| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-29页 |
| 1 海洋单胞菌简介 | 第10-14页 |
| ·海洋单胞菌属的分类地位 | 第10页 |
| ·海洋单胞菌生态分布 | 第10-11页 |
| ·新酶和功能蛋白质的研究 | 第11-14页 |
| 2 黑色素的研究现状 | 第14-22页 |
| ·黑色素的分类 | 第14-16页 |
| ·黑色素的共性特征 | 第16-17页 |
| ·黑色素生物合成途径中的关键酶 | 第17-18页 |
| ·黑色素在细胞中的定位 | 第18页 |
| ·黑色素在细菌中扮演的角色 | 第18-20页 |
| ·黑色素在异化细菌中作为电子受体 | 第18-19页 |
| ·黑色素在细菌介导的大气氮的固定中的作用 | 第19页 |
| ·黑色素在病原细菌中作为毒力因子 | 第19-20页 |
| ·细菌黑色素的分子遗传 | 第20-21页 |
| ·黑色素的应用领域 | 第21-22页 |
| ·黑色素在工业上的应用 | 第21页 |
| ·黑色素在农业上的应用 | 第21-22页 |
| ·黑色素在食品业上的应用 | 第22页 |
| ·黑色素在医药上的应用 | 第22页 |
| ·黑色素在环境保护上的应用 | 第22页 |
| 3 转座子插入突变 | 第22-27页 |
| ·转座子的插入机制和随机诱变作用 | 第23-25页 |
| ·利用转座子插入诱变分离目的基因 | 第25页 |
| ·转座子插入位点旁侧序列分析的常用方法 | 第25-27页 |
| ·转座子插入突变在微生物功能基因组学中的应用 | 第27页 |
| 4 展望 | 第27-29页 |
| 本研究目的和意义 | 第29-30页 |
| 2 材料与方法 | 第30-48页 |
| ·材料 | 第30-37页 |
| ·菌株与质粒 | 第30页 |
| ·培养基与培养条件 | 第30-33页 |
| ·常用溶液、缓冲液配制 | 第33-36页 |
| ·工具酶、试剂盒及引物合成 | 第36页 |
| ·仪器 | 第36-37页 |
| ·方法 | 第37-44页 |
| ·菌株的初步鉴定 | 第37-40页 |
| ·黑色素生物合成相关基因(簇)的克隆及序列分析 | 第40-44页 |
| ·海洋单胞菌MWYL1丧失硝酸盐利用突变株的筛选 | 第44-48页 |
| ·MWYL1自发突变株的筛选 | 第44页 |
| ·转座子插入突变库的建立及丧失硝酸盐利用突变株的筛选 | 第44-45页 |
| ·Mini-Tn5转座子插入到MWYL1基因组中验证 | 第45-46页 |
| ·转座子插入位点的定位分析 | 第46-47页 |
| ·测序结果序列分析 | 第47-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-72页 |
| ·细菌的初步鉴定结果 | 第48-56页 |
| ·菌落形态观察及革兰氏染色 | 第48-49页 |
| ·生理生化实验 | 第49-50页 |
| ·盐耐受试验 | 第50页 |
| ·菌株MWYL1生长的pH值范围 | 第50页 |
| ·抗生素敏感性实验结果 | 第50-51页 |
| ·PCR扩增结果 | 第51页 |
| ·16S rRNA基因序列的BLAST分析 | 第51-52页 |
| ·系统发育分析 | 第52-55页 |
| ·小结 | 第55-56页 |
| ·黑色素生物合成基因簇的分离及生物信息学初步分析 | 第56-68页 |
| ·菌株MWYL1的基因组DNA纯度及酶切 | 第56页 |
| ·基因组文库构建质量检测与文库保存 | 第56页 |
| ·产生黑色素克隆的发现及亚克隆 | 第56-58页 |
| ·序列分析 | 第58-64页 |
| ·推测主要基因编码蛋白的预测及分析 | 第64-67页 |
| ·推定基因在相关黑色素合成中的功能 | 第67-68页 |
| ·海洋单胞菌MWYL1丧失硝酸盐突变株的筛选 | 第68-72页 |
| ·海洋单胞菌MWYL1自发突变株的筛选 | 第68页 |
| ·不能利用硝酸盐突变株的筛选 | 第68-69页 |
| ·突变株中mini-Tn5转座子插入基因组的检测 | 第69页 |
| ·不能利用硝酸盐突变株转座子插入位点分析 | 第69-71页 |
| ·小结与讨论 | 第71-72页 |
| 4 讨论 | 第72-74页 |
| 5 进一步研究设想 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 附录 | 第83-90页 |