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VEGF的神经保护机制之一——诱导Kv1.2钾通道蛋白的磷酸化

一. 英文缩写第1-7页
二. 中文摘要第7-10页
三. 英文摘要第10-14页
四. 正文第14-60页
 (一) 引言第14-17页
 (二) 材料和方法第17-26页
  1 整体实验第17-21页
   ·实验动物第17页
   ·试剂来源第17页
   ·仪器第17-18页
   ·实验方法第18-21页
     ·大脑中动脉线栓模型的制备第18页
     ·脑组织切片的准备第18页
     ·脑组织切片免疫组织化学染色第18-19页
     ·脑组织切片免疫荧光标记第19-20页
       ·Kv1.2、NSE、GFAP三重荧光标记第19页
       ·Kv1.2、Flk-1和/或Flt-1荧光标记第19-20页
     ·免疫沉淀结合Western blot免疫印迹实验第20-21页
       ·组织蛋白提取第20页
       ·免疫沉淀第20页
       ·Western blot第20-21页
  2 离体实验第21-25页
   ·细胞株第21页
   ·试剂来源第21页
   ·仪器第21页
   ·实验方法第21-25页
     ·细胞培养第21页
     ·细胞免疫组织化学染色第21-22页
     ·体外缺血模型的建立第22页
     ·细胞死亡检测第22-23页
       ·PI染色第22-23页
       ·LDH检测第23页
     ·药物处理第23页
       ·检测VEGF对细胞缺血损伤的影响第23页
       ·检测VEGF对Kv1.2蛋白酪氨酸磷酸化的影响第23页
     ·VEGF反义ODN处理第23-24页
     ·Western blot第24-25页
     ·免疫沉淀结合Western blot免疫印迹实验第25页
       ·细胞蛋白的提取第25页
       ·免疫沉淀第25页
       ·Western blot第25页
  3 数据分析第25-26页
 (三) 结果第26-30页
  1 缺血大鼠脑内Kv1.2蛋白的分布规律及其蛋白磷酸化第26-27页
   ·MCAo后大鼠大脑皮层Kv1.2蛋白表达的变化第26页
   ·Kv1.2蛋白的细胞定位第26页
   ·Kv1.2蛋白与VEGF受体Flk-1和Flt-1的共存情况第26-27页
   ·MCAo后Kv1.2蛋白酪氨酸磷酸化的时程变化第27页
  2 体外VEGF缺血细胞保护效应及其对Kv1.2蛋白磷酸化的调节第27-30页
   ·SH-SY5Y细胞VEGF、Flk-1、Flt-1和Kv1.2的表达情况第27页
   ·HGD后SH-SY5Y细胞损伤及其Kv1.2蛋白表达的情况第27-28页
   ·HGD对SH-SY5Y细胞Kv1.2蛋白酪氨酸磷酸化的影响第28页
   ·VEGF对HGD引起的SH-SY5Y细胞损伤的影响第28页
   ·VEGF对HGD处理的SH-SY5Y细胞Kv1.2蛋白酪氨酸磷酸化的影响第28页
   ·VEGF反义ODN抑制HGD诱导的Kv1.2蛋白酪氨酸磷酸化并加重细胞损伤第28-30页
 (四) 讨论第30-35页
  1 外向延迟整流钾通道Kv1.2与脑缺血损伤第30-31页
  2 VEGF与缺血神经细胞损伤第31-32页
  3 诱导Kv1.2蛋白磷酸化可能是VEGF缺血保护作用的机制之一第32-33页
  4 VEGF可能通过其受体Flk-1实现对Kv1.2蛋白磷酸化的调控第33-34页
  5 VEGF诱导Kv1.2蛋白磷酸化的可能机制第34-35页
 (五) 小结第35-36页
 (六) 图版说明第36-50页
 (七) 参考文献第50-60页
五. 致谢第60-61页
六. 综述第61-101页
 (一) 综述一:钾离子通道的研究概况第61-84页
 (二) 综述二:神经干细胞及其在中枢神经系统修复中的应用研究第84-101页
七. 附录第101-102页

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