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BmNPV和AcMNPV egt 基因启动子特性及家蚕海藻糖酶基因启动子活性的滞育激素调节研究

英文缩写说明第1-10页
摘要第10-11页
Abstract第11-13页
第一章 昆虫杆状病毒分子生物学研究进展(文献综述)第13-26页
   ·杆状病毒基因组第13页
   ·杆状病毒基因组DNA的复制机构第13-16页
   ·杆状病毒基因表达的调控第16-17页
   ·杆状病毒表达载体系统第17-18页
   ·杆状病毒egt基因与重组杆状病毒杀虫剂第18-22页
   ·昆虫激素调控宿主昆虫和杆状病毒相关基因的表达第22-26页
第二章 实验设计第26-29页
   ·实验目的第26页
   ·研究意义第26-27页
   ·研究内容和方法第27-29页
     ·BmNPV和AcMNPV egt基因启动子的特性分析第27-28页
     ·滞育激素对家蚕海藻糖酶基因启动子活性的调控第28-29页
第三章 实验材料和常用方法第29-39页
   ·实验材料第29-31页
     ·病毒株、昆虫细胞系和家蚕品种第29页
     ·质粒载体和受体菌第29页
     ·酶和主要试剂第29页
     ·常用溶液和缓冲液第29-30页
     ·其它试剂第30-31页
     ·细菌培养基第31页
     ·昆虫细胞培养基第31页
     ·主要仪器设备第31页
   ·常用实验方法第31-39页
     ·细胞的传代与培养第31页
     ·细胞的冻存第31-32页
     ·细胞的复苏第32页
     ·脂质体介导的功能质粒在昆虫细胞系中的转染与瞬时表达第32页
     ·功能质粒转染后的病毒反式激活与昆虫激素处理第32页
     ·家蚕的饲养和功能质粒在家蚕幼虫中的转染与瞬时表达第32页
     ·细胞计数第32-33页
     ·BmNPV和AcMNPV基因组DNA的制备第33页
     ·碱法少量快速抽提质粒DNA第33页
     ·碱法大量制备质粒DNA第33-34页
     ·限制性内切酶反应第34页
     ·DNA片段的分离与回收第34页
     ·DNA的连接第34页
     ·感受态细胞的制备第34-35页
     ·质粒DNA的转化第35页
     ·重组质粒的筛选鉴定第35页
     ·病毒滴度的测定第35-36页
     ·病毒多角体的计数第36-37页
     ·细胞抽提物的制备第37页
     ·荧光素酶活性分析第37页
     ·穿梭载体校正系统E.coli β-半乳糖苷酶比活性测定第37页
     ·DNA浓度测定第37页
     ·蛋白质浓度测定第37-38页
     ·DNA序列测定第38页
     ·数据统计分析第38-39页
第四章 BmNPV egt基因启动子特性分析第39-54页
   ·材料与方法第40-43页
   ·结果与分析第43-52页
     ·BmNPV egt基因启动子序列分析第43-44页
     ·病毒因子对BmNPV egt基因启动子的反式激活第44-45页
     ·BmNPV egt启动子控制下的luc基因的转录时相第45-46页
     ·同源重复序列hr3对egt基因启动子活力的增强作用第46页
     ·BmNPV egt基因启动子功能区的确定第46-48页
     ·昆虫蜕皮激素和保幼激素对BmNPV egt基因启动子活力的影响第48-50页
     ·BmNPV egt基因启动子控制转录的luc基因在家蚕体内的表达第50-52页
   ·小结第52-54页
第五章 AcMNPV egt基因启动子特性分析第54-65页
   ·材料与方法第54-56页
     ·病毒和细胞系第54页
     ·实验方法第54-56页
   ·结果与分析第56-64页
     ·AcMNPV egt启动子序列分析第56-57页
     ·AcMNPV egt基因启动子需要病毒因子的反式激活第57-58页
     ·AcMNPV egt基因启动子的转录时相第58-59页
     ·AcMNPV egt翻译起始位点上游159 bp区段具有基本的转录活性第59-60页
     ·BmNPV hr3显著增强AcMNPV egt基因启动子的活性第60-61页
     ·外源昆虫蜕皮激素对AcMNPV egt启动子转录活性的影响第61-63页
     ·AcMNPV egt启动子控制转录的报告质粒在家蚕体内的表达第63-64页
   ·小结第64-65页
第六章 滞育激素对家蚕海藻糖酶基因启动子活性的调节第65-72页
   ·材料与方法第66-67页
     ·蚕品种与主要试剂第66页
     ·实验方法第66-67页
   ·结果与分析第67-70页
     ·家蚕和野桑蚕trehalase基因5′侧翼区序列第67页
     ·报告质粒的瞬时表达第67页
     ·滞育激素对家蚕海藻糖酶基因启动子活性的的调控作用第67-70页
   ·小结第70-72页
第七章 结论与讨论第72-77页
   ·BmNPV和AcMNPV egt基因启动子的特性第72-74页
     ·杆状病毒egt基因启动子序列的比较第72页
     ·BmNPV和AcMNPV egt基因启动子需要病毒因子的反式激活第72-73页
     ·BmNPV和AcMNPV egt基因启动子转录时间晚第73-74页
     ·ATG上游-159~-309 bp存在主要的转录调控顺式元件第74页
   ·BmNPV hr3对杆状病毒egt基因启动子特性的影响第74页
   ·蜕皮激素和保幼激素对杆状病毒egt基因启动子活性的调节第74-75页
     ·蜕皮激素的调节作用第74-75页
     ·保幼激素的调节作用第75页
   ·滞育激素对家蚕海藻糖酶基因启动子活性的调控第75-77页
     ·家蚕和野桑蚕海藻糖酶基因启动子的特性第75页
     ·滞育激素对家蚕海藻糖酶基因启动子转录活性的调控第75-77页
参考文献第77-87页
致谢第87-88页
附录第88-98页
 1 BmNPV egt启动子测序图第88-89页
 2 AcMNPV egt启动子测序图第89-90页
 3 Bombyx mori trehalase 5′侧翼区测序图第90-92页
 4 Bombyx mandarina trehalase 5′侧翼区测序图第92-94页
 5 攻读博士期间发表论文第94-98页
作者简历第98页

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