中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-15页 |
第一部分 家蚕AFLP图谱的构建 | 第15-46页 |
一 文献综述 | 第15-24页 |
1 分子连锁图谱的特点和应用 | 第15-18页 |
1.1 分子连锁图谱的特点 | 第15-16页 |
1.2 分子连锁图谱的应用 | 第16-18页 |
1.2.1 连锁图在比较基因组作图中的应用 | 第16页 |
1.2.2 利用分子连锁图进行数量性状基因定位 | 第16-17页 |
1.2.3 连锁图谱在分子标记辅助育种中的应用 | 第17-18页 |
2 家蚕分子连锁图谱的构建及其研究进展 | 第18-20页 |
2.1 家蚕分子连锁图的构建 | 第18-19页 |
2.2 连锁图谱在家蚕上的应用 | 第19-20页 |
3 AFLP技术在遗传图谱构建中的应用 | 第20-22页 |
3.1 AFLP技术 | 第20-22页 |
3.1.1 AFLP的基本原理 | 第21页 |
3.1.2 AFLP分析的一般过程 | 第21-22页 |
4 自然有色织物利用的现状及前景 | 第22-23页 |
5 绿茧基因及定位研究概况 | 第23-24页 |
二 序言 | 第24-26页 |
1 研究背景及意义 | 第24-25页 |
2 实验基本路线 | 第25-26页 |
三 家蚕的AFLP分析 | 第26-40页 |
1 材料与方法 | 第26-32页 |
1.1 作图材料 | 第26页 |
1.2 主要仪器设备 | 第26页 |
1.3 主要生化试剂及溶液的配制 | 第26-27页 |
1.4 数据统计分析软件 | 第27页 |
1.5 基因组DNA的制备 | 第27页 |
1.6 模板DNA的制备 | 第27-28页 |
1.6.1 基因组DNA的酶切 | 第27页 |
1.6.2 接头的准备 | 第27-28页 |
1.6.3 连接 | 第28页 |
1.7 模板DNA的扩增 | 第28-29页 |
1.7.1 预扩增 | 第28页 |
1.7.2 选择性扩增 | 第28-29页 |
1.8 扩增产物的凝胶电泳检测 | 第29-30页 |
1.8.1 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第29页 |
1.8.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第29-30页 |
1.9 数据统计与分析 | 第30-32页 |
1.9.1 AFLP标记的统计与分析 | 第30-31页 |
1.9.2 连锁分析与作图 | 第31-32页 |
2 结果与分析 | 第32-40页 |
2.1 基因组DNA的制备 | 第32-33页 |
2.2 扩增产物的凝胶电泳检测 | 第33-34页 |
2.2.1 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第33页 |
2.2.2 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第33-34页 |
2.3 数据统计与分析 | 第34-40页 |
2.3.1 AFLP标记的统计与分析 | 第34页 |
2.3.2 连锁分析与作图 | 第34-40页 |
四 讨论 | 第40-46页 |
1 作图群体的大小 | 第40-41页 |
2 作图材料的选择 | 第41页 |
3 家蚕的雌不发生交换对F2作图群体的影响 | 第41-44页 |
4 限制性内切酶的选择 | 第44页 |
5 家蚕AFLP分子标记的分离模式 | 第44-45页 |
6 目前的问题及解决的方法 | 第45-46页 |
第二部分 天蚕卵黄原蛋白基因的克隆 | 第46-89页 |
一 文献综述 | 第46-57页 |
1 蚕功能基因克隆研究 | 第46页 |
2 鳞翅目昆虫有关卵形成的蛋白的研究 | 第46-49页 |
