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海栖热袍菌基因aguA在常温下形成的mRNA二级结构与基因表达水平关系的初步研究

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-7页
第一章 前言第7-12页
   ·立题依据第7页
   ·研究现状第7-11页
     ·mRNA二级结构研究现状第7-9页
     ·稀有密码子对表达水平的影响第9页
     ·α-葡萄糖醛酸酶简介第9-11页
   ·研究内容及目标第11-12页
第二章 材料与方法第12-18页
   ·材料第12-14页
     ·菌种与质粒第12页
     ·培养基第12-13页
     ·主要试剂及其来源第13页
     ·主要仪器设备及其来源第13-14页
   ·方法第14-18页
     ·海栖热袍菌的培养方法第14页
     ·海栖热袍菌基因组DNA的提取方法第14-15页
     ·电转化感受态细胞的制备第15页
     ·琼脂糖电泳胶回收DNA片断和质粒抽提第15页
     ·DNA连接反应第15页
     ·电转化第15页
     ·α-葡萄糖醛酸酶的表达试验第15-16页
     ·α-葡萄糖醛酸酶的标准曲线第16-17页
     ·聚丙烯酰氨凝胶电泳第17-18页
第三章 mRNA二级结构预测及引物设计第18-24页
   ·二级结构预测方法第18-19页
   ·引物设计第19-23页
     ·1 #引物的设计第19-20页
     ·3 #,4#引物的设计第20-22页
     ·5 #引物的设计第22-23页
   ·pHsh载体的选择第23-24页
第四章 结果第24-40页
   ·以质粒pTrc99A为载体构建重组基因第24-33页
     ·重组质粒pTrc99A-aguA的构建第24-26页
     ·重组质粒pTrc99A-aguA1的构建第26-28页
     ·重组质粒pUC19-aguA的构建第28-29页
     ·重组质粒pTrc99A-aguA3,pTrc99A-aguA4,pTrc99A-aguA5的构建第29-32页
     ·重组质粒pTrc99A-aguA34,pTrc99A-aguA345的构建第32-33页
   ·以质粒pHsh为载体构建重组基因第33-34页
     ·pHsh系列重组质粒的鉴定分析第33-34页
   ·突变基因序列第34-36页
   ·突变效果的对比第36-40页
     ·以pTrc99A为载体的重组质粒的表达水平第36-38页
     ·以pHsh为载体的重组质粒的表达水平第38-40页
第五章 讨论第40-45页
   ·基因内部二级结构稳定性对基因表达的影响第40-42页
   ·翻译起始区mRNA二级结构稳定性对基因表达的影响第42-45页
主要结论第45-46页
参考文献第46-48页
论文清单第48-49页
致谢第49-50页
附录第50-55页

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