海参肌肉组织全长cDNA文库的构建及初步鉴定
| 文献综述 | 第1-24页 |
| 1 刺参 | 第9-17页 |
| ·刺参的生物学特征 | 第9-12页 |
| ·刺参的繁殖习性 | 第12-13页 |
| ·刺参的夏眠现象、生长的适宜温度和盐度范围 | 第13-14页 |
| ·刺参的增养殖现状 | 第14-15页 |
| ·刺参病害情况 | 第15-17页 |
| 2. cDNA文库的构建方法研究 | 第17-24页 |
| ·构建cDNA文库的载体系统 | 第17-19页 |
| ·构建cDNA文库的方法 | 第19页 |
| ·新型cDNA文库 | 第19-21页 |
| ·cDNA文库的质量 | 第21-22页 |
| ·cDNA文库的应用 | 第22页 |
| ·文库筛选可选择的具体办法 | 第22-23页 |
| ·cDNA 文库技术的局限性 | 第23-24页 |
| 实验正文 | 第24-58页 |
| 1. 实验材料 | 第24-26页 |
| ·动物材料 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·实验仪器 | 第24页 |
| ·菌株与载体 | 第24-25页 |
| ·培养基和常用溶液 | 第25-26页 |
| 2. 试验技术路线及方法 | 第26-34页 |
| ·海参肌肉组织总 RNA 的提取 | 第26-28页 |
| ·cDNA 文库构建 | 第28-32页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第28-29页 |
| ·cDNA 的长距离 PCR（LD- PCR） | 第29页 |
| ·蛋白酶 K 消化与酶切 | 第29-30页 |
| ·cDNA 片段的分级分离 | 第30-31页 |
| ·cDNA 与载体λTriplEx2 连接 | 第31-32页 |
| ·文库质量的鉴定 | 第32-34页 |
| ·未扩增文库滴度测定 | 第32页 |
| ·重组克隆效率的确定 | 第32页 |
| ·文库扩增 | 第32-33页 |
| ·扩增文库滴度测定 | 第33页 |
| ·文库的 PCR 鉴定 | 第33-34页 |
| 3. 实验结果 | 第34-40页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第34-35页 |
| ·总 RNA 纯度及产量检测 | 第34-35页 |
| ·总 RNA 完整性的检测 | 第35页 |
| ·文库质量鉴定 | 第35-40页 |
| ·LD-PCR 产物 | 第36页 |
| ·ds-cDNA 的分级 | 第36-37页 |
| ·未扩增文库滴度的测定 | 第37-38页 |
| ·重组克隆效率的确定 | 第38-39页 |
| ·扩增文库滴度测定 | 第39-40页 |
| 4.讨论 | 第40-45页 |
| ·提高 RNA 质量的措施 | 第40-42页 |
| ·全长 cDNA 文库的构建 | 第42-44页 |
| ·连接效率 | 第44-45页 |
| ·实验意义及展望 | 第45页 |
| 5.结论 | 第45-46页 |
| 6.参考文献 | 第46-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
