第一章 前言 | 第1-24页 |
·HBsAg 的分子生物学 | 第10-14页 |
·乙肝表面抗原表达的研究 | 第14-15页 |
·在大肠杆菌中的表达 | 第14页 |
·在酵母中的表达 | 第14-15页 |
·在哺乳动物细胞中的表达 | 第15页 |
·国内乙肝疫苗的研发方向及乙肝疫苗市场分析 | 第15-18页 |
·影响基因免疫的因素 | 第18-21页 |
·保护性抗原基因的选择 | 第18-19页 |
·载体质粒的选择 | 第19-20页 |
·DNA 疫苗的接种途径 | 第20页 |
·DNA 疫苗的纯度、接种剂量和次数 | 第20页 |
·其它因素 | 第20-21页 |
·立题背景 | 第21-22页 |
·可行性分析 | 第22-24页 |
第二章 乙肝表面抗原(HBsAg)S 基因的克隆及基因突变 | 第24-34页 |
·材料和方法 | 第24-30页 |
·材料 | 第24-25页 |
·菌株和细胞株 | 第24页 |
·培养基 | 第24页 |
·常规溶液、缓冲液 | 第24页 |
·分子生物学试剂 | 第24-25页 |
·仪器 | 第25页 |
·方法 | 第25-30页 |
·生产细胞株C28 基因组DNA 的提取 | 第25页 |
·S 基因的PCR 扩增 | 第25-26页 |
·S 基因PCR 产物与T 载体的连接与转化 | 第26页 |
·质粒DNA 的提取和回收 | 第26页 |
·DNA 酶切 | 第26页 |
·S 基因中稀有密码子的突变 | 第26-30页 |
·结果 | 第30-33页 |
·细胞C28 基因组DNA 的提取 | 第30页 |
·S 基因的扩增 | 第30-31页 |
·S 基因与pMD-18T 载体的连接,转化及鉴定 | 第31页 |
·S 基因的突变 | 第31-33页 |
·讨论 | 第33-34页 |
第三章 表达载体的构建 | 第34-40页 |
·材料和方法 | 第34-36页 |
·材料 | 第34页 |
·质粒、菌株和细胞株 | 第34页 |
·主要试剂 | 第34页 |
·方法 | 第34-36页 |
·乙肝DNA 疫苗双表达载体的构建 | 第34-35页 |
·pHIG 质粒的大量提取 | 第35页 |
·HBsAg、IRES、GM—CSF 基因序列的测定 | 第35-36页 |
·瞬时表达 | 第36页 |
·结果 | 第36-38页 |
·PCR 法扩增的HbsAg、IRES、GM-CSF 基因 | 第36-37页 |
·乙肝DNA 疫苗双表达载体pHIG 的构建 | 第37页 |
·乙肝DNA 疫苗双表达载体pHIG 的酶切鉴定 | 第37-38页 |
·IRES、GM-CSF 基因序列的测定 | 第38页 |
·pHIG 质粒的大量提取 | 第38页 |
·瞬时表达的结果 | 第38页 |
·小结 | 第38-40页 |
第四章 pHIG 双表达载体的免疫 | 第40-46页 |
·材料和方法 | 第40页 |
·材料 | 第40页 |
·方法 | 第40页 |
·结果 | 第40-41页 |
·讨论 | 第41-46页 |
参考文献 | 第46-51页 |
附图1 S基因测序图 | 第51-52页 |
附图2 S~m基因测序图 | 第52-53页 |
中文摘要 | 第53-54页 |
英文摘要 | 第54-55页 |
致谢 | 第55页 |