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Puroindoines基因反义载体构建和转化及过量表达载体转基因小麦的遗传鉴定

第一章 文献综述第1-24页
   ·小麦籽粒硬度及其分子生物学基础第7-12页
     ·硬度的遗传学研究第7-8页
     ·Friabilin 蛋白第8-10页
     ·Puroindoline 蛋白第10-11页
     ·Pina 和Pinb 基因功能验证第11-12页
     ·展望第12页
   ·小麦转基因研究进展第12-23页
     ·基因枪法第13-15页
     ·农杆菌介导法第15-16页
     ·花粉管通道法第16-18页
     ·基因表达调控元件的作用及载体构建策略第18-19页
     ·转基因植株筛选第19-20页
     ·外源基因的表达和遗传第20-23页
   ·本研究的目的和意义第23-24页
第二章 材料与方法第24-35页
   ·实验材料第24-26页
     ·基因及质粒载体第24页
     ·受体小麦品种及菌株第24页
     ·试剂及耗材第24-25页
     ·人工合成的寡核苷酸片段第25-26页
   ·研究方法第26-35页
     ·载体构建第26-30页
     ·花粉管通道介导法转化小麦及抗性筛选第30-31页
     ·转基因植株的分子鉴定第31-33页
     ·转基因植株的friabilin 蛋白分析第33-35页
第三章 结果与分析第35-45页
   ·Pina 与 Pinb 基因小麦反义表达载体的构建第35-39页
     ·基础质粒pAHC25 的酶切图谱及鉴定第35-36页
     ·反义表达载体pAHantipA 的构建及其酶切鉴定第36-37页
     ·反义表达载体pAHantipB 的构建及鉴定第37-39页
   ·转反义载体pAHantipA、pAHantipB 基因小麦的初步鉴定第39-41页
     ·转化植株的获得及其后代Basta 筛选第39页
     ·转基因植株的PCR 检测第39-40页
     ·转基因植株的DNA Dot blot 分析第40-41页
   ·转过量表达载体pUBPa、pUBPb 基因小麦的鉴定第41-45页
     ·转化后代Basta 筛选第41页
     ·转基因植株的PCR 检测第41-43页
     ·转基因植株的Southern blot 分析第43-44页
     ·转化后代的friabilin 蛋白分析第44-45页
第四章 讨论第45-47页
   ·硬度转基因研究第45-46页
   ·花粉管通道法介导的遗传转化第46页
   ·反义RNA 在小麦Puroindolines 基因功能验证中的作用第46页
   ·过量表达载体转基因植株后代遗传鉴定第46-47页
第五章 结论第47-48页
   ·反义载体pAHantipA 和pAHantipB 的构建及转基因小麦的获得第47页
   ·过量表达载体转基因植株的鉴定第47页
   ·过量表达载体转基因植株中friabilin 的检测第47-48页
参考文献第48-57页
个人简介第57-58页
致谢第58页

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