目录 | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
英文缩略语 | 第10-11页 |
第一部分 文献综述 | 第11-35页 |
第一章 RNA干扰(RNAi)技术及其在植物中的应用研究进展 | 第11-24页 |
1 RNAi技术的发现 | 第11-12页 |
2 RNAi技术发生的机制 | 第12-17页 |
3 RNAi作用过程中的相关的酶和蛋白 | 第17-19页 |
4 RNAi的特征 | 第19-20页 |
5 RNAi技术在植物中的应用 | 第20-24页 |
第二章 植物Na~+/H~+逆向转运蛋白与耐盐相关性 | 第24-28页 |
1 Na~+/H~+逆向转运蛋白的发现 | 第24-25页 |
2 植物液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白基因的克隆 | 第25页 |
3 液泡膜Na~+/H~+逆向运转体的结构特征 | 第25-26页 |
4 Na~+/H~+逆向转运蛋白的功能 | 第26页 |
5 Na~+/H~+逆向转运蛋白与植物耐盐性 | 第26-28页 |
第三章 本研究的目的与意义 | 第28-29页 |
参考文献 | 第29-35页 |
第二部分 实验部分 | 第35-70页 |
第一章 花花柴液泡膜Na~+/H~+反向运输载体NHX1基因的RNA干涉对植株耐盐性的影响 | 第35-61页 |
1 材料与方法 | 第36-44页 |
·材料 | 第36页 |
·方法 | 第36-44页 |
·农杆菌的转化 | 第36-37页 |
·根癌农杆菌介导叶盘法转化花花柴及植株再生 | 第37-38页 |
·植物基因组DNA的提取 | 第38页 |
·转基因花花柴的PCR鉴定 | 第38-39页 |
·转基因阳性植株RNA提取 | 第39页 |
·转基因阳性植株DNaseI消化总RNA | 第39-40页 |
·半定量PCR检测 | 第40-41页 |
·野生型花花柴耐盐浓度的探索 | 第41页 |
·MDA含量测定 | 第41-42页 |
·相对电导率测定 | 第42-43页 |
·叶绿素含量测定 | 第43页 |
·根长测定 | 第43页 |
·转基因花花柴叶片组织耐盐性试验 | 第43页 |
·转基因花花柴叶片组织抗氧化试验 | 第43-44页 |
2 结果与分析 | 第44-56页 |
·植物RNAi载体转化农杆菌鉴定 | 第44页 |
·潮霉素浓度对花花柴叶片不定芽再生的影响 | 第44-45页 |
·菌液浓度及浸染时间的确定 | 第45页 |
·转基因花花柴的获得 | 第45-46页 |
·植物基因组DNA提取及抗性苗的初步鉴定 | 第46-47页 |
·花花柴阳性植株RNA提取及DNaseI消化 | 第47页 |
·半定量PCR检测 | 第47-48页 |
·花花柴耐盐浓度临界值探索 | 第48-49页 |
·MDA含量测定 | 第49-51页 |
·转基因植株相对电导率测定 | 第51-52页 |
·转基因植株叶绿素测定 | 第52-54页 |
·根长的测定 | 第54-55页 |
·叶片组织抗氧化试验 | 第55-56页 |
3 讨论 | 第56-59页 |
·影响花花柴的遗传转化体系的因素 | 第57页 |
·KcNHX1基因是花花柴耐盐过程中的主效基因之一 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-61页 |
第二章 花花柴液泡膜Na~+/H~+反向运输载体NHX2基因的RNA干涉对植株耐盐性的影响 | 第61-70页 |
1 材料与方法 | 第62-63页 |
·材料 | 第62页 |
·方法 | 第62-63页 |
·农杆菌的转化[参考第一章1.2.1] | 第62页 |
·转基因花花柴的PCR鉴定 | 第62页 |
·转基因阳性植株的RNA提取[参考第一章1.2.5] | 第62页 |
·转基因阳性植株DNaseI消化总RNA[参考第一章1.2.6] | 第62页 |
·转基因阳性植株的半定量PCR检测 | 第62-63页 |
·转KcNHX2i植株盐处理 | 第63页 |
2 结果与分析 | 第63-68页 |
·植物RNAi载体转化农杆菌鉴定 | 第63-64页 |
·植物基因组DNA的提取及抗性苗的初步鉴定 | 第64页 |
·花花柴阳性植株RNA提取及DNaseI消化 | 第64-65页 |
·转基因植株的半定量PCR检测 | 第65页 |
·盐胁迫下植株MDA含量测定 | 第65-66页 |
·瓶中盐胁迫下植物叶绿素测定 | 第66-67页 |
·盐处理下KcNHX1与KcNHX2的表达差异 | 第67-68页 |
3 讨论 | 第68页 |
参考文献 | 第68-70页 |
结论 | 第70页 |
展望 | 第70-71页 |
个人简历 | 第71-72页 |
致谢 | 第72-73页 |