英文缩写说明 | 第1-10页 |
摘要 | 第10-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
第一章 昆虫杆状病毒分子生物学研究进展(文献综述) | 第13-26页 |
·杆状病毒基因组 | 第13页 |
·杆状病毒基因组DNA的复制机构 | 第13-16页 |
·杆状病毒基因表达的调控 | 第16-17页 |
·杆状病毒表达载体系统 | 第17-18页 |
·杆状病毒egt基因与重组杆状病毒杀虫剂 | 第18-22页 |
·昆虫激素调控宿主昆虫和杆状病毒相关基因的表达 | 第22-26页 |
第二章 实验设计 | 第26-29页 |
·实验目的 | 第26页 |
·研究意义 | 第26-27页 |
·研究内容和方法 | 第27-29页 |
·BmNPV和AcMNPV egt基因启动子的特性分析 | 第27-28页 |
·滞育激素对家蚕海藻糖酶基因启动子活性的调控 | 第28-29页 |
第三章 实验材料和常用方法 | 第29-39页 |
·实验材料 | 第29-31页 |
·病毒株、昆虫细胞系和家蚕品种 | 第29页 |
·质粒载体和受体菌 | 第29页 |
·酶和主要试剂 | 第29页 |
·常用溶液和缓冲液 | 第29-30页 |
·其它试剂 | 第30-31页 |
·细菌培养基 | 第31页 |
·昆虫细胞培养基 | 第31页 |
·主要仪器设备 | 第31页 |
·常用实验方法 | 第31-39页 |
·细胞的传代与培养 | 第31页 |
·细胞的冻存 | 第31-32页 |
·细胞的复苏 | 第32页 |
·脂质体介导的功能质粒在昆虫细胞系中的转染与瞬时表达 | 第32页 |
·功能质粒转染后的病毒反式激活与昆虫激素处理 | 第32页 |
·家蚕的饲养和功能质粒在家蚕幼虫中的转染与瞬时表达 | 第32页 |
·细胞计数 | 第32-33页 |
·BmNPV和AcMNPV基因组DNA的制备 | 第33页 |
·碱法少量快速抽提质粒DNA | 第33页 |
·碱法大量制备质粒DNA | 第33-34页 |
·限制性内切酶反应 | 第34页 |
·DNA片段的分离与回收 | 第34页 |
·DNA的连接 | 第34页 |
·感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
·质粒DNA的转化 | 第35页 |
·重组质粒的筛选鉴定 | 第35页 |
·病毒滴度的测定 | 第35-36页 |
·病毒多角体的计数 | 第36-37页 |
·细胞抽提物的制备 | 第37页 |
·荧光素酶活性分析 | 第37页 |
·穿梭载体校正系统E.coli β-半乳糖苷酶比活性测定 | 第37页 |
·DNA浓度测定 | 第37页 |
·蛋白质浓度测定 | 第37-38页 |
·DNA序列测定 | 第38页 |
·数据统计分析 | 第38-39页 |
第四章 BmNPV egt基因启动子特性分析 | 第39-54页 |
·材料与方法 | 第40-43页 |
·结果与分析 | 第43-52页 |
·BmNPV egt基因启动子序列分析 | 第43-44页 |
·病毒因子对BmNPV egt基因启动子的反式激活 | 第44-45页 |
·BmNPV egt启动子控制下的luc基因的转录时相 | 第45-46页 |
·同源重复序列hr3对egt基因启动子活力的增强作用 | 第46页 |
·BmNPV egt基因启动子功能区的确定 | 第46-48页 |
·昆虫蜕皮激素和保幼激素对BmNPV egt基因启动子活力的影响 | 第48-50页 |
·BmNPV egt基因启动子控制转录的luc基因在家蚕体内的表达 | 第50-52页 |
·小结 | 第52-54页 |
第五章 AcMNPV egt基因启动子特性分析 | 第54-65页 |
·材料与方法 | 第54-56页 |
·病毒和细胞系 | 第54页 |
·实验方法 | 第54-56页 |
·结果与分析 | 第56-64页 |
·AcMNPV egt启动子序列分析 | 第56-57页 |
·AcMNPV egt基因启动子需要病毒因子的反式激活 | 第57-58页 |
·AcMNPV egt基因启动子的转录时相 | 第58-59页 |
·AcMNPV egt翻译起始位点上游159 bp区段具有基本的转录活性 | 第59-60页 |
·BmNPV hr3显著增强AcMNPV egt基因启动子的活性 | 第60-61页 |
·外源昆虫蜕皮激素对AcMNPV egt启动子转录活性的影响 | 第61-63页 |
·AcMNPV egt启动子控制转录的报告质粒在家蚕体内的表达 | 第63-64页 |
·小结 | 第64-65页 |
第六章 滞育激素对家蚕海藻糖酶基因启动子活性的调节 | 第65-72页 |
·材料与方法 | 第66-67页 |
·蚕品种与主要试剂 | 第66页 |
·实验方法 | 第66-67页 |
·结果与分析 | 第67-70页 |
·家蚕和野桑蚕trehalase基因5′侧翼区序列 | 第67页 |
·报告质粒的瞬时表达 | 第67页 |
·滞育激素对家蚕海藻糖酶基因启动子活性的的调控作用 | 第67-70页 |
·小结 | 第70-72页 |
第七章 结论与讨论 | 第72-77页 |
·BmNPV和AcMNPV egt基因启动子的特性 | 第72-74页 |
·杆状病毒egt基因启动子序列的比较 | 第72页 |
·BmNPV和AcMNPV egt基因启动子需要病毒因子的反式激活 | 第72-73页 |
·BmNPV和AcMNPV egt基因启动子转录时间晚 | 第73-74页 |
·ATG上游-159~-309 bp存在主要的转录调控顺式元件 | 第74页 |
·BmNPV hr3对杆状病毒egt基因启动子特性的影响 | 第74页 |
·蜕皮激素和保幼激素对杆状病毒egt基因启动子活性的调节 | 第74-75页 |
·蜕皮激素的调节作用 | 第74-75页 |
·保幼激素的调节作用 | 第75页 |
·滞育激素对家蚕海藻糖酶基因启动子活性的调控 | 第75-77页 |
·家蚕和野桑蚕海藻糖酶基因启动子的特性 | 第75页 |
·滞育激素对家蚕海藻糖酶基因启动子转录活性的调控 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-87页 |
致谢 | 第87-88页 |
附录 | 第88-98页 |
1 BmNPV egt启动子测序图 | 第88-89页 |
2 AcMNPV egt启动子测序图 | 第89-90页 |
3 Bombyx mori trehalase 5′侧翼区测序图 | 第90-92页 |
4 Bombyx mandarina trehalase 5′侧翼区测序图 | 第92-94页 |
5 攻读博士期间发表论文 | 第94-98页 |
作者简历 | 第98页 |