中文摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 引言 | 第8-18页 |
1 几丁质酶研究回顾 | 第8-10页 |
2 微生物几丁质酶 | 第10-15页 |
·产几丁质酶的微生物 | 第10页 |
·微生物几丁质酶的定位 | 第10-11页 |
·几丁质酶的分类 | 第11页 |
·微生物几丁质酶生化特性 | 第11-15页 |
·微生物几丁质酶的分子量 | 第11-14页 |
·微生物几丁质酶的等电点pI | 第14页 |
·pH 对微生物几丁质酶的影响 | 第14页 |
·温度对微生物几丁质酶的影响 | 第14页 |
·金属离子对微生物几丁质酶的影响 | 第14-15页 |
3 食线虫菌物几丁质酶的生物防治作用 | 第15-16页 |
·食线虫菌物几丁质酶的研究 | 第15-16页 |
·几丁质酶其他蛋白协同作用 | 第16页 |
4 前景及本课题研究 | 第16-18页 |
·食线虫菌物的应用 | 第16-17页 |
·本课题的研究意义 | 第17-18页 |
第二章 淡紫拟青霉高产几丁质酶菌株筛选 | 第18-25页 |
1 材料和方法 | 第18-19页 |
·菌株来源 | 第18页 |
·培养基制备 | 第18页 |
·几丁质琼脂培养基 | 第18页 |
·几丁质液体培养基 | 第18页 |
·几丁质胶体制备 | 第18页 |
·筛选方法 | 第18-19页 |
·几丁质琼脂平板培养筛选 | 第18-19页 |
·液体培养筛选 | 第19页 |
·几丁质酶活力测定 | 第19页 |
2 结果与分析 | 第19-24页 |
·平板培养筛选结果 | 第19-21页 |
·液体培养筛选结果 | 第21页 |
·菌株稳定性 | 第21-24页 |
·产几丁质酶的稳定性 | 第21-22页 |
·菌株遗传稳定性 | 第22-24页 |
3 讨论 | 第24-25页 |
·淡紫拟青霉产几丁质酶菌株的平板筛选法 | 第24页 |
·创建高产几丁质酶筛选体系 | 第24-25页 |
第三章 淡紫拟青霉对线虫的侵染 | 第25-29页 |
1 材料与方法 | 第25-26页 |
·供试菌株和靶标线虫 | 第25页 |
·淡紫拟青霉孢子悬浮液的制备 | 第25页 |
·淡紫拟青霉对根结线虫卵的侵染测定 | 第25页 |
·菌株对甘薯茎线虫的寄生作用 | 第25-26页 |
2 结果 | 第26-27页 |
·淡紫拟青霉对根结线虫卵的侵染 | 第26页 |
·淡紫拟青霉对甘薯茎线虫的寄生 | 第26-27页 |
3 讨论 | 第27-29页 |
·淡紫拟青霉几丁质酶活性与侵染力呈正相关 | 第27-28页 |
·淡紫拟青霉的几丁质酶对卵侵染的作用点 | 第28页 |
·淡紫拟青霉对甘薯茎线虫虫体的侵染条件 | 第28-29页 |
第四章 淡紫拟青霉FZ-0289 产几丁质酶条件 | 第29-37页 |
1 材料与方法 | 第29-30页 |
·菌株来源 | 第29页 |
·基础培养基 | 第29页 |
·培养基配方单因素试验 | 第29页 |
·几丁质培养基 | 第29页 |
·几丁质有机氮培养基 | 第29页 |
·接种和培养 | 第29页 |
·培养条件正交试验 | 第29-30页 |
2 结果 | 第30-35页 |
·培养基配方单因素试验 | 第30-33页 |
·培养条件优化 | 第33-35页 |
·正交法确定培养条件 | 第33-34页 |
·优化条件后产几丁质酶特性测定 | 第34-35页 |
3 讨论 | 第35-37页 |
·几丁质形态和细度是影响几丁质酶产量的关键因素 | 第35-36页 |
·几丁质形态与氮源对菌体产几丁质酶能力有交互影响 | 第36页 |
·正交试验建立 FZ-0289 产几丁质酶实验室培养体系 | 第36-37页 |
第五章 几丁质酶分离纯化及特性研究 | 第37-50页 |
1 材料与方法 | 第37-40页 |
·粗酶液准备 | 第37页 |
·分离纯化方法 | 第37-39页 |
·亲和层析 | 第37-38页 |
·吸附时间和吸附量的确定 | 第37页 |
·几丁质粉末亲和层析 | 第37-38页 |
·离子交换层析 | 第38页 |
·蛋白含量测定 | 第38-39页 |
·几丁质酶活检测 | 第39页 |
·蛋白质凝胶电泳 | 第39页 |
·SDS-PAGE | 第39页 |
·电泳染色 | 第39页 |
·几丁质酶的性质研究 | 第39-40页 |
·几丁质酶分子量的测定 | 第39页 |
·反应条件对几丁质酶活的影响 | 第39页 |
·温度对几丁质酶活的影响 | 第39页 |
·pH 对几丁质酶活的影响 | 第39页 |
·温度和pH 对几丁质酶活的综合影响 | 第39页 |
·几丁质酶的稳定性 | 第39-40页 |
·温度对酶稳定性的影响 | 第39-40页 |
·pH 对酶稳定性的影响 | 第40页 |
·金属离子对酶活的影响 | 第40页 |
2 结果 | 第40-48页 |
·几丁质酶的分离纯化 | 第40-44页 |
·几丁质酶亲和层析 | 第40-41页 |
·离子交换 | 第41-44页 |
·几丁质酶纯化结果的计算 | 第44页 |
·几丁质酶的性质研究 | 第44-48页 |
·分子量 | 第44页 |
·温度、pH 对几丁质酶的影响 | 第44-47页 |
·粗酶反应最适温度 | 第45页 |
·粗酶反应最适pH | 第45-46页 |
·几丁质酶E1 反应温度和pH 的关系 | 第46页 |
·几丁质酶E1 对温度的稳定性 | 第46页 |
·几丁质酶E1 对pH 的稳定性 | 第46-47页 |
·金属离子对几丁质酶E1 活力的影响 | 第47-48页 |
3 讨论 | 第48-50页 |
·几丁质酶纯化方法的改进 | 第48-49页 |
·反应因素对酶活力的影响 | 第49-50页 |
结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
附录 | 第58页 |