中文摘要 | 第1-13页 |
Abstract | 第13-15页 |
第一章 前言 | 第15-31页 |
1 文献综述 | 第15-30页 |
·β-1,3-葡聚糖酶概述 | 第15-16页 |
·β-1,3-葡聚糖酶的来源 | 第16-17页 |
·β-1,3-葡聚糖酶的生理功能 | 第17-18页 |
·β-1,3-葡聚糖酶的生物学以及分子生物学研究 | 第18-25页 |
·植物β-1,3-葡聚糖酶 | 第18-21页 |
·微生物β-1,3-葡聚糖酶 | 第21-25页 |
·无脊椎动物β-1,3-葡聚糖酶 | 第25页 |
·β-1,3-葡聚糖酶的应用 | 第25-28页 |
·在饲料工业中的应用 | 第25-26页 |
·在啤酒酿造业中的应用 | 第26-27页 |
·食品添加剂 | 第27页 |
·在医学中的应用 | 第27-28页 |
·制备酵母β-1,3-葡聚糖 | 第28页 |
·抗真菌 | 第28页 |
·展望 | 第28-30页 |
2 选题的目的意义、研究内容、技术路线 | 第30-31页 |
·选题的目的意义 | 第30页 |
·研究内容 | 第30页 |
·技术路线 | 第30-31页 |
第二章 嗜热毛壳菌热稳定性Β-1,3-葡聚糖酶的纯化及特性 | 第31-53页 |
1 引言 | 第31-32页 |
2 材料与方法 | 第32-37页 |
·实验材料 | 第32-33页 |
·供试菌株 | 第32页 |
·培养基 | 第32页 |
·主要仪器和试剂 | 第32-33页 |
·实验方法 | 第33-37页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶酶活力测定 | 第33页 |
·培养时间对嗜热毛壳菌产β-1,3-葡聚糖酶的影响 | 第33页 |
·嗜热毛壳菌产β-1,3-葡聚糖酶的培养 | 第33页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶的分离纯化 | 第33-35页 |
·SDS-PAGE 对纯化得嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶的纯度鉴定及测定其纯化分子量 | 第35页 |
·高效液相色谱法测定嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶酶解产物 | 第35页 |
·蛋白质含量测定 | 第35页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶酶学特性的研究 | 第35-36页 |
·纯化得嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶蛋白N-端氨基酸序列测定 | 第36-37页 |
3 结果与分析 | 第37-48页 |
·不同培养时间对嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶活性的影响 | 第37页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶的分离纯化 | 第37-43页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶粗酶液Phenyl-Sepharose 疏水柱层析 | 第37-38页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶粗酶液DEAE-Sepharose 阴离子交换柱层析 | 第38-39页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶粗酶液Sephacryl S-100 凝胶柱层析 | 第39-40页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶纯化过程总表 | 第40-41页 |
·各层析处理后嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶蛋白纯度的鉴定 | 第41页 |
·纯化得嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶蛋白分子量的鉴定 | 第41-43页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶的特性研究 | 第43-47页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶最适反应温度 | 第43-44页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶最适反应pH | 第44页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶的热稳定性 | 第44-45页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶的pH 稳定性 | 第45-46页 |
·不同金属离子对嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶活性的影响 | 第46页 |
·高效液相色谱法测定嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶的降解作用方式 | 第46-47页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶酶蛋白N-端氨基酸序列测定 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-53页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶的特性 | 第48-49页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶的纯化方法 | 第49-50页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶降解作用的方式 | 第50页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶的稳定性 | 第50-51页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶活性与金属离子的关系 | 第51页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶活性与其疏水性的关系 | 第51页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶的应用潜力和存在的问题 | 第51-53页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶在生物防治方面的应用前景 | 第52页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶工业化大规模生产、利用需解决的问题 | 第52-53页 |
第三章 嗜热毛壳菌热稳定性Β-1,3-葡聚糖酶基因的CDNA 克隆及其序列分析 | 第53-79页 |
1 引言 | 第53页 |
2 材料和方法 | 第53-61页 |
·材料 | 第53-55页 |
·供试菌株 | 第53-54页 |
·质粒 | 第54页 |
·酶和生化试剂 | 第54页 |
·仪器 | 第54页 |
·培养基 | 第54页 |
·溶液配制 | 第54-55页 |
·PCR 引物 | 第55页 |
·实验方法 | 第55-61页 |
·产β-1,3-葡聚糖酶菌丝的诱导培养 | 第55页 |
·总 RNA 的提取(Trizol 法) | 第55-56页 |
·紫外检测 RNA 产率和纯度 | 第56页 |
·反转录cDNA 第一链的合成 | 第56页 |
·目的基因cDNA 的分离 | 第56-61页 |
·序列的生物信息学分析 | 第61页 |
3 结果与分析 | 第61-76页 |
·嗜热毛壳菌总RNA 的提取 | 第61页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶cDNA 的克隆 | 第61-63页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶基因glu-I和glu-N的核苷酸序列及其编码氨基酸的序列 | 第63-65页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶基因glu-I的核苷酸序列及推测的相应氨基酸序列 | 第63-64页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶基因glu-N的核苷酸序列及推测的相应氨基酸序列 | 第64-65页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶基因glu-I 和glu-N编码氨基酸序列的同源性比较 | 第65-68页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶基因glu-I 编码氨基酸密码子偏爱性分析 | 第68-69页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶基因glu-I 编码氨基酸的序列分析 | 第69-73页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶基因glu-I 编码氨基酸的组成 | 第69-72页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶基因glu-I 编码氨基酸的结构预测 | 第72-73页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶基因glu-N 编码氨基酸密码子偏爱性分析 | 第73-74页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶基因glu-N 编码的氨基酸序列分析 | 第74-76页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶基因glu-N 编码氨基酸组成 | 第74-76页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶基因glu-N 编码氨基酸的结构预测 | 第76页 |
4 讨论 | 第76-79页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶基因及其编码氨基酸分析 | 第76-77页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶cDNA 的克隆 | 第77-78页 |
·嗜热毛壳菌β-1,3-葡聚糖酶基因的研究 | 第78-79页 |
第四章 主要研究结论及后续研究建议 | 第79-80页 |
1 本研究获得的主要结论 | 第79页 |
2 对后续研究工作的建议 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-107页 |
致谢 | 第107-108页 |
ACKNOWLEDGEMENT | 第108-110页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第110页 |