| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-21页 |
| 1 昆虫分子系统学研究进展 | 第11-18页 |
| ·研究对象 | 第11-14页 |
| ·核糖体 DNA(rDNA) | 第11-13页 |
| ·线粒体的DNA(mtDNA) | 第13页 |
| ·其它基因 | 第13-14页 |
| ·核蛋白编码基因 | 第13-14页 |
| ·卫星 DNA和微卫星 DNA | 第14页 |
| ·研究方法 | 第14-18页 |
| ·蛋白质电泳 | 第14页 |
| ·限制性片段长度多态性分析(RFLP) | 第14-15页 |
| ·随机扩增多态性 DNA(RAPD) | 第15页 |
| ·简单序列间重复扩增(ISSR) | 第15-16页 |
| ·单链构象多态性分析(SSCP)和双链构象多态性分析(DSCP) | 第16页 |
| ·DNA序列分析 | 第16-17页 |
| ·扩增片段长度多态性(AFLP) | 第17-18页 |
| 2 实蝇的研究现状 | 第18-20页 |
| ·实蝇的形态特征 | 第18页 |
| ·实蝇的分类与鉴定 | 第18-19页 |
| ·我国的主要实蝇种类 | 第19-20页 |
| 3 研究目的及意义 | 第20-21页 |
| 第一章 实蝇基因组 DNA的提取 | 第21-26页 |
| 1 材料与方法 | 第21-24页 |
| ·供试虫源 | 第21页 |
| ·试剂与仪器 | 第21页 |
| ·基因组 DNA的提取方法 | 第21-23页 |
| ·DNA质量检测 | 第23-24页 |
| 2 结果与分析 | 第24页 |
| 3 讨论 | 第24-26页 |
| 第二章 实的RAPD分析蝇 | 第26-40页 |
| 1 材料与方法 | 第26-28页 |
| ·材料 | 第26页 |
| ·试剂与仪器 | 第26页 |
| ·试验方法 | 第26-28页 |
| ·基因组 DNA的提取 | 第26页 |
| ·RAPD引物筛选 | 第26页 |
| ·PCR反应体系的优化 | 第26-27页 |
| ·RAPD-PCR体系的稳定性检测 | 第27页 |
| ·RAPD分析 | 第27-28页 |
| ·RAPD扩增 | 第27页 |
| ·电泳检测 | 第27页 |
| ·数据处理 | 第27-28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-38页 |
| ·RAPD引物筛选 | 第28页 |
| ·RAPD反应体系优化 | 第28-31页 |
| ·DNA模板及模板 DNA浓度对 PCR结果的影响 | 第28-29页 |
| ·引物浓度和Mg~(2+)浓度对PCR结果的影响 | 第29-30页 |
| ·Mg~(2+)浓度和dNTP浓度对 PCR结果的影响 | 第30-31页 |
| ·TaqDNA聚合酶对 PCR结果的影响 | 第31页 |
| ·RAPD方法扩增程序的优化 | 第31-33页 |
| ·变性时间对RAPD的影响 | 第31-32页 |
| ·退火温度对 RAPD的影响 | 第32-33页 |
| ·循环次数对RAPD的影响 | 第33页 |
| ·RAPD-PCR体系及反应参数的稳定性检测结果 | 第33页 |
| ·RAPD分析 | 第33-38页 |
| ·RAPD引物扩增结果 | 第33-36页 |
| ·遗传相似性和聚类图 | 第36-37页 |
| ·RAPD鉴别分析 | 第37-38页 |
| 3 讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 实蝇的ISSR分析 | 第40-46页 |
| 1 材料与方法 | 第40-41页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·试剂与仪器 | 第40页 |
| ·试验方法 | 第40-41页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第40页 |
| ·ISSR引物筛选 | 第40页 |
| ·PCR反应体系的优化 | 第40-41页 |
| ·ISSR分析 | 第41页 |
| ·ISSR扩增 | 第41页 |
| ·电泳检测 | 第41页 |
| ·数据处理 | 第41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-45页 |
| ·ISSR引物筛选 | 第41-43页 |
| ·ISSR分析 | 第43-45页 |
| ·遗传相似性和聚类图 | 第43-45页 |
| ·ISSR鉴别分析 | 第45页 |
| 3 讨论 | 第45-46页 |
| 第四章 实蝇线粒体CYT B基因序列分析 | 第46-54页 |
| 1 材料与方法 | 第46-49页 |
| ·材料 | 第46页 |
| ·试剂与仪器 | 第46页 |
| ·试验方法 | 第46-49页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第47页 |
| ·供试培养基及感受态细胞的制备 | 第47页 |
| ·特异引物设计 | 第47页 |
| ·PCR扩增 | 第47页 |
| ·目标片段的回收 | 第47-48页 |
| ·目标片段的克隆 | 第48页 |
| ·目标片段的序列测定 | 第48页 |
| ·数据分析 | 第48-49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-53页 |
| ·Cytb基因的PCR扩增结果 | 第49页 |
| ·Cytb重组克隆质粒的菌落PCR结果 | 第49页 |
| ·扩增目的序列的测定 | 第49-50页 |
| ·数据处理及分析 | 第50-53页 |
| ·Cytb基因序列的校正 | 第50页 |
| ·Cytb基因的比较与基因位点分析 | 第50-52页 |
| ·聚类分析 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-54页 |
| 总结与展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 致谢 | 第63-65页 |
| 附录 | 第65页 |
