| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 缩略词表 | 第12-14页 |
| 引言 | 第14-24页 |
| 1 苹果病毒概述 | 第14-15页 |
| 2 苹果病毒的生物学特性 | 第15-16页 |
| ·苹果病毒的寄主及分布 | 第15-16页 |
| ·苹果主要病毒的传播途径 | 第16页 |
| 3 病毒的遗传变异和进化分析 | 第16-18页 |
| ·植物病毒的变异 | 第16-18页 |
| 4 苹果病毒病的危害 | 第18-19页 |
| ·病毒危害苹果生长的机理 | 第18页 |
| ·主要病毒病症状特点 | 第18-19页 |
| 5 苹果病毒病的防控现状 | 第19页 |
| ·国际上对病毒病的防控 | 第19页 |
| ·苹果病毒病在我国的发生和防控情况 | 第19页 |
| 6 苹果潜隐性病毒检测方法 | 第19-23页 |
| ·指示植物法 | 第20页 |
| ·电子显微镜技术 | 第20-21页 |
| ·血清学方法 | 第21页 |
| ·分子生物学技术 | 第21-23页 |
| 7 本研究和意义和目的 | 第23-24页 |
| 第一章 我国苹果主要病毒病发生与分布的研究 | 第24-46页 |
| 1 材料与方法 | 第24-31页 |
| ·试验材料 | 第24-27页 |
| ·植物材料 | 第24-25页 |
| ·供试试剂 | 第25页 |
| ·扩增引物 | 第25-27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·四种病毒的RT-PCR 检测 | 第27-31页 |
| ·植物总RNA 提取方法 | 第27-29页 |
| ·cDNA 合成 | 第29页 |
| ·PCR 扩增及体系优化 | 第29-30页 |
| ·PCR 产物的电泳分析 | 第30页 |
| ·RT-PCR 优化体系灵敏度的测定 | 第30页 |
| ·RT-PCR 优化体系田间样本检测可靠性的验证 | 第30页 |
| ·序列测定与分析 | 第30页 |
| ·苹果主产区四种病毒病发生情况的检测 | 第30-31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-44页 |
| ·四种方法提取总RNA 完整性、纯度、浓度及扩增效果比较 | 第31-32页 |
| ·四种方法提取总RNA 完整性比较 | 第31页 |
| ·四种方法提取总RNA 纯度和浓度比较 | 第31-32页 |
| ·四种方法提取总RNA 特异性扩增效果比较 | 第32页 |
| ·四种苹果病毒RT-PCR 检测特异引物的筛选 | 第32-34页 |
| ·ASPV RT-PCR 检测特异性引物的筛选 | 第32页 |
| ·ASGV RT-PCR 检测特异性引物的筛选 | 第32-33页 |
| ·ACLSV RT-PCR 检测特异性引物的筛选 | 第33页 |
| ·ApMV RT-PCR 检测特异性引物的筛选 | 第33-34页 |
| ·三种苹果病毒RT-PCR 检测体系的优化 | 第34-36页 |
| ·ApMV RT-PCR 检测体系的优化 | 第34页 |
| ·ASPV RT-PCR 检测体系的优化 | 第34-35页 |
| ·ASGV RT-PCR 检测体系的优化 | 第35-36页 |
| ·ACLSV RT-PCR 检测体系的优化 | 第36页 |
| ·四种苹果病毒RT-PCR 检测灵敏度的确定 | 第36-37页 |
| ·RT-PCR 优化体系田间检测可靠性的验证 | 第37-39页 |
| ·RT-PCR 不同时期检测田间样本可靠性的验证 | 第37-38页 |
| ·田间样本不同部位RT-PCR 检测可靠性的验证 | 第38-39页 |
| ·RT-PCR 检测扩增片段序列测定 | 第39页 |
| ·我国苹果产区四种苹果病毒病发生情况 | 第39-44页 |
| ·四种苹果病毒在我国苹果产区的发生情况 | 第39-42页 |
| ·我国苹果产区苹果病毒复合侵染情况 | 第42-43页 |
| ·不同树龄的苹果受病毒侵染情况 | 第43-44页 |
