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番木瓜环斑病毒CI互作寄主因子的筛选与分析

摘要第1-5页
Abstract第5-8页
1 引言第8-18页
   ·番木瓜环斑病毒概述第9-12页
     ·PRSV株系、寄主范围第9页
     ·症状表现和传播途径第9-10页
     ·PRSV基因组结构和编码蛋白第10页
     ·PRSV编码蛋白的功能第10-12页
     ·番木瓜抗PRSV基因工程研究第12页
   ·植物病毒蛋白与寄主植物蛋白间的互作研究现状第12-15页
     ·植物病毒蛋白与寄主蛋白间互作参与病毒复制第12-13页
     ·病毒运动相关蛋白与寄主蛋白间互作参与病毒运动第13-15页
     ·寄主植物蛋白与病毒蛋白互作诱发症状产生第15页
   ·本实验研究蛋白质相互作用的方Sos恢复系统第15-16页
   ·本研究的目的意义和技术路线第16-18页
     ·目的意义第16-17页
     ·技术路线第17-18页
2 材料与方法第18-39页
   ·材料与试剂第18-27页
     ·植物材料和病毒株第18页
     ·番木瓜Sos恢复系统cDNA文库第18页
     ·生化试剂第18-19页
     ·载体和菌株第19-23页
     ·培养基第23-24页
     ·序列分析软件第24页
     ·酵母感受态细胞的制备和评估第24-26页
     ·主要使用仪器第26页
     ·基因与引物第26-27页
   ·实验方法第27-39页
     ·CI诱饵载体的构建第27-32页
     ·共转化与诱饵蛋白自激活作用检测第32-33页
     ·CI互作寄主因子初次筛选第33-36页
     ·候选阳性文库克隆的分离及回转验证第36-38页
     ·番木瓜Elongation factor-Tu全长基因的克隆第38-39页
3 结果与分析第39-50页
   ·番木瓜果实总RNA的提取第39页
   ·CI诱饵载体构建及自激活检测第39-42页
     ·RT-PCR扩增CI基因第39页
     ·克隆载体和表达载体的鉴定第39-40页
     ·酵母菌株cdc25H(α)表型鉴定第40-41页
     ·酵母感受态细胞的制备和质量评估第41页
     ·诱饵蛋白的自激活作用的检测第41-42页
   ·CI基因互作寄主因子初次筛选第42-43页
   ·候选阳性文库克隆PCR鉴定及测序分析第43-44页
   ·候选阳性文库克隆的回转验证第44-46页
   ·番木瓜Elongation Factor-Tu全长克隆与序列分析第46-50页
     ·番木瓜Elongation Factor-Tu基因全长序列的获得第46-47页
     ·番木瓜EF-Tu全长cDNA序列分析第47-50页
4 讨论第50-53页
5 结论第53-54页
参考文献第54-63页
致谢第63页

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