14页 |
| ·昆虫P450的研究方法 | 第14-15页 |
| ·本研究的立题依据与主要研究内容 | 第15-17页 |
| ·立题依据 | 第15-16页 |
| ·主要研究内容 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-26页 |
| ·材料 | 第17-19页 |
| ·供试青杨脊虎天牛 | 第17页 |
| ·菌种与载体 | 第17页 |
| ·试剂与仪器 | 第17页 |
| ·常用试剂的配置 | 第17-19页 |
| ·实验方法 | 第19-26页 |
| ·总RNA的提取与检测 | 第19-20页 |
| ·引物的设计 | 第20页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第20-21页 |
| ·PCR的扩增 | 第21页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第21页 |
| ·质粒的连接 | 第21页 |
| ·感受态细胞的制备与质粒的转化 | 第21-22页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第22页 |
| ·质粒DNA的小量抽提 | 第22-23页 |
| ·连接质粒的酶切鉴定与PCR鉴定 | 第23页 |
| ·序列的测定和分析 | 第23页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第23-24页 |
| ·序列的测定 | 第24页 |
| ·重组质粒的表达 | 第24-25页 |
| ·表达产物的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测 | 第25页 |
| ·氰戊菊酯诱导处理 | 第25页 |
| ·微粒体酶液的制备 | 第25页 |
| ·细胞色素P450含量的测定 | 第25-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-34页 |
| ·青杨脊虎天牛CYP450基因的克隆与分析 | 第26-30页 |
| ·总RNA的提取与检测 | 第26页 |
| ·CYP450基因的扩增和克隆 | 第26页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第26-27页 |
| ·序列的测定和分析 | 第27-30页 |
| ·青杨脊虎天牛CYP4G2基因的原核表达载体的构建 | 第30-32页 |
| ·pET-CYP4G2的构建及鉴定 | 第30-31页 |
| ·序列的测定 | 第31页 |
| ·诱导表达及SDS-PAGE分析 | 第31-32页 |
| ·氰戊菊酯对青杨脊虎天牛成虫的诱导作用 | 第32-34页 |
| 结论与讨论 | 第34-37页 |
| 参考文献 | 第37-42页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |