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家蚕AFLP图谱的构建和天蚕卵黄原蛋白基因的克隆

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-15页
第一部分 家蚕AFLP图谱的构建第15-46页
 一 文献综述第15-24页
  1 分子连锁图谱的特点和应用第15-18页
   1.1 分子连锁图谱的特点第15-16页
   1.2 分子连锁图谱的应用第16-18页
    1.2.1 连锁图在比较基因组作图中的应用第16页
    1.2.2 利用分子连锁图进行数量性状基因定位第16-17页
    1.2.3 连锁图谱在分子标记辅助育种中的应用第17-18页
  2 家蚕分子连锁图谱的构建及其研究进展第18-20页
   2.1 家蚕分子连锁图的构建第18-19页
   2.2 连锁图谱在家蚕上的应用第19-20页
  3 AFLP技术在遗传图谱构建中的应用第20-22页
   3.1 AFLP技术第20-22页
    3.1.1 AFLP的基本原理第21页
    3.1.2 AFLP分析的一般过程第21-22页
  4 自然有色织物利用的现状及前景第22-23页
  5 绿茧基因及定位研究概况第23-24页
 二 序言第24-26页
  1 研究背景及意义第24-25页
  2 实验基本路线第25-26页
 三 家蚕的AFLP分析第26-40页
  1 材料与方法第26-32页
   1.1 作图材料第26页
   1.2 主要仪器设备第26页
   1.3 主要生化试剂及溶液的配制第26-27页
   1.4 数据统计分析软件第27页
   1.5 基因组DNA的制备第27页
   1.6 模板DNA的制备第27-28页
    1.6.1 基因组DNA的酶切第27页
    1.6.2 接头的准备第27-28页
    1.6.3 连接第28页
   1.7 模板DNA的扩增第28-29页
    1.7.1 预扩增第28页
    1.7.2 选择性扩增第28-29页
   1.8 扩增产物的凝胶电泳检测第29-30页
    1.8.1 琼脂糖凝胶电泳检测第29页
    1.8.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测第29-30页
   1.9 数据统计与分析第30-32页
    1.9.1 AFLP标记的统计与分析第30-31页
    1.9.2 连锁分析与作图第31-32页
  2 结果与分析第32-40页
   2.1 基因组DNA的制备第32-33页
   2.2 扩增产物的凝胶电泳检测第33-34页
    2.2.1 琼脂糖凝胶电泳检测第33页
    2.2.2 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测第33-34页
   2.3 数据统计与分析第34-40页
    2.3.1 AFLP标记的统计与分析第34页
    2.3.2 连锁分析与作图第34-40页
 四 讨论第40-46页
  1 作图群体的大小第40-41页
  2 作图材料的选择第41页
  3 家蚕的雌不发生交换对F2作图群体的影响第41-44页
  4 限制性内切酶的选择第44页
  5 家蚕AFLP分子标记的分离模式第44-45页
  6 目前的问题及解决的方法第45-46页
第二部分 天蚕卵黄原蛋白基因的克隆第46-89页
 一 文献综述第46-57页
  1 蚕功能基因克隆研究第46页
  2 鳞翅目昆虫有关卵形成的蛋白的研究第46-49页
  3 卵黄原蛋白(Vgs)第49-56页
   3.1 结构特性第50-51页
   3.2 测序分析和比较第51-56页
    3.2.1 聚丝氨酸区域第52-53页
    3.2.2 Vg前体的剪切位点第53-55页
    3.2.3 进化关系第55-56页
  3.3 激素对卵黄原蛋白表达的影响第56-57页
 二 序言第57-60页
  1 研究背景第57-58页
  2 目的和意义第58-59页
  3 研究基本路线第59-60页
 三 天蚕基因组DNA的抽提和文库的构建第60-67页
  1 材料与方法第60-65页
   1.1 天蚕材料第60页
   1.2 主要仪器设备第60页
   1.3 主要生化试剂及常用溶液的配制第60页
   1.4 基因组DNA的制备第60-61页
   1.5 基因组文库的构建第61-65页
    1.5.1 基因组DNA的限制性内切酶的消化第61-62页
    1.5.2 插入DNA片段和λDASHⅡ载体的连接第62-63页
    1.5.3 重组载体的包装第63页
    1.5.4 包装产物的滴度检测第63-64页
    1.5.5 构建文库的扩增第64-65页
  2 结果与分析第65-67页
   2.1 基因组DNA的抽提第65页
   2.2 文库的构建第65-67页
    2.2.1 消化基因组DNA的限制性内切酶的选择第65页
    2.2.2 载体的选择第65-66页
    2.2.3 连接第66页
    2.2.4 包装产物的滴定度第66页
    2.2.5 构建的扩增文库第66-67页
 四 探针的制备和文库的筛选第67-75页
  1 材料与方法第67-72页
   1.1 天蚕基因组DNA和基因组文库材料第67页
   1.2 主要仪器设备第67页
   1.3 主要生化试剂及常用溶液的配制第67-68页
   1.4 探针的制备第68-69页
    1.4.1 合成探针引物的筛选第68页
    1.4.2 探针的合成第68-69页
   1.5 文库的筛选第69-72页
    1.5.1 第一次筛选第69-71页
    1.5.2 第二次筛选第71-72页
    1.5.3 阳性噬菌斑的获得第72页
  2 结果与分析第72-75页
   2.1 探针的制备第72-73页
   2.2 文库的筛选第73-75页
 五 阳性λ噬菌体的分析与测序第75-84页
  1 材料与方法第75-77页
   1.1 噬菌体菌株和天蚕基因组DNA第75页
   1.2 主要仪器设备第75页
   1.3 主要生化试剂及常用溶液第75页
   1.4 λ噬菌体DNA的快速抽提第75-76页
   1.5 阳性λ噬菌体DNA分析和测序第76-77页
   1.6 天蚕基因组中内含子的扩增和测序第77页
  2 结果与分析第77-84页
   2.1 λ噬菌体DNA的快速抽提第77-78页
   2.2 Vg基因的测序和分析第78-84页
 六 讨论第84-89页
  1 昆虫卵黄原蛋白一级结构比较第84-86页
  2 昆虫卵黄原蛋白最初转录模板的比较第86-87页
  3 卵黄原蛋白表达的特点第87页
  4 卵黄原蛋白被吸收的特点及应用第87-88页
  5 目前存在的问题及展望第88-89页
参考文献第89-100页
发表论文及参加的研究课题第100-101页
附录Ⅰ 缩写字符中、英文对照表第101-102页
附录Ⅱ 构图位点的卡方检测值表第102-110页
附表Ⅲ 实验中的引物名称及序列第110-112页
致谢第112页

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