| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 前言 | 第8-10页 |
| 材料和方法 | 第10-27页 |
| 1. 样品的采集和保存 | 第10页 |
| 2. 土壤理化性质及养分含量的测定 | 第10-11页 |
| ·仪器设备 | 第10页 |
| ·测定方法 | 第10-11页 |
| 3 菌种分离和计数 | 第11-12页 |
| ·分离和发酵培养基 | 第11-12页 |
| ·菌株分离及计数 | 第12页 |
| 4 菌种发酵及保藏 | 第12-13页 |
| ·单菌落的观察及编号 | 第12-13页 |
| ·菌株发酵 | 第13页 |
| ·菌种保藏和发酵液处理 | 第13页 |
| 5 活性检测 | 第13-16页 |
| ·仪器设备 | 第13页 |
| ·细胞毒（小鼠黑色素瘤 816细胞）活性测定 | 第13-14页 |
| ·材料和试剂 | 第13-14页 |
| ·测活（MTT 法） | 第14页 |
| ·抗金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）的活性测定 | 第14-15页 |
| ·材料及试剂配制方法 | 第14-15页 |
| ·测活 | 第15页 |
| ·抗白色念珠菌（Candida abbicans）的活性测定 | 第15-16页 |
| ·材料及试剂配制方法 | 第15-16页 |
| ·测活 | 第16页 |
| 6. 红树林土壤宏基因组文库的构建 | 第16-27页 |
| ·实验材料和实验设备 | 第16-19页 |
| ·土壤样品来源 | 第16-17页 |
| ·菌株与质粒 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17-18页 |
| ·仪器设备 | 第18-19页 |
| ·实验流程 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-24页 |
| ·红树林土壤DNA 的提取及纯化 | 第20-21页 |
| ·红树林土壤DNA 的提取方法 | 第20页 |
| ·红树林土壤 DNA 的纯化 | 第20-21页 |
| ·红树林土壤 DNA 酶切 | 第21-22页 |
| ·红树林土壤 DNA 酶切液的纯化 | 第22页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第22-23页 |
| ·质粒pSK~+的单酶切及去磷酸化 | 第23页 |
| ·质粒pSK~+的双酶切 | 第23-24页 |
| ·质粒pSK~+酶切液的回收纯化 | 第24页 |
| ·连接 | 第24-25页 |
| ·连接预实验 | 第24-25页 |
| ·转化 | 第25页 |
| ·感受态细胞 Escherichia coli DH5α的制备 | 第25页 |
| ·化学转化 | 第25页 |
| ·文库的构建 | 第25-26页 |
| ·文库质量检查 | 第26页 |
| ·文库筛选 | 第26-27页 |
| ·样品处理 | 第26页 |
| ·抗金黄色葡萄球菌、白色念珠菌和细胞毒活性测定 | 第26-27页 |
| 结果与分析 | 第27-55页 |
| 1. 可培养微生物数量同土壤理化性质及养分含量的关系 | 第27-31页 |
| ·红树林土壤理化性质与养分含量 | 第27-28页 |
| ·土壤可培养微生物数量 | 第28-29页 |
| ·土壤可培养微生物数量与土壤理化性质和养分含量关系 | 第29-31页 |
| ·土壤可培养细菌数量与土壤理化性质及养分含量的关系 | 第29-30页 |
| ·土壤可培养真菌数量与土壤理化性质及养分含量的关系 | 第30页 |
| ·土壤可培养放线菌数量与土壤理化性质及养分含量的关系 | 第30-31页 |
| 2. 红树林可培养微生物活性评价 | 第31-42页 |
| ·红树林环境可培养微生物菌落形态多样性和活性微生物菌落形态多样性. | 第31-33页 |
| ·活性检测 | 第33-39页 |
| ·细胞毒（小鼠黑色素瘤 B细胞）活性评价 | 第33-35页 |
| ·抗金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）活性评价 | 第35-37页 |
| ·抗白色念珠菌（Candida abbicans）活性检测 | 第37-39页 |
| ·小结 | 第39-42页 |
| ·讨论 | 第42页 |
| 3 红树林土壤宏基因组文库构建 | 第42-55页 |
| ·红树林土壤样品总 DNA 的提取 | 第42-43页 |
| ·红树林土壤总 DNA 的酶切 | 第43-45页 |
| ·载体 pSK+酶切 | 第45-47页 |
| ·载体 pSK+单酶切及去磷酸化 | 第45-46页 |
| ·质粒载体去磷酸化效果验证 | 第46页 |
| ·载体双酶切 | 第46-47页 |
| ·连接转化 | 第47页 |
| ·文库构建及检测 | 第47-50页 |
| ·文库筛选 | 第50-52页 |
| ·筛选结果 | 第50-51页 |
| ·插入片断序列测定及分析 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-55页 |
| 结论(CONCLUSION) | 第55-57页 |
| 文献综述 | 第57-84页 |
| 红树林微生物及其代谢产物的多样性 | 第57-64页 |
| 土壤宏基因组-研究微生物的新策略 | 第64-84页 |
| 附录 Ⅰ: | 第84-85页 |
| 附录 Ⅱ: | 第85-87页 |
| 致 谢 | 第87-88页 |
| 详细摘要 | 第88-93页 |
