原创性声明 | 第1页 |
学位论文版权使用授权书 | 第3-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
缩略语 | 第11-12页 |
引言 | 第12-13页 |
第一部分 文献综述 | 第13-24页 |
1.SOD研究进展 | 第13-20页 |
·SOD的发现和功能 | 第13页 |
·SOD的种类和分布 | 第13-14页 |
·SOD的分子生物学研究 | 第14-16页 |
·SOD基因 | 第15页 |
·SOD基因克隆及表达 | 第15-16页 |
·SOD基因表达的调控 | 第16页 |
·超氧化物歧化酶与植物抗逆性 | 第16-18页 |
·SOD转基因植物 | 第18-19页 |
·SOD在医药、化工、食品中的应用 | 第19-20页 |
·SOD的临床应用 | 第19-20页 |
·SOD在日用化学工业上的应用 | 第20页 |
2.果树遗传转化研究进展 | 第20-23页 |
·果树遗传转化的主要方法 | 第20-22页 |
·农杆菌介导法 | 第21页 |
·基因枪法 | 第21-22页 |
·聚乙二醇转化法 | 第22页 |
·其它遗传转化方法 | 第22页 |
·应用的目的基因 | 第22-23页 |
3.hCu/Zn-SOD转基因苹果的前景展望 | 第23-24页 |
第二部分 研究报告 | 第24-56页 |
第一章 RSOD基因的合成及其植物表达载体构建 | 第24-36页 |
1.材料与方法 | 第24-27页 |
·材料 | 第24-25页 |
·方法 | 第25-27页 |
·植物材料的准备 | 第25页 |
·植物基因组DNA的抽提 | 第25-26页 |
·氯化钙化学法制备大肠杆菌感受态细胞及化学法转化 | 第26页 |
·酶切反应 | 第26页 |
·质粒连接反应 | 第26-27页 |
2.结果与分析 | 第27-34页 |
·番茄果实特异PG基因启动子的克隆 | 第27-28页 |
·RSOD基因的设计和合成 | 第28-33页 |
·RSOD基因的设计 | 第28-29页 |
·RSOD基因的合成引物设计 | 第29-31页 |
·RSOD基因的合成 | 第31-32页 |
·RSOD基因与h Cu/Zn-SOD基因的序列比对分析 | 第32-33页 |
·RSOD基因的植物表达载体构建 | 第33-34页 |
3.讨论 | 第34-36页 |
第二章 农杆菌蘸花法转化拟南芥植株分析RSOD合成基因功能 | 第36-51页 |
1.材料与方法 | 第37-42页 |
·试验材料 | 第37-38页 |
·方法 | 第38-42页 |
·拟南芥转化 | 第38-39页 |
·GUS组织化学染色分析 | 第39页 |
·转基因阳性植株的PCR检测 | 第39-40页 |
·RT-PCR | 第40-41页 |
·SOD酶的比活率测定 | 第41页 |
·转基因拟南芥耐盐性分析 | 第41-42页 |
2.结果与分析 | 第42-50页 |
·T_0代转基因植株检测及耐盐性鉴定 | 第42-43页 |
·T_0代转基因植株检测 | 第42-43页 |
·T_0代转基因植株酶活性分析 | 第43页 |
·T_1代转基因植株的遗传规律分析、分子检测及转基因植株耐盐性鉴定 | 第43-50页 |
·遗传规律分析 | 第43-44页 |
·分子检测 | 第44-46页 |
·转基因植株的耐盐性分析 | 第46-50页 |
3.讨论 | 第50-51页 |
第三章 RSOD基因在苹果和番茄中的遗传转化研究 | 第51-56页 |
1.材料与方法 | 第51-53页 |
·材料 | 第51-52页 |
·方法 | 第52-53页 |
2.结果与分析 | 第53-55页 |
·抗性苗的获得 | 第54页 |
·GUS组织化学检测 | 第54页 |
·PCR检测 | 第54-55页 |
3.讨论 | 第55-56页 |
总结 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-64页 |
附录 | 第64-67页 |
致谢 | 第67页 |