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猪RAPD及其H-FABP基因PCR-RFLP的分子标记研究

第一部分 文献综述第1-31页
 第一章 H-FABP的主要作用第14-17页
   ·FABP_s理化特性第14-15页
   ·H-FABP的主要功能第15-16页
     ·作为FA的转运载体,调节细胞脂肪酸的代谢第15页
     ·作协同因子(cofactor)增强以代谢为基础的细胞合成第15页
     ·调节细胞增殖和生长第15页
     ·参与细胞内FA隔室化分布第15-16页
     ·参与胰岛素信息传递第16页
     ·参与硒和前列腺素代谢第16页
     ·解除长链FA,脂酰CoA的细胞毒性作用第16页
     ·通过对FA的调节影响体内多种生物活性肽的生物学效应第16页
   ·H-FABP的生理效应第16-17页
   ·H-FABP在高血压病中的生理意义第17页
 第二章 猪H-FABP基因及其与IMF含量的关系第17-27页
   ·候选基因法第18-19页
   ·影响IMF含量的候选基因第19-20页
   ·猪H-FABP基因第20-21页
     ·猪H-FABP基因的定位第20页
     ·猪H-FABP基因序列分析第20页
     ·猪H-FABP基因的遗传多态性第20-21页
   ·猪A-FABP基因第21-22页
     ·A-FABP基因的序列分析及定位第21页
     ·A-FABP基因的遗传变异IMF含量的相关分析第21-22页
   ·IMF研究进展第22-23页
     ·IMF的生成第22-23页
     ·IMF对猪肉风味的影响第23页
   ·H-FABP基因的多态性与IMF的关系第23-27页
 第三章 与本研究相关的分子标记在猪分子育种中的研究进展第27-31页
   ·PCR-RFLP标记技术第27-29页
     ·RFLP标记的优缺点与PCR-RFLP技术第27页
     ·PCR-RFLP技术在猪遗传育种中的应用第27-29页
       ·PCR-RFLP技术标记H-FABP基因及A-FABP基因第27页
       ·用PCR-RFLP技术标记ESR基因和FSH β亚基基因第27-28页
       ·用PCR-RFLP技术检测Hal基因第28页
       ·用PCR-RFLP技术检测PGH基因第28页
       ·用PCR-RFLP分析SLA基因第28页
       ·用PCR-RFLP分析线粒体DNA(mtDNA)第28-29页
     ·PCR-RFLP技术的研究展望第29页
   ·RAPD标记第29-31页
     ·RAPD原理第29页
     ·RAPD的优缺点及在猪育种中的应用第29-31页
第二部分 实验研究第31-59页
 前言第31页
 第一章 材料与方法第31-40页
   ·实验材料第31-34页
     ·实验动物第31-32页
     ·实验试剂第32-33页
       ·生化试剂与生物学试剂第32-33页
       ·普通试剂第33页
     ·溶液与缓冲液第33-34页
       ·采样所用溶液第33-34页
       ·血样及组织样中提取DNA所用溶液第34页
       ·RAPD及PCR-RFLP分析所用溶液第34页
     ·实验仪器设备第34页
   ·实验方法第34-40页
     ·样本的采集与保存第34-35页
     ·耳组织样中DNA的提取与分离第35页
     ·血样中DNA的提取与分离第35-36页
     ·DNA质量检测、纯化及浓度计算第36-37页
       ·琼脂糖凝胶电泳检测DNA第36页
       ·分光光度法检测DNA第36页
       ·DNA的纯化第36-37页
     ·RAPD标记分析第37-38页
       ·反应混合液的组成第37页
       ·RAPD-PCR反应程序第37页
       ·RAPD-RCR反应产物的电泳第37页
       ·图象分析第37页
       ·数据处理第37-38页
     ·PCR-RFLP DNA标记分析第38-40页
       ·反应混合液的组成与制备第38页
       ·PCR-RFLP的PCR反应程序第38页
       ·PCR-RFLP的PCR反应产物的电泳检测第38页
       ·PCR-RFLP的PCR反应产物的限制性酶切第38-39页
       ·酶切产物的电泳第39页
       ·图象分析第39页
       ·数据分析方法第39-40页
 第二章 结果与分析第40-48页
   ·不同猪种和野猪基因组DNA检测第40-41页
   ·不同猪种和野猪RAPD标记第41-44页
     ·RAPD-PCR图谱第41-42页
     ·RAPD标记结果分析第42-44页
       ·池DNA的RAPD结果分析第42-43页
       ·品种个体间基因组DNA的RAPD结果分析第43-44页
   ·不同猪种及野猪H-FABP基因5`-端上游区和第二内含子的PCR-PFLP标记第44-48页
     ·H-FABP基因PCR产物检测第44页
     ·H-FABP基因5`-端上游区PCR产物HinfⅠ的酶切结果第44页
     ·H-FABP基因第二内含子区PCR产物HaeⅢ酶切结果第44-45页
     ·H-FABP基因第二内含子PCR产物MspⅠ酶切结果第45页
     ·H-FABP基因5`-端上游区和第二内含子PCR产物限制性内切酶酶切结果基因判定第45-46页
       ·HinfⅠ酶切结果的基因型判定。第45页
       ·HaeⅢ酶切结果的基因型判定第45页
       ·Msp酶切结果的基因型判定第45-46页
     ·基因型分布及基因频率第46-47页
     ·基因型及基因频率Hardy-Weinberg平衡状态的检测第47页
     ·不同猪种和野猪H-FABP基因PCR-RFLP_s的纯度、杂合度、有效等位基因数和多态信息含量第47-48页
 第三章 讨论第48-57页
   ·采样、样本含量和位点数量第48-49页
     ·采样与样本含量第48页
     ·位点数量第48-49页
   ·血液和组织样品的保存及DNA提取第49-50页
   ·PCR条件优化第50-51页
     ·PCR反应体系中各成分的最适浓度第50页
     ·扩增片段的长度第50页
     ·退火温度第50-51页
   ·限制性内切酶酶切问题第51页
   ·不同猪种及野猪H-FABP基因的PCR-RFLPs第51-52页
   ·不同猪种和野猪H-FABP基因的群体遗传学特征第52-53页
   ·猪H-FABP基因的PCR-RFLP_s与IMF含量的关系第53页
   ·RAPD反应体系的筛选第53-57页
     ·RAPD体系第53-56页
       ·DNA模板第54页
       ·dNTPs第54页
       ·引物第54-55页
       ·Mg~(2+)浓度第55页
       ·退火温度第55-56页
     ·RAPD标记技术用于保护遗传资源的问题第56页
     ·RAPD标记分析结果的科学性问题第56-57页
 第四章 结论第57-59页
   ·RAPD第57页
   ·PCR-RFLP第57-59页
     ·猪H-FABP基因5′-端上游区的HinfⅠ-RFLP第57-58页
     ·猪H-FABP基因第二内含子HaeⅢ-RFLP第58页
     ·猪H-FABP基因第二内含子的MspⅠ-RFLP第58-59页
参考文献第59-69页
附件第69-72页
致谢第72-73页
作者简介第73页

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