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农杆菌介导法玉米转抗病基因RDV的研究

摘要第1-6页
1. 引言第6-23页
   ·玉米转基因研究进展第6-15页
     ·受体系统第7-8页
     ·基因导入方法第8-12页
       ·农杆菌介导的遗传转化第8-10页
       ·基因枪法第10-11页
       ·电击法第11页
       ·PEG法第11-12页
       ·其它转化方法第12页
     ·报告基因与选择抗性基因第12-13页
       ·报告基因第12页
       ·选择抗性基因第12-13页
     ·外源基因的表达调控第13-14页
     ·玉米转基因研究的应用第14-15页
   ·植物抗病毒基因工程研究进展第15-21页
     ·利用病毒的外壳蛋白基因第16-18页
     ·利用病毒复制酶基因第18-20页
     ·利用病毒的运动蛋白基因第20页
     ·利用病毒核蛋白酶基因第20-21页
     ·国内抗病毒基因工程第21页
   ·同工酶在植物中的研究第21-22页
   ·本研究的意义第22-23页
2. 材料和方法第23-32页
   ·试验材料与方法第23-25页
     ·试验材料第23-25页
       ·植物材料第23页
       ·质粒和菌株第23页
       ·PCR扩增引物第23页
       ·主要试剂第23-24页
         ·质粒提取主要试剂第23页
         ·大肠杆菌感受态细胞的制备第23-24页
         ·总 DNA提取主要试剂第24页
         ·杂交主要试剂第24页
       ·酯酶、过氧化物酶提取主要试剂第24页
       ·主要筛选及检测试剂第24-25页
       ·主要仪器第25页
   ·试验方法第25-32页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第25页
     ·碱法少量提取质粒DNA第25-26页
     ·玉米幼胚组织培养方法第26-27页
       ·诱导愈伤组织培养基主要成分第26页
       ·诱导分化培养基第26-27页
     ·基因转化方法第27页
     ·玉米总DNA的提取第27-28页
     ·玉米基因组DNA的PCR扩增第28页
     ·Southem杂交第28-30页
     ·玉米叶片酯酶、过氧化物酶的提取及聚丙烯酰胺凝胶电泳第30-31页
     ·转基因植株的表型鉴定第31-32页
       ·抗潮霉素株系的筛选第31页
       ·攻毒试验第31-32页
3. 结果与分析第32-40页
   ·农杆菌转化玉米自交系幼胚高效再生体系的建立第32-34页
     ·愈伤组织诱导和分化第32-34页
     ·农杆菌转化结果第34页
   ·抗潮霉素筛选结果第34-35页
     ·种子忍耐潮霉素极限筛选第34-35页
     ·抗潮霉素株系筛选第35页
   ·转化植株的分子检测第35-36页
   ·转基因玉米后代抗病性分析第36-40页
4. 讨论第40-42页
   ·玉米自交系的转化第40-41页
   ·转基因植株的遗传表达及抗病性第41-42页
参考文献第42-46页
英文摘要第46-47页
附录I第47-48页
附录II第48-49页

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