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副溶血弧菌耐热溶血毒素单克隆抗体的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
第一章 绪论第11-20页
   ·课题的研究背景、意义及内容第11-14页
     ·课题的研究背景第11-12页
     ·课题的研究意义第12-13页
     ·课题研究的主要内容第13-14页
   ·国内和国际副溶血弧菌检测的研究现状第14-20页
     ·免疫学检测副溶血弧菌的研究第14-15页
     ·分型方法检测副溶血弧菌的研究第15-17页
     ·PCR 方法检测副溶血弧菌第17-18页
     ·核酸分子检测副溶血弧菌的研究第18-20页
第二章 一般材料与方法第20-23页
   ·常用实验材料第20-21页
     ·细菌株与细胞株第20页
     ·常用试剂第20-21页
   ·仪器与设备第21-22页
   ·主要试剂的配制第22-23页
第三章 副溶血弧菌耐热溶血毒素的提取与纯化第23-31页
   ·引言第23页
   ·实验材料第23-24页
     ·实验试剂第23页
     ·细菌株及培养条件第23-24页
     ·主要仪器设备第24页
   ·实验方法第24-28页
     ·耐热溶血毒素粗蛋白的提取与制作第24页
     ·耐热溶血毒素的纯化第24-26页
     ·TDH 蛋白质浓度的测定第26-27页
     ·溶血活性分析第27-28页
   ·结果第28-29页
     ·TDH 的提取与纯化第28-29页
     ·TDH 蛋白质浓度的测定第29页
     ·TDH 溶血活性的分析第29页
   ·讨论第29-30页
   ·小结第30-31页
第四章 耐热溶血毒素相关性质的研究与鉴定第31-36页
   ·引言第31页
   ·实验材料第31-32页
     ·实验药物和试剂第31页
     ·实验动物第31页
     ·主要仪器设备第31-32页
   ·实验方法第32-33页
     ·TDH 的变性温度的测量第32页
     ·TDH 的毒性分析第32页
     ·TDH 的耐热性测定第32-33页
   ·结果第33-34页
     ·TDH 变性温度的测定第33页
     ·TDH 的毒性分析第33-34页
     ·耐热性分析第34页
   ·讨论第34-35页
   ·小结第35-36页
第五章 Western 斑点印迹法检测致病性副溶血弧菌第36-42页
   ·引言第36页
   ·实验材料第36-37页
     ·实验动物和试剂第36-37页
     ·细胞株及培养条件第37页
     ·主要仪器设备第37页
   ·实验方法第37-38页
     ·特异性抗TDH 免疫血清的制备第37页
     ·使用Western 斑点印迹法检测致病性副溶血弧菌操作程序第37-38页
     ·抗体最佳工作浓度的确定第38页
     ·TDH 免疫血清对致病性副溶血弧菌的特异性试验第38页
   ·结果第38-40页
     ·特异性抗TDH 免疫血清的制备第38-39页
     ·抗体最佳工作浓度的确定第39页
     ·对致病性副溶血弧菌与非致病性副溶血弧菌的敏感性第39-40页
     ·重复性试验第40页
   ·讨论第40-41页
   ·小结第41-42页
第六章 副溶血弧菌TDH 鼠性单克隆抗体的制作和鉴定第42-62页
   ·引言第42页
   ·实验材料第42-43页
     ·实验药物和试剂第42-43页
     ·细胞株及动物第43页
     ·主要仪器设备第43页
   ·实验方法第43-50页
     ·TDH 免疫动物方式与周期的建立第43-45页
     ·饲养细胞的制作第45-46页
     ·骨髓瘤细胞的准备第46-47页
     ·脾细胞的制备第47页
     ·细胞融合第47页
     ·杂交瘤细胞的选择性培养第47-48页
     ·杂交瘤细胞的筛选第48-49页
     ·单克隆抗体的克隆化第49页
     ·单克隆抗体的鉴定第49-50页
   ·实验结果第50-60页
     ·TDH 的动物免疫第50-51页
     ·饲养细胞的制备第51页
     ·骨髓瘤细胞的制备第51-52页
     ·细胞融合第52-56页
     ·单克隆抗体的筛选、检测及克隆化第56-57页
     ·单克隆抗体的鉴定第57-60页
   ·讨论第60-61页
   ·小结第61-62页
第七章 结论第62-64页
致谢第64-65页
参考文献第65-67页

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