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五指山猪KIT基因拷贝数检测暨猪PSME1基因与免疫性状关系的研究

中文摘要第1-8页
Abstract第8-10页
第一章 应用定量PCR技术检测五指山猪KIT基因拷贝数第10-38页
 1 文献综述第10-23页
   ·猪毛色形成的生物学基础第11页
   ·猪主要毛色第11-12页
   ·控制猪毛色的遗传位点第12-15页
   ·控制毛色的基因第15-20页
     ·MC1R基因第15-17页
     ·ASIP基因第17-18页
     ·KIT基因第18-20页
     ·不同毛色的猪在A、E、I位点的基因型第20页
   ·常用检测基因拷贝数的方法第20-22页
     ·荧光原位杂交技术第20页
     ·Southern Blot技术第20-21页
     ·实时荧光定量PCR第21-22页
   ·本研究的目的和意义第22-23页
 2 材料与方法第23-28页
   ·材料第23-24页
     ·样品DNA来源第23页
     ·主要试剂第23页
     ·主要仪器第23页
     ·试剂的配制第23-24页
   ·方法第24-28页
     ·基因组DNA的提取、质量测定及浓度定量第24页
     ·单拷贝内参基因的选择探针的设计第24-25页
     ·普通PCR扩增KIT和PSME3片段第25页
     ·PCR产物的纯化回收、重组质粒的制备第25-26页
     ·标准品的制备,标准曲线的绘制第26-27页
     ·real-time PCR反应体系和反应条件第27页
     ·重复性和稳定性的测定第27页
     ·KIT基因拷贝数的计算第27-28页
 3 结果第28-35页
   ·猪基因组DNA提取的结果第28页
   ·探针所需模板扩增结果第28页
   ·重组质粒测序结果第28-29页
   ·荧光域值的设定第29页
   ·标准曲线的绘制第29-30页
   ·重复性和稳定性验证结果第30页
   ·KIT基因拷贝数的计算第30-34页
   ·两次real-time PCR检测结果分析第34-35页
 4 小结与讨论第35-38页
   ·本章主要研究结果第35页
     ·内参基因的确定及探针的设计第35页
     ·检测了猪染色体上KIT基因的拷贝数第35页
   ·讨论第35-37页
     ·模板DNA质量对定量检测结果的影响第35页
     ·TaqMan探针及其对定量检测结果的影响第35-36页
     ·有关五指山猪毛色与KIT基因第36页
     ·有关绝对real-time PCR检测基因拷贝数第36-37页
   ·本研究的提出的问题与不足第37-38页
第二章 猪PSME1基因SNP筛查及其与免疫性状的关联分析第38-58页
 1 文献综述第38-47页
   ·猪抗病遗传研究的一般策略第39页
   ·分离、定位抗病基因的方法第39-41页
   ·猪疾病与抗病力、免疫性状相关的候选基因研究现状第41-44页
     ·与猪疾病、抗病力相关的候选基因第41-43页
     ·猪免疫性状与抗病力相关QTL的研究现状第43-44页
   ·PSME1基因研究进展第44-46页
   ·DHPLC检测多态性原理第46页
   ·本研究的目的和意义第46-47页
 2 材料与方法第47-51页
   ·材料第47-49页
     ·DNA样品第47页
     ·主要仪器第47页
     ·主要试剂和酶第47页
     ·溶液的配制第47-48页
     ·引物的设计与合成第48-49页
     ·分析工具软件及网址第49页
   ·方法第49-51页
     ·多态检测样品PCR扩增第49页
     ·内参的PCR扩增第49页
     ·应用DHPLC进行多态分析第49-50页
     ·DNA测序第50页
     ·PCR-RFLP方法检测猪PSME1基因的多态性第50页
     ·多态标记与性状关联分析第50-51页
 3 结果第51-56页
   ·DHPLC检测结果第51页
   ·测序结果第51页
   ·PCR-RFLP检测结果第51页
   ·猪PSME1基因第三内含子C1053T位点与部分免疫性状的关联分析结果第51-56页
 4 小结与讨论第56-58页
   ·本章主要结果第56页
   ·讨论第56-58页
     ·有关DHPLC技术检测SNP位点第56-57页
     ·PSME1基因与免疫性状相关第57-58页
参考文献第58-63页
致谢第63页

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