3 卵黄原蛋白(Vgs) | 第49-56页 |
3.1 结构特性 | 第50-51页 |
3.2 测序分析和比较 | 第51-56页 |
3.2.1 聚丝氨酸区域 | 第52-53页 |
3.2.2 Vg前体的剪切位点 | 第53-55页 |
3.2.3 进化关系 | 第55-56页 |
3.3 激素对卵黄原蛋白表达的影响 | 第56-57页 |
二 序言 | 第57-60页 |
1 研究背景 | 第57-58页 |
2 目的和意义 | 第58-59页 |
3 研究基本路线 | 第59-60页 |
三 天蚕基因组DNA的抽提和文库的构建 | 第60-67页 |
1 材料与方法 | 第60-65页 |
1.1 天蚕材料 | 第60页 |
1.2 主要仪器设备 | 第60页 |
1.3 主要生化试剂及常用溶液的配制 | 第60页 |
1.4 基因组DNA的制备 | 第60-61页 |
1.5 基因组文库的构建 | 第61-65页 |
1.5.1 基因组DNA的限制性内切酶的消化 | 第61-62页 |
1.5.2 插入DNA片段和λDASHⅡ载体的连接 | 第62-63页 |
1.5.3 重组载体的包装 | 第63页 |
1.5.4 包装产物的滴度检测 | 第63-64页 |
1.5.5 构建文库的扩增 | 第64-65页 |
2 结果与分析 | 第65-67页 |
2.1 基因组DNA的抽提 | 第65页 |
2.2 文库的构建 | 第65-67页 |
2.2.1 消化基因组DNA的限制性内切酶的选择 | 第65页 |
2.2.2 载体的选择 | 第65-66页 |
2.2.3 连接 | 第66页 |
2.2.4 包装产物的滴定度 | 第66页 |
2.2.5 构建的扩增文库 | 第66-67页 |
四 探针的制备和文库的筛选 | 第67-75页 |
1 材料与方法 | 第67-72页 |
1.1 天蚕基因组DNA和基因组文库材料 | 第67页 |
1.2 主要仪器设备 | 第67页 |
1.3 主要生化试剂及常用溶液的配制 | 第67-68页 |
1.4 探针的制备 | 第68-69页 |
1.4.1 合成探针引物的筛选 | 第68页 |
1.4.2 探针的合成 | 第68-69页 |
1.5 文库的筛选 | 第69-72页 |
1.5.1 第一次筛选 | 第69-71页 |
1.5.2 第二次筛选 | 第71-72页 |
1.5.3 阳性噬菌斑的获得 | 第72页 |
2 结果与分析 | 第72-75页 |
2.1 探针的制备 | 第72-73页 |
2.2 文库的筛选 | 第73-75页 |
五 阳性λ噬菌体的分析与测序 | 第75-84页 |
1 材料与方法 | 第75-77页 |
1.1 噬菌体菌株和天蚕基因组DNA | 第75页 |
1.2 主要仪器设备 | 第75页 |
1.3 主要生化试剂及常用溶液 | 第75页 |
1.4 λ噬菌体DNA的快速抽提 | 第75-76页 |
1.5 阳性λ噬菌体DNA分析和测序 | 第76-77页 |
1.6 天蚕基因组中内含子的扩增和测序 | 第77页 |
2 结果与分析 | 第77-84页 |
2.1 λ噬菌体DNA的快速抽提 | 第77-78页 |
2.2 Vg基因的测序和分析 | 第78-84页 |
六 讨论 | 第84-89页 |
1 昆虫卵黄原蛋白一级结构比较 | 第84-86页 |
2 昆虫卵黄原蛋白最初转录模板的比较 | 第86-87页 |
3 卵黄原蛋白表达的特点 | 第87页 |
4 卵黄原蛋白被吸收的特点及应用 | 第87-88页 |
5 目前存在的问题及展望 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-100页 |
发表论文及参加的研究课题 | 第100-101页 |
附录Ⅰ 缩写字符中、英文对照表 | 第101-102页 |
附录Ⅱ 构图位点的卡方检测值表 | 第102-110页 |
附表Ⅲ 实验中的引物名称及序列 | 第110-112页 |
致谢 | 第112页 |