中文摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
符号及缩略语说明 | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-22页 |
1 植物抵御非生物胁迫的内源性保护物质及其作用机制 | 第12-14页 |
·脯氨酸 | 第12-13页 |
·甜菜碱 | 第13页 |
·晚期胚胎发生丰富蛋白 | 第13-14页 |
·糖类物质 | 第14页 |
2 参与植物环境胁迫响应的转录因子 | 第14-18页 |
·bZIP 转录因子 | 第15-17页 |
·bZIP 转录因子的结构特征 | 第15页 |
·植物bZIP 蛋白与DNA 结合特性 | 第15-16页 |
·植物bZIP 蛋白的功能和应用 | 第16-17页 |
·AP2/EREBP 转录因子 | 第17页 |
·WRKY 转录因子 | 第17页 |
·MYB 转录因子 | 第17-18页 |
·其他转录因子 | 第18页 |
3 逆境条件下ABA 依赖及ABA 非依赖基因的表达调控 | 第18-20页 |
·ABA 依赖基因的表达 | 第18-20页 |
·ABA 非依赖基因的表达 | 第20页 |
4 本研究的目的与意义 | 第20-22页 |
第二章 转录因子OsAREB1 的序列及表达特征 | 第22-31页 |
1 材料与方法 | 第22-24页 |
·材料 | 第22页 |
·植物材料 | 第22页 |
·化学试剂和酶制剂 | 第22页 |
·方法 | 第22-24页 |
·DNA 序列和数据分析 | 第22-23页 |
·植物材料处理 | 第23页 |
·水稻植株总RNA 的获得 | 第23-24页 |
·RT-PCR 分析 | 第24页 |
2 结果与分析 | 第24-29页 |
·OsAREB1 的序列分析和比对 | 第24-27页 |
·OsAREB1 在水稻植株中的表达 | 第27-28页 |
·OsAREB1 在水稻中的诱导表达 | 第28-29页 |
·OsAREB1 激素诱导表达 | 第28页 |
·OsAREB1 非生物胁迫诱导表达 | 第28-29页 |
3 讨论 | 第29-31页 |
第三章OsAREB1 与顺式元件ABRE 的体内结合 | 第31-40页 |
1 材料与方法 | 第31-34页 |
·材料 | 第31-32页 |
·细菌菌株与质粒 | 第31-32页 |
·化学试剂和酶制剂 | 第32页 |
·试验相关溶液的配制 | 第32页 |
·方法 | 第32-34页 |
·制备大肠杆菌E.coli DH5α感受态 | 第32页 |
·pPCBP-OsAREB1 表达载体的构建 | 第32-33页 |
·pPCBP-OsAREB1 质粒转化酵母 | 第33页 |
·X-gal 显色反应 | 第33页 |
·Lac Z 测活 | 第33-34页 |
2 结果与分析 | 第34-38页 |
·鱼饵质粒的构建 | 第34-35页 |
·pPCBP-OsAREB1 酵母表达载体的构建 | 第35-36页 |
·酵母单杂结合实验 | 第36-38页 |
3 讨论 | 第38-40页 |
第四章 OsAREB1 在转基因拟南芥中的功能分析 | 第40-54页 |
1 材料与方法 | 第40-45页 |
·材料 | 第40-41页 |
·植物材料 | 第40页 |
·细菌菌株和质粒 | 第40页 |
·化学试剂和酶制剂 | 第40页 |
·相关培养基和溶液的配制 | 第40页 |
·测序 | 第40-41页 |
·方法 | 第41-45页 |
·含双CAMV 35S 启动子的双元载体YG8186 的构建 | 第41页 |
·电击法转化农杆菌 | 第41页 |
·拟南芥转化 | 第41-42页 |
·拟南芥的培养 | 第41页 |
·农杆菌的准备 | 第41-42页 |
·拟南芥蘸花法转化 | 第42页 |
·拟南芥种子的筛选 | 第42页 |
·GUS 组织化学染色分析 | 第42页 |
·转基因阳性植株的PCR 检测 | 第42-43页 |
·拟南芥总DNA 的提取 | 第42页 |
·PCR 检测 | 第42-43页 |
·拟南芥转基因植株的功能分析 | 第43-45页 |
·ABA 敏感测试 | 第43页 |
·耐干旱测试 | 第43-44页 |
·幼苗滤纸干旱 | 第43-44页 |
·含水量和失水率的测定 | 第44页 |
·耐热测试 | 第44页 |
·抗逆相关基因及ABA 合成关键酶基因的RT-PCR 检测 | 第44-45页 |
2 结果与分析 | 第45-51页 |
·农杆菌转化双元载体的构建 | 第45-46页 |
·OsAREB1 基因的拟南芥转化及转基因纯系植株的鉴定 | 第46页 |
·ABA 敏感测试 | 第46-48页 |
·耐干旱实验 | 第48-50页 |
·耐热实验 | 第50-51页 |
3 讨论 | 第51-54页 |
参考文献 | 第54-63页 |
附录 | 第63-67页 |
致谢 | 第67-68页 |