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水稻黄单胞菌效应物转运系统的检测与新的效应物的鉴定

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
第一章 前言第9-22页
   ·水稻黄单胞菌水稻致病变种概况第9页
     ·水稻黄单胞菌水稻致病变种特征及分类第9页
   ·植物与病原菌的相互作用第9-11页
     ·植物病源菌的有关致病因子第9-10页
     ·胞外多糖(EPS)第10页
     ·脂多糖(LPS)第10页
     ·毒素(toxin)第10页
     ·胞外酶第10-11页
   ·植物的抗病机理第11-12页
     ·植物抗病分子机理第11页
     ·基因对基因学说第11-12页
   ·病源细菌致病的分子机理第12-13页
     ·病源菌的分泌系统第12页
     ·植物病源菌hrp基因及其调控第12-13页
   ·T3SS效应物概述第13-18页
     ·T3SS效应物的功能第13页
     ·病源菌的无毒基因第13-16页
     ·植物的诱导启动子盒(PIP-BOX)第16-17页
     ·植物病源细菌依赖于T3SS的效应物的筛选鉴定第17-18页
   ·Xoo基因组研究近况第18-21页
     ·Xoo基因组概况第18-21页
   ·本研究的目的和意义第21-22页
     ·研究目的第21页
     ·研究意义第21-22页
第二章 材料与方法第22-35页
   ·材料第22-23页
     ·菌株和质粒第22-23页
     ·供试植株第23页
     ·培养基第23-24页
     ·大肠杆菌LB培养基第23-24页
     ·水稻黄单胞菌培养基OB第24页
   ·培养条件及菌种保存第24-26页
     ·培养条件第24-25页
     ·菌种的保存第25页
     ·抗生素及其使用浓度第25页
     ·常用溶液及缓冲液的配制第25-26页
   ·质粒DNA的提取第26-28页
     ·质粒DNA的少量提取第26-27页
     ·质粒DNA的大量提取第27-28页
   ·DNA的沉淀第28页
   ·DNA中蛋白质及RNA的去除第28页
   ·DNA的酶切,电泳及DNA片断浓度与大小的计算第28-29页
     ·DNA的酶切第28页
     ·电泳及DNA片断浓度大小的计算第28-29页
   ·DNA片断的回收第29-30页
     ·低熔点琼脂糖凝胶法回收DNA第29页
     ·电透析法回收DNA第29-30页
   ·DNA的连接第30-31页
   ·DNA片断的转化第31-32页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第31页
     ·化学法转化DNA第31页
     ·电脉冲法转化DNA第31-32页
   ·三亲本结合第32页
   ·聚合酶链式反应(PCR)第32-33页
     ·PCR扩增反应体系的组成与扩增条件第33页
   ·植物的致病性试验第33-34页
     ·水稻的剪叶接种法第33-34页
   ·HR检测第34-35页
第三章 结果与分析第35-51页
   ·Xoo中效应物检测系统的鉴定第35-36页
     ·Xcc AvrBs1检测系统在Xoo中的工作情况第35-36页
   ·PIP-BOX寻找可能的效应物第36-37页
     ·Xoo中含有PIP-BOX的基因情况第36-37页
   ·候选效应物检侧的技术路线第37-43页
     ·Xoo1832重组质粒的构建第37-39页
     ·Xoo1842重组质粒的构建第39-40页
     ·Xoo2905重组质粒的构建第40-41页
     ·Xoo4134重组质粒的构建第41-42页
     ·Xoo4365重组质粒的构建第42-43页
   ·重组质粒的三亲本结合第43页
   ·结合子在辣椒ECW-10R上HR检测第43-44页
   ·Xoo序列分析第44-46页
   ·Xoo4134整合突变体的构建第46-51页
     ·Xoo4134基因内部基因的PCR扩增第46页
     ·构建同源自杀质粒第46-47页
     ·重组质粒的三亲本结合第47-48页
     ·突变体在寄主上的致病性检测第48-50页
     ·突变体在非寄主上的HR检测第50-51页
第四章 讨论第51-54页
   ·关于AvrBs1全长基因在Xoo中的识别第51页
   ·关于Xcv XopN基因在Xoo中的识别第51页
   ·关于PIP-BOX在Xoo中筛选效应物的准确性第51-52页
   ·关于Xoo中效应物的鉴定第52页
   ·关于AvrBs1报告系统第52页
   ·关于Xoo4134在致病过程中的作用第52-54页
参考文献第54-61页
致谢第61页

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