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SeNHX1转入洋桔梗的耐盐初步研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-11页
第一章 文献综述第11-26页
   ·盐胁迫对植物的危害第11-12页
   ·植物的耐盐机制第12-17页
     ·渗透调节第12-14页
     ·大分子蛋白类调节第14-15页
     ·细胞内的离子平衡调节第15-16页
     ·生物酶保护系统第16-17页
     ·代谢途径的改变第17页
     ·激素调节第17页
   ·植物液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白的研究进展第17-21页
     ·液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白的发现及基因分离第17-18页
     ·液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白的结构研究第18-19页
     ·液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白的功能研究第19页
     ·液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白的表达调控第19-20页
     ·液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白的基因工程研究第20-21页
   ·洋桔梗的研究进展第21-23页
     ·洋桔梗的基本特征及市场前景第21-22页
     ·洋桔梗组织培养研究进展第22-23页
     ·洋桔梗基因工程研究进展第23页
   ·实验的目的、意义及技术路线第23-26页
     ·实验的目的与意义第23-24页
     ·技术路线第24-26页
第二章 洋桔梗高频再生体系的建立第26-31页
   ·材料与方法第26-27页
     ·植物材料第26页
     ·培养条件第26页
     ·主要仪器及试剂第26-27页
     ·实验方法第27页
   ·结果与分析第27-30页
     ·不同激素配比对叶芽分化的影响第27-29页
     ·激素浓度对不定芽生长的影响第29页
     ·生长素对试管苗生根的影响第29-30页
     ·试管苗的移栽第30页
   ·讨论第30-31页
第三章 pBin438-SeNHX1双元表达载体的构建第31-42页
   ·实验材料第31-32页
     ·菌株和质粒第31页
     ·试剂第31页
     ·主要仪器设备第31-32页
   ·实验方法第32-37页
     ·含有目的基因质粒的提取第32页
     ·目的基因SeNHX1 的扩增第32-33页
     ·PCR 产物回收与纯化第33-34页
     ·PCR 产物与T 载体的重组第34页
     ·大肠杆菌感受态的制备第34页
     ·大肠杆菌转化第34-35页
     ·重组载体的鉴定第35页
     ·pBin438-SeNHX1 载体的构建第35-36页
     ·农杆菌C58 感受态细胞的制备第36页
     ·农杆菌C58 的电击转化第36页
     ·阳性转化菌株的鉴定第36-37页
   ·结果与分析第37-41页
     ·SeNHX1 基因的PCR 扩增第37-38页
     ·重组T 载体的鉴定第38-39页
     ·表达载体pBin438-SeNHX1 的鉴定第39-40页
     ·农杆菌转化子的鉴定第40-41页
   ·讨论第41-42页
第四章 农杆菌介导的洋桔梗转化条件的优化第42-52页
   ·实验材料第42-43页
     ·植物材料与转化受体第42页
     ·质粒和菌种第42-43页
     ·培养基第43页
   ·实验方法第43-45页
     ·卡那霉素(Kan)适宜筛选压力的确定第43-44页
     ·头孢霉素(Cef)浓度的确定第44页
     ·NaCl 胁迫压力的确定第44页
     ·转化条件的优化第44-45页
     ·农杆菌介导的遗传转化程序第45页
   ·结果与分析第45-50页
     ·Kan 筛选压力的确定第45-46页
     ·Cef 浓度的确定第46-47页
     ·洋桔梗对NaCl 的天然抗性第47页
     ·转化条件的优化第47-50页
   ·讨论第50-52页
     ·Kan 的筛选临界浓度第50页
     ·Cef 抑菌抗生素浓度的选择第50页
     ·农杆菌浓度及浸染时间第50-51页
     ·共培养时间第51页
     ·AS 浓度第51页
     ·外植体材料的生理状态对转化效率的影响第51-52页
第五章 阳性植株的筛选与检测第52-60页
   ·实验材料第52页
     ·试剂第52页
     ·仪器设备第52页
   ·实验方法第52-54页
     ·Kan 抗性筛选第52页
     ·NaCl 抗性筛选第52-53页
     ·分子水平的检测第53页
     ·叶绿素含量的测定第53-54页
     ·游离脯氨酸含量的测定第54页
   ·结果与分析第54-57页
     ·Kan 的抗性表型第54-55页
     ·NaCl 的抗性表型第55-56页
     ·PCR 分子检测第56页
     ·叶绿素含量的测定第56-57页
     ·脯氨酸含量的测定第57页
   ·讨论第57-60页
     ·抗生素筛选第57-58页
     ·NaCl 抗性筛选第58页
     ·分子水平的检测第58-59页
     ·叶绿素含量变化第59页
     ·脯氨酸含量变化第59-60页
第六章 结论第60-61页
参考文献第61-65页
发表论文和参加科研情况说明第65-66页
致谢第66页

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