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受水稻白叶枯病菌抑制的水稻C端结合蛋白基因OsCtBP-A的功能鉴定

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第一章 绪论第12-24页
   ·水稻白叶枯病研究概况第12-14页
     ·水稻白叶枯病第12页
     ·水稻抗白叶枯病基因研究进展第12-14页
   ·CtBPs第14-18页
     ·动物CtBP基因第14-15页
     ·植物CtBP基因第15-16页
     ·CtBP家族基因的进化分析第16-18页
   ·基因功能研究的主要方法第18-23页
     ·差异表达基因的筛选第18-19页
     ·生物信息学分析第19页
     ·基因的时空表达谱分析第19-20页
     ·转基因研究第20-21页
     ·基因的突变分析第21-22页
     ·酵母双杂交第22-23页
   ·本研究的目的意义和技术路线第23-24页
     ·研究目的及意义第23页
     ·技术路线第23-24页
第二章 水稻基因OsCtBP-A的分子克隆第24-37页
   ·材料与试剂第24页
     ·植物材料第24页
     ·菌种和质粒第24页
     ·供试试剂第24页
   ·实验方法第24-32页
     ·OsCtBP-A的克隆策略第24-25页
     ·OsCtBP-A克隆所用的引物序列第25-26页
     ·水稻叶片RNA的提取第26-27页
     ·cDNA第一链合成第27页
     ·cDNA双链的合成第27页
     ·OsCtBP-A cDNA 5′端克隆(5′RACE)第27-28页
     ·PCR产物的纯化与回收第28-29页
     ·纯化产物与T载体的连接第29页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第29-30页
     ·连接产物热激法转化大肠杆菌第30页
     ·重组质粒的鉴定第30-31页
     ·OsCtBP-A cDNA全长克隆第31-32页
     ·基因生物信息学分析第32页
   ·结果与分析第32-36页
     ·水稻OsCtBP-A基因的克隆第32-33页
     ·水稻OsCtBP-A基因的生物信息学分析第33-36页
   ·本章小结与讨论第36-37页
第三章 OsCtBP-A基因的时空表达特性第37-45页
   ·材料和方法第37-40页
     ·水稻品种、生长调节剂与试剂第37页
     ·水稻的栽培管理及组织样品采集第37页
     ·水稻幼苗的化学诱导剂处理第37-38页
     ·水稻总RNA的提取第38页
     ·cDNA的合成第38页
     ·引物设计第38-39页
     ·Real –time quantitative PCR第39-40页
   ·结果与分析第40-44页
     ·RT-Q-PCR体系的建立第40-41页
     ·OsCtBP-A的组织表达特性第41-42页
     ·OsCtBP-A对外源信号分子的诱导表达特征第42-44页
   ·本章小结与讨论第44-45页
第四章 OsCtBP-A基因功能分析第45-65页
   ·材料与试剂第45-46页
     ·植物材料第45页
     ·菌种和质粒第45-46页
     ·供试试剂第46页
   ·实验方法第46-53页
     ·水稻OsCtBP-A过表达载体的构建与转化第46-48页
     ·农杆菌介导法转化水稻第48-50页
     ·T_0代转基因植株的检测第50-51页
     ·T_0代转基因植株中OsCtBP-A表达的检测第51页
     ·T_0代转基因植株叶片气孔的扫描电镜观察第51-52页
     ·T_1代OsCtBP-A过量表达和RNAi植株的筛选第52页
     ·T_1代转基因植株中OsCtBP-A表达的检测第52页
     ·T_1代转基因植株对水稻白叶枯病的抗性检测第52页
     ·T_1代转基因植株主茎剑叶宽度的测定第52-53页
     ·OsCtBP-A过表达和抑制表达对水稻根系早期发育的影响第53页
     ·T_1代转基因植株对干旱胁迫的反应第53页
   ·结果与分析第53-64页
     ·水稻OsCtBP-A过表达载体的构建与转化第53-54页
     ·pTCK303 表达载体的转化验证第54页
     ·转基因植株的获得第54-56页
     ·T_0代转基因植株的检测第56-58页
     ·T_0代转基因植株中OsCtBP-A表达的检测第58-59页
     ·T_0代转基因植株叶片气孔的扫描电镜观察第59页
     ·T_1代OsCtBP-A过量表达和RNAi植株的筛选第59-60页
     ·T_1代转基因植株中OsCtBP-A表达的检测第60-61页
     ·T_1代转基因植株对水稻白叶枯病菌的抗病检测第61页
     ·T_1代转基因植株主茎剑叶宽度的测定第61-62页
     ·OsCtBP-A过表达和抑制表达对水稻根系早期发育的影响第62-63页
     ·T_1代转基因植株对干旱胁迫的反应第63-64页
   ·本章小结与讨论第64-65页
第五章 全文结论第65-66页
参考文献第66-76页
致谢第76-77页
作者简历第77页

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