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乙肝病毒DNA疫苗双表达载体的构建及其诱导小鼠的免疫应答

第一章 前言第1-24页
   ·HBsAg 的分子生物学第10-14页
   ·乙肝表面抗原表达的研究第14-15页
     ·在大肠杆菌中的表达第14页
     ·在酵母中的表达第14-15页
     ·在哺乳动物细胞中的表达第15页
   ·国内乙肝疫苗的研发方向及乙肝疫苗市场分析第15-18页
   ·影响基因免疫的因素第18-21页
     ·保护性抗原基因的选择第18-19页
     ·载体质粒的选择第19-20页
     ·DNA 疫苗的接种途径第20页
     ·DNA 疫苗的纯度、接种剂量和次数第20页
     ·其它因素第20-21页
   ·立题背景第21-22页
   ·可行性分析第22-24页
第二章 乙肝表面抗原(HBsAg)S 基因的克隆及基因突变第24-34页
   ·材料和方法第24-30页
     ·材料第24-25页
       ·菌株和细胞株第24页
       ·培养基第24页
       ·常规溶液、缓冲液第24页
       ·分子生物学试剂第24-25页
       ·仪器第25页
     ·方法第25-30页
       ·生产细胞株C28 基因组DNA 的提取第25页
       ·S 基因的PCR 扩增第25-26页
       ·S 基因PCR 产物与T 载体的连接与转化第26页
       ·质粒DNA 的提取和回收第26页
       ·DNA 酶切第26页
       ·S 基因中稀有密码子的突变第26-30页
   ·结果第30-33页
     ·细胞C28 基因组DNA 的提取第30页
     ·S 基因的扩增第30-31页
     ·S 基因与pMD-18T 载体的连接,转化及鉴定第31页
     ·S 基因的突变第31-33页
   ·讨论第33-34页
第三章 表达载体的构建第34-40页
   ·材料和方法第34-36页
     ·材料第34页
       ·质粒、菌株和细胞株第34页
       ·主要试剂第34页
     ·方法第34-36页
       ·乙肝DNA 疫苗双表达载体的构建第34-35页
       ·pHIG 质粒的大量提取第35页
       ·HBsAg、IRES、GM—CSF 基因序列的测定第35-36页
       ·瞬时表达第36页
   ·结果第36-38页
     ·PCR 法扩增的HbsAg、IRES、GM-CSF 基因第36-37页
     ·乙肝DNA 疫苗双表达载体pHIG 的构建第37页
     ·乙肝DNA 疫苗双表达载体pHIG 的酶切鉴定第37-38页
     ·IRES、GM-CSF 基因序列的测定第38页
     ·pHIG 质粒的大量提取第38页
     ·瞬时表达的结果第38页
   ·小结第38-40页
第四章 pHIG 双表达载体的免疫第40-46页
   ·材料和方法第40页
     ·材料第40页
     ·方法第40页
   ·结果第40-41页
   ·讨论第41-46页
参考文献第46-51页
附图1 S基因测序图第51-52页
附图2 S~m基因测序图第52-53页
中文摘要第53-54页
英文摘要第54-55页
致谢第55页

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