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拟南芥VKOR蛋白功能研究及必需半胱氨酸的确定

符号说明第1-7页
中文摘要第7-9页
Abstract第9-11页
1 前言第11-26页
   ·二硫键形成机制研究第11-18页
     ·原核细胞催化二硫键形成的酶系统—Dsb 系统第11-14页
     ·真核生物催化线粒体内二硫键形成的酶系统—Mia40 系统第14-15页
     ·真核生物催化内质网内二硫键形成的酶系统—PDI 系统第15-16页
     ·催化二硫键形成的VKOR 系统第16-18页
   ·拟南芥VKOR 研究进展第18-19页
   ·叶绿体内的氧化还原系统研究进展第19-23页
     ·叶绿体内的氧化还原信号第20页
     ·叶绿体内的还原系统第20-22页
     ·叶绿体内的氧化系统第22-23页
   ·二硫键形成功能研究方法与原理第23-24页
   ·定点突变技术用于蛋白质功能的研究第24页
   ·本研究的目的和意义第24-26页
2 材料与方法第26-39页
   ·实验材料第26-29页
     ·菌株、质粒第26-27页
     ·工具酶和生化试剂第27页
     ·主要实验仪器第27页
     ·引物第27-29页
   ·主要试剂的配制第29-31页
     ·实验相关溶液的配制第29-30页
     ·培养基的配制第30-31页
   ·实验方法第31-39页
     ·拟南芥 VKOR 信号肽预测第31页
     ·pWL1、pWL2、pWL3、pWL4、pWL5 质粒载体的构建第31-37页
     ·拟南芥VKOR 的功能检测方法第37页
     ·pWL3 突变体质粒的获得第37-39页
3 结果与分析第39-51页
   ·拟南芥 VKOR 的结构分析及信号肽预测第39页
   ·带信号肽及不带信号肽AtVKOR-DsbA 、AtVKOR、AtDsbA 基因的克隆第39-42页
     ·带信号肽及不带信号肽AtVKOR-DsbA、AtVKOR、AtDsbA 基因的PCR 扩增第39-40页
     ·带信号肽及不带信号肽AtVKOR-DsbA 、AtVKOR、AtDsbA 基因原核表达载体的构建和鉴定第40-41页
     ·带信号肽AtVKOR-DsbA、不带信号肽AtVKOR-DsbA 、AtVKOR、AtDsbA 基因的序列分析第41-42页
   ·AtVKOR-DsbA、AtVKOR、AtDsbA 功能分析第42-44页
     ·AtVKOR-DsbA、 AtVKOR 对△dsbB 大肠杆菌的弥补作用第42-43页
     ·AtVKOR-DsbA、 AtDsbA 对△dsbA 大肠杆菌的弥补作用第43页
     ·AtVKOR-DsbA、AtVKOR、 AtDsbA 对△dsbAB 大肠杆菌的弥补作用第43-44页
   ·AtVKOR-DsbA 催化二硫键形成必需关键氨基酸的确定第44-51页
     ·突变体质粒的获得第45-47页
     ·AtVKOR-DsbA 必需半胱氨酸的确定第47-49页
     ·AtVKOR、AtDsbA 功能的进一步验证第49-51页
4 讨论第51-55页
   ·VKOR 研究进展第51页
   ·AtVKOR-DsbA 与SyndsbAB 的结构相似性第51-52页
   ·AtVKOR-DsbA 功能研究第52页
   ·AtVKOR-DsbA 必需半胱氨酸的确定第52-53页
   ·AtVKOR-DsbA 参与△dsbAB 大肠杆菌二硫键形成电子传递过程第53-55页
5 结论第55-56页
参考文献第56-65页
致谢第65页

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