第一章 文献综述 | 第1-24页 |
·小麦籽粒硬度及其分子生物学基础 | 第7-12页 |
·硬度的遗传学研究 | 第7-8页 |
·Friabilin 蛋白 | 第8-10页 |
·Puroindoline 蛋白 | 第10-11页 |
·Pina 和Pinb 基因功能验证 | 第11-12页 |
·展望 | 第12页 |
·小麦转基因研究进展 | 第12-23页 |
·基因枪法 | 第13-15页 |
·农杆菌介导法 | 第15-16页 |
·花粉管通道法 | 第16-18页 |
·基因表达调控元件的作用及载体构建策略 | 第18-19页 |
·转基因植株筛选 | 第19-20页 |
·外源基因的表达和遗传 | 第20-23页 |
·本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
第二章 材料与方法 | 第24-35页 |
·实验材料 | 第24-26页 |
·基因及质粒载体 | 第24页 |
·受体小麦品种及菌株 | 第24页 |
·试剂及耗材 | 第24-25页 |
·人工合成的寡核苷酸片段 | 第25-26页 |
·研究方法 | 第26-35页 |
·载体构建 | 第26-30页 |
·花粉管通道介导法转化小麦及抗性筛选 | 第30-31页 |
·转基因植株的分子鉴定 | 第31-33页 |
·转基因植株的friabilin 蛋白分析 | 第33-35页 |
第三章 结果与分析 | 第35-45页 |
·Pina 与 Pinb 基因小麦反义表达载体的构建 | 第35-39页 |
·基础质粒pAHC25 的酶切图谱及鉴定 | 第35-36页 |
·反义表达载体pAHantipA 的构建及其酶切鉴定 | 第36-37页 |
·反义表达载体pAHantipB 的构建及鉴定 | 第37-39页 |
·转反义载体pAHantipA、pAHantipB 基因小麦的初步鉴定 | 第39-41页 |
·转化植株的获得及其后代Basta 筛选 | 第39页 |
·转基因植株的PCR 检测 | 第39-40页 |
·转基因植株的DNA Dot blot 分析 | 第40-41页 |
·转过量表达载体pUBPa、pUBPb 基因小麦的鉴定 | 第41-45页 |
·转化后代Basta 筛选 | 第41页 |
·转基因植株的PCR 检测 | 第41-43页 |
·转基因植株的Southern blot 分析 | 第43-44页 |
·转化后代的friabilin 蛋白分析 | 第44-45页 |
第四章 讨论 | 第45-47页 |
·硬度转基因研究 | 第45-46页 |
·花粉管通道法介导的遗传转化 | 第46页 |
·反义RNA 在小麦Puroindolines 基因功能验证中的作用 | 第46页 |
·过量表达载体转基因植株后代遗传鉴定 | 第46-47页 |
第五章 结论 | 第47-48页 |
·反义载体pAHantipA 和pAHantipB 的构建及转基因小麦的获得 | 第47页 |
·过量表达载体转基因植株的鉴定 | 第47页 |
·过量表达载体转基因植株中friabilin 的检测 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-57页 |
个人简介 | 第57-58页 |
致谢 | 第58页 |