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水稻淀粉合成酶OsSSSI基因的等位变异与功能研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-11页
符号说明第11-13页
1 前言第13-22页
   ·植物淀粉合成概述第13-17页
   ·可溶性淀粉合成酶第17-20页
   ·淀粉合成相关基因的变异与稻米品质的关系第20-21页
   ·本研究的主要目的第21-22页
2 材料与方法第22-38页
   ·实验材料第22-24页
     ·植物材料第22页
     ·质粒与细菌菌株第22-23页
     ·PCR 引物第23-24页
     ·化学试剂第24页
   ·OsSSSⅠ基因序列获得及其分析第24-25页
   ·BAC 克隆的筛选第25页
   ·水稻胚乳总 RNA 的提取第25-26页
   ·全长cDNA 的克隆第26-27页
     ·RT-PCR 扩增OsSSSⅠ基因cDNA 片断第26页
     ·RT-PCR 产物的克隆与拼接第26-27页
   ·Southern 杂交分析第27-28页
     ·基因组 DNA 的提取第27页
     ·地高辛标记 DNA 探针的制备第27-28页
     ·Southern 杂交分析第28页
   ·分子标记的发展及其检测第28-30页
   ·Northern 杂交分析第30页
   ·近等基因系的构建与选育第30-31页
   ·水稻转基因载体的构建第31-32页
     ·RNAi 载体的构建第31页
     ·过量表达载体的构建第31-32页
   ·根瘤农杆菌介导的水稻转化第32-34页
     ·水稻的组织培养第32页
     ·农杆菌的培养及其介导的水稻转化第32-34页
     ·抗性愈伤组织的分化及转基因植株再生第34页
   ·转基因水稻植株的鉴定第34-35页
     ·水稻植株潮霉素抗性的离体鉴定第34页
     ·PCR 分析第34页
     ·Southern 杂交分析第34-35页
   ·水稻成熟种子的品质分析第35-38页
     ·样品的准备第35页
     ·直链淀粉含量的测定第35页
     ·胶稠度的测定第35-36页
     ·糊化温度的测定第36页
     ·淀粉粘滞性谱(RVA)分析第36-38页
3 结果与分析第38-69页
   ·OsSSSⅠ基因的克隆与序列分析第38-41页
     ·含OsSSSⅠ基因BAC 阳性克隆的筛选与鉴定第38-40页
     ·OsSSSⅠ基因全长cDNA 的克隆及其序列分析第40-41页
   ·OsSSSⅠ基因在水稻中的表达特性第41-43页
   ·OsSSSⅠ基因的等位性变异分析第43-50页
     ·不同水稻品种间 OsSSSⅠ基因的RFLP 分析第44-45页
     ·基因特异分子标记的发展第45-47页
     ·不同分子标记在水稻品种内的多态性分布第47-50页
     ·不同水稻品种间 OsSSSⅠ基因的复等位变异类型第50页
   ·基因等位变异对稻米品质的影响第50-54页
     ·含不同等位基因水稻品种中 OsSSSⅠ基因的表达第51页
     ·等基因系的选育第51-52页
     ·等基因系中含不同等位基因植株成熟种子淀粉 RVA 特性比较第52-54页
   ·RNAi 抑制OsSSSⅠ基因表达对稻米品质的影响第54-64页
     ·OsSSSⅠ-RNAi 载体的构建第54-55页
     ·转基因水稻植株的获得第55-57页
     ·转基因水稻植株的分子鉴定第57-58页
     ·转基因水稻植株中 OsSSSⅠ基因的表达第58-60页
     ·转基因水稻 T1代植株成熟稻米的理化品质第60-61页
     ·转基因水稻 T1代植株成熟种子淀粉的 RVA 谱第61-64页
   ·过量表达 OsSSSⅠ基因对稻米品质的影响第64-69页
     ·过量表达载体的构建第64页
     ·转基因水稻的获得第64-65页
     ·转基因水稻植株的分子鉴定第65-66页
     ·转基因水稻 T1代成熟种子的淀粉理化特性第66-69页
4 小结与讨论第69-73页
   ·研究小结第69-70页
   ·OsSSSⅠ基因的表达特性第70页
   ·OsSSSⅠ基因的等位性变异第70-71页
   ·有关 OsSSSⅠ基因的功能第71-72页
   ·研究展望第72-73页
参考文献第73-80页
致谢第80页

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