第一章 综述 | 第1-24页 |
·引言 | 第10-12页 |
·干细胞因子(SCF)概述 | 第12-14页 |
·SCF物学功能 | 第12-13页 |
·SCF生产研究概况 | 第13-14页 |
·大肠杆菌发酵工艺的优化 | 第14-18页 |
·培养基 | 第14-15页 |
·培养条件 | 第15-17页 |
·基因工程菌的高密度培养 | 第17-18页 |
·重组药物蛋白的分离纯化研究 | 第18-21页 |
·概述 | 第18-19页 |
·重组蛋白的分离与纯化 | 第19页 |
·重组蛋白的复性 | 第19-20页 |
·rhSCF的分离纯化 | 第20-21页 |
参考文献 | 第21-24页 |
第二章 实验部分 | 第24-34页 |
·材料与设备 | 第24-25页 |
·菌株 | 第24页 |
·试剂 | 第24页 |
·仪器设备 | 第24-25页 |
·实验方法 | 第25-32页 |
·试剂的配制 | 第25-27页 |
·培养方法 | 第27-28页 |
·测定还原糖 | 第28-29页 |
·测定氨基氮 | 第29页 |
·Bradford比色法测定蛋白质含量 | 第29-30页 |
·SDS-PAGE | 第30-32页 |
·结果分析 | 第32-33页 |
·菌体浓度的测定 | 第32页 |
·细胞干重的测定 | 第32页 |
·rhSCF表达量的测定 | 第32页 |
·pH值测定 | 第32页 |
·还原糖的测定 | 第32页 |
·氨基氮的测定 | 第32页 |
·蛋白纯度的测定 | 第32-33页 |
参考文献 | 第33-34页 |
第三章 大肠杆菌发酵培养基的优化研究 | 第34-46页 |
·前言 | 第34-35页 |
·培养基种类对rhSCF表达的影响 | 第35页 |
·M9培养基的优化 | 第35-42页 |
·碳源种类的选择 | 第36-37页 |
·氮源种类的选择 | 第37-39页 |
·发酵液组成的优化 | 第39-42页 |
·镁含量的优化 | 第42-43页 |
·优化培养基中大肠杆菌DH5α/pBV220的培养 | 第43-44页 |
·小结 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-46页 |
第四章 大肠杆菌生产rhSCF的摇瓶发酵工艺研究 | 第46-58页 |
·前言 | 第46页 |
·温度对大肠杆菌生长和rhSCF表达的影响 | 第46-50页 |
·单一培养温度对E.coli生长的影响 | 第46-47页 |
·变温培养对E.coli生长和rhSCF表达的影响 | 第47-50页 |
·pH对E.coli生长和rhSCF表达的影响 | 第50-51页 |
·种子菌龄对E.coli生长和rhSCF表达的影响 | 第51页 |
·接种量对E.coli生长和rhSCF表达的影响 | 第51-52页 |
·摇瓶溶氧对E.coli生长和rhSCF表达的影响 | 第52-53页 |
·装液量对E.coli生长和rhSCF表达的影响 | 第52-53页 |
·摇床转速对E.coli生长和rhSCF表达的影响 | 第53页 |
·优化条件下大肠杆菌DH5α/pBV220/rhSCF的培养 | 第53-56页 |
·优化条件下E.coli生长和rhSCF表达情况 | 第54页 |
·优化条件下大肠杆菌深层发酵特性研究 | 第54-56页 |
·小结 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-58页 |
第五章 大肠杆菌在发酵罐上的间歇培养研究 | 第58-66页 |
·前言 | 第58页 |
·溶氧对菌体生长和rhSCF表达的影响 | 第58-60页 |
·接种量对菌体生长和rhSCF表达的影响 | 第60-61页 |
·诱导时机的选择 | 第61-62页 |
·优化条件下的间歇培养 | 第62-63页 |
·小结 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-66页 |
第六章 重组人干细胞因子的分离纯化研究 | 第66-75页 |
·前言 | 第66页 |
·高效疏水作用色谱(HPHIC)对rhSCF的分离纯化 | 第66-72页 |
·以聚乙二醇(PEG)为配基的硅胶疏水色谱填料 | 第66-70页 |
·以糠醇为配基的硅胶疏水色谱填料 | 第70-72页 |
·高效离子交换色谱(HPIEC)对rhSCF的分离纯化 | 第72-73页 |
·以弱阴离子交换填料为固定相 | 第72页 |
·以强阴离子交换填料为固定相 | 第72-73页 |
·小结 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-75页 |
致谢 | 第75页 |