| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-38页 |
| ·激发子 | 第14-20页 |
| ·寡糖激发子 | 第15-16页 |
| ·脂多糖激发子 | 第16页 |
| ·糖蛋白激发子 | 第16-17页 |
| ·多肽和蛋白类激发子 | 第17-18页 |
| ·非生物激发子和物理刺激因子 | 第18页 |
| ·激发子与植物的互作机制 | 第18-19页 |
| ·激发子的应用前景与展望 | 第19-20页 |
| ·蛋白质的表达与纯化策略 | 第20-25页 |
| ·表达系统 | 第20-22页 |
| ·高密度发酵 | 第22-24页 |
| ·分离纯化方法 | 第24-25页 |
| ·蛋白质的结构研究 | 第25-36页 |
| ·圆二色谱 | 第26-28页 |
| ·同源建模 | 第28-30页 |
| ·X-射线晶体学 | 第30-35页 |
| ·小角散射 | 第35-36页 |
| ·研究目的和意义 | 第36-37页 |
| ·技术路线 | 第37-38页 |
| 第二章 蛋白激发子PeaT1 的表达与纯化 | 第38-56页 |
| ·PeaT1 的表达载体构建 | 第38-42页 |
| ·材料与试剂 | 第38页 |
| ·PeaT1 基因序列的PCR扩增 | 第38-39页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第39页 |
| ·PCR产物与pET28a载体的双酶切 | 第39页 |
| ·PCR产物与pET28a载体的胶回收 | 第39-40页 |
| ·PCR产物与pET28a载体的连接 | 第40页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌DH5α感受态细胞 | 第40页 |
| ·阳性克隆pET28a-peaT1 的PCR鉴定 | 第40-41页 |
| ·阳性克隆质粒DNA的提取 | 第41-42页 |
| ·阳性克隆质粒DNA转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞 | 第42页 |
| ·PeaT1 的高密度发酵 | 第42-45页 |
| ·材料与试剂 | 第42页 |
| ·培养基与缓冲液 | 第42-43页 |
| ·主要仪器 | 第43页 |
| ·PeaT1 工程菌的分批补料高密度发酵 | 第43页 |
| ·菌体的收集和处理 | 第43页 |
| ·使用Ni-NTA Resin柱进行初步纯化 | 第43-44页 |
| ·目的蛋白的SDS-PAGE检测 | 第44页 |
| ·目的蛋白浓度的测定 | 第44-45页 |
| ·PeaT1 的纯化 | 第45-47页 |
| ·材料与试剂 | 第45页 |
| ·主要仪器 | 第45页 |
| ·主要缓冲液 | 第45页 |
| ·阴离子交换层析 | 第45-46页 |
| ·分子筛层析 | 第46页 |
| ·纯化后PeaT1 蛋白的检测 | 第46页 |
| ·PeaT1 蛋白的浓度检测 | 第46-47页 |
| ·结果与分析 | 第47-55页 |
| ·PeaT1 表达载体的构建与优化 | 第47-50页 |
| ·PeaT1 的高密度发酵 | 第50-51页 |
| ·PeaT1 的纯化 | 第51-55页 |
| ·讨论与小结 | 第55-56页 |
| 第三章 蛋白激发子PeaT1 的生物学功能 | 第56-61页 |
| ·供试材料 | 第56页 |
| ·PeaT1 对水稻抗旱性的影响 | 第56页 |
| ·PeaT1 对水稻低温条件下生长的影响 | 第56页 |
| ·PeaT1 诱导烟草对TMV抗性的影响 | 第56-57页 |
| ·结果与分析 | 第57-59页 |
| ·PeaT1 诱导水稻提高抗旱性 | 第57-58页 |
| ·PeaT1 促进水稻低温生长 | 第58-59页 |
| ·PeaT1 诱导烟草对TMV的抗性 | 第59页 |
| ·讨论与小结 | 第59-61页 |
| 第四章 蛋白激发子PeaT1 的二级结构与耐热机制研究 | 第61-66页 |
| ·实验仪器 | 第61页 |
| ·样品处理与装样 | 第61-62页 |
| ·样品处理 | 第61页 |
| ·装样 | 第61-62页 |
| ·样品池清洗 | 第62页 |
| ·样品检测 | 第62-63页 |
| ·数据处理 | 第63页 |
| ·结果与分析 | 第63-65页 |
| ·讨论与小结 | 第65-66页 |
| 第五章 蛋白激发子PeaT1 的三级结构研究 | 第66-81页 |
| ·小角散射 | 第66-68页 |
| ·实验器材 | 第66页 |
| ·样品处理与装样 | 第66-67页 |
| ·样品检测 | 第67-68页 |
| ·数据处理 | 第68页 |
| ·PeaT1 蛋白晶体结构解析 | 第68-69页 |
| ·材料与试剂 | 第68页 |
| ·结晶条件筛选 | 第68页 |
| ·结晶条件的优化 | 第68-69页 |
| ·晶体的捞取与保存 | 第69页 |
| ·晶体的X-衍射 | 第69页 |
| ·PeaT1 的结构解析 | 第69页 |
| ·PeaT1 的三级结构预测 | 第69-70页 |
| ·SWISS-MODEL服务器提交方式 | 第70页 |
| ·PeaT1 的同源建模 | 第70页 |
| ·结果与分析 | 第70-80页 |
| ·PeaT1 的小角散射结构 | 第70-72页 |
| ·PeaT1 的晶体结构 | 第72-77页 |
| ·PeaT1 的同源建模 | 第77-78页 |
| ·PeaT1 三级结构的综合分析 | 第78-80页 |
| ·讨论与小结 | 第80-81页 |
| 第六章 PeaT1 结构与功能的关系 | 第81-87页 |
| ·PeaT1 四个片段表达蛋白的获得 | 第81-85页 |
| ·材料与试剂 | 第81页 |
| ·PeaT1 四个片段的表达载体构建 | 第81-84页 |
| ·PeaT1 四个片段的表达和纯化 | 第84-85页 |
| ·PeaT1 四个片段的抗TMV活性检测 | 第85页 |
| ·结果与分析 | 第85-86页 |
| ·PeaT1 四个片段的表达和纯化 | 第85页 |
| ·PeaT1 四个片段诱导烟草抗TMV活性的检测 | 第85-86页 |
| ·PeaT1 三级结构与功能的关系 | 第86页 |
| ·讨论与小结 | 第86-87页 |
| 全文结论 | 第87-88页 |
| 创新点 | 第88-89页 |
| 研究展望 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-100页 |
| 附录 | 第100-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 作者简历 | 第106页 |