| 3 讨论 | 第44-46页 |
| ·四种苹果主要病毒RT-PCR 检测体系的建立 | 第44-45页 |
| ·苹果病毒总RNA 提取方法的选择 | 第44页 |
| ·RT-PCR 扩增引物的筛选 | 第44-45页 |
| ·四种苹果主要病毒在我国的发生与分布 | 第45-46页 |
| 第二章 苹果主要病毒多重RT-PCR 体系的建立 | 第46-55页 |
| 1 材料与方法 | 第46-49页 |
| ·试验材料 | 第46-47页 |
| ·植物材料 | 第46页 |
| ·试剂及仪器 | 第46页 |
| ·供试引物 | 第46-47页 |
| ·苹果多重RT-PCR 检测体系的建立 | 第47-49页 |
| ·植物总RNA 提取及cDNA 合成 | 第47页 |
| ·苹果潜隐性病毒多重RT-PCR 检测引物组合的筛选 | 第47-48页 |
| ·四种苹果病毒多重RT-PCR 检测体系的建立 | 第48页 |
| ·四种苹果多重RT-PCR 的稀释限点 | 第48页 |
| ·多重RT-PCR 产物的电泳分析 | 第48页 |
| ·多重RT-PCR 优化体系田间样本检测可靠性的验证 | 第48-49页 |
| ·序列测定与分析 | 第49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-53页 |
| ·苹果四种病毒多重RT-PCR 体系的建立 | 第49-51页 |
| ·苹果潜隐性病毒多重RT-PCR 引物组合的筛选 | 第49页 |
| ·苹果四种病毒多重RT-PCR 检测体系的引物组合筛选 | 第49-50页 |
| ·苹果四种病毒多重RT-PCR 检测体系的优化 | 第50-51页 |
| ·苹果四种病毒多重RT-PCR 检测体系的灵敏性分析 | 第51页 |
| ·苹果四种病毒多重RT-PCR 体系田间样本检测可靠性验证 | 第51-52页 |
| ·PCR 产物的克隆与测序 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-55页 |
| ·影响多重RT-PCR 扩增的因素 | 第53页 |
| ·多重RT-PCR 检测体系田间应用的可能性 | 第53-55页 |
| 第三章 我国苹果褪绿叶斑病毒分子变异的研究 | 第55-72页 |
| 1 材料与方法 | 第55-62页 |
| ·试验材料 | 第55-59页 |
| ·病毒分离物 | 第55-59页 |
| ·试剂及仪器 | 第59页 |
| ·供试引物 | 第59页 |
| ·反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR） | 第59页 |
| ·目的片段的回收 | 第59-60页 |
| ·目的片段的连接 | 第60页 |
| ·连接产物转化感受态细胞 | 第60页 |
| ·菌体的培养和鉴定 | 第60-61页 |
| ·序列分析 | 第61-62页 |
| ·序列测定与序列相似性分析 | 第61页 |
| ·系统进化树分析 | 第61-62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-71页 |
| ·ACLSV 分离物核苷酸序列、氨基酸序列及系统进化分析 | 第62-63页 |
| ·ACLSV 分离物核苷酸、氨基酸序列比对 | 第62-63页 |
| ·ACLSV 分离物的系统分析 | 第63页 |
| ·ACLSV 分离物系统进化关系分析 | 第63-71页 |
| ·不同寄主ACLSV 分离物系统进化关系分析 | 第63-69页 |
| ·不同地域ACLSV 分离物系统进化分析 | 第69-70页 |
| ·不同苹果品种ACLSV 分离物系统进化分析 | 第70-71页 |
| 3 讨论 | 第71-72页 |
| 结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 附录 | 第79-82页 |
| 作者简介 | 第82-83页